人分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞

人分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞 素爾細(xì)胞庫提供遺傳變異細(xì)胞系、正常組織來源細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、工程細(xì)胞系、干細(xì)胞系,涉及人類,大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。...
素爾細(xì)胞庫提供遺傳變異細(xì)胞系、正常組織來源細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、工程細(xì)胞系、干細(xì)胞系,涉及人類,大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。
人分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞
動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)
一節(jié) 大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用簡介
通過大規(guī)模體外培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)哺乳類動物細(xì)胞是生產(chǎn)生物制品的有效方法。2060-70年代,就已創(chuàng)立了可用于大規(guī)模培養(yǎng)動物細(xì)胞的微載體培養(yǎng)系統(tǒng)和中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。近十?dāng)?shù)年來,由于人類對生長激素、干擾素、單克隆抗體、疫苗及白細(xì)胞介素等生物制品的需求猛增,以傳統(tǒng)的生物化學(xué)技術(shù)從動物組織獲取生物制品已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足這一需求。隨著細(xì)胞培養(yǎng)的原理與方法日臻完善,動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)趨于成熟。
所謂動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)(large-scale culture technology)是指在人工條件下(設(shè)定ph、溫度、溶氧等),在細(xì)胞生物反應(yīng)器(bioreactor)中高密度大量培養(yǎng)動物細(xì)胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。目前可大規(guī)模培養(yǎng)的動物細(xì)胞有雞胚、豬腎、猴腎、地鼠腎等多種原代細(xì)胞及人二倍體細(xì)胞、cho(中華倉鼠卵巢)細(xì)胞、BHK-21(倉鼠腎細(xì)胞)、Vero細(xì)胞(非洲綠猴腎傳代細(xì)胞,是貼壁依賴的成纖維細(xì)胞)等,并已成功生產(chǎn)了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、紅細(xì)胞生成素、單克隆抗體等產(chǎn)品。
在過去幾十年來,該技術(shù)經(jīng)有了很大發(fā)展,從使用轉(zhuǎn)瓶(roller bottle) 、CellCube等貼壁細(xì)胞培養(yǎng),發(fā)展為生物反應(yīng)器(Bioreactor)進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。一代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)核心問題是難以產(chǎn)業(yè)化或者說是規(guī)模化生產(chǎn):一是在工藝生產(chǎn)時不能大規(guī)模制備產(chǎn)品;二是非批量生產(chǎn)容易導(dǎo)致產(chǎn)品質(zhì)量的不均一性;三是難以對同批生產(chǎn)進(jìn)行生產(chǎn)和質(zhì)量控制。
人分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞
SUER0479(XR) HMy2.CIR細(xì)胞,人B淋巴母細(xì)胞
SUER0480(XR) hFOB 1.19細(xì)胞,人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞
SUER0481(XR) H9細(xì)胞,人T淋巴系細(xì)胞
SUER0482(XR) HFF-1細(xì)胞,人包皮成纖維細(xì)胞
SUER0483(XR) HL / KMB-17細(xì)胞,人二倍體系細(xì)胞
SUER0484(XR) CCL-153細(xì)胞,人肺成纖維細(xì)胞
SUER0485(XR) HLF-a細(xì)胞,人肺細(xì)胞
SUER0486(XR) BB7.2細(xì)胞,人分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞
SUER0487(XR) L-02細(xì)胞,人肝細(xì)胞
SUER0488(XR) QSG-7701細(xì)胞,人肝細(xì)胞
SUER0489(XR) LX-2細(xì)胞,人肝星形細(xì)胞
SUER0490(XR) THLE-3細(xì)胞,人肝永生化細(xì)胞
SUER0491(XR) HL-7702(L-02)細(xì)胞,人肝正常細(xì)胞
SUER0492(XR) HCAEC細(xì)胞,人冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞
SUER0493(XR) HLEpiC細(xì)胞,人晶狀體上皮細(xì)胞
SUER0494(XR) KB細(xì)胞,人口腔表皮樣癌細(xì)胞
SUER0495(XR) DOK細(xì)胞,人口腔粘膜癌前病變細(xì)胞
SUER0496(XR) H293T細(xì)胞,人類胚胎腎臟表皮細(xì)胞
SUER0497(XR) CRL-1992人 細(xì)胞,淋巴母細(xì)胞
SUER0498(XR) FD4細(xì)胞,人淋巴與倉鼠肺雜交
SUER0499(XR) FD6細(xì)胞,人淋巴與倉鼠肺雜交細(xì)胞
SUER0500(XR) Hs68細(xì)胞,人男性正常龜頭細(xì)胞哦
SUER0501(XR) SV-HUC-1細(xì)胞,人膀胱上皮永生化細(xì)胞
SUER0502(XR) HLF細(xì)胞,人胚肺細(xì)胞
SUER0503(XR) NRC-5細(xì)胞,人胚肺細(xì)胞
SUER0504(XR) HELF 細(xì)胞,人胚肺成纖維細(xì)胞
SUER0505(XR) HFL1細(xì)胞,人胚肺成纖維細(xì)胞
SUER0506(XR) IMR-90細(xì)胞,人胚肺成纖維細(xì)胞
SUER0507(XR) MRC-5-EGFP+puro
SUER0508(XR) MRC-5細(xì)胞,人胚肺成纖維 細(xì)胞
SUER0509(XR) HLF-02細(xì)胞,人胚肺二倍體細(xì)胞
SUER0510(XR) WI-38細(xì)胞,人胚肺細(xì)胞
人分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞,BB7.2細(xì)胞
隨著生物技術(shù)的發(fā)展,迫切需要大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng),特別是培養(yǎng)表達(dá)特異性蛋白的哺乳動物細(xì)胞,以便獲得大量有用的細(xì)胞表達(dá)產(chǎn)物。采用玻璃瓶靜置或旋轉(zhuǎn)瓶的培養(yǎng)方法,已不能滿足所需細(xì)胞數(shù)量及其分泌產(chǎn)物。因而必須為工業(yè)化生產(chǎn)一種新的技術(shù)方法。自70年代以來,細(xì)胞培養(yǎng)用生物反應(yīng)器有很大的發(fā)展,種類越來越多,規(guī)模越來越大,較常見的細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器有空氣提升反應(yīng)器,中空纖維管反應(yīng)器,無泡攪拌反應(yīng)器及籃式生物反應(yīng)器等。八十年代以來,人們逐漸開始以生物反應(yīng)器培養(yǎng)代替鼠腹水的方法獲得單克隆抗體。
動物細(xì)胞是一種無細(xì)胞壁的真核細(xì)胞,生長緩慢,對培養(yǎng)環(huán)境十分敏感。采用傳統(tǒng)的生物化工技術(shù)進(jìn)行動物細(xì)胞大量培養(yǎng),除了要滿足培養(yǎng)過程必需的營養(yǎng)要求外,有必要建立合理的控制模型,進(jìn)行pH和溶氧(DO)的控制。細(xì)胞生物反應(yīng)器可通過微機有序地定量地控制加入動物細(xì)胞培養(yǎng)罐內(nèi)的空氣、氧氣、氮氣和二氧化碳四種氣體的流量,使其保持的比例來控制細(xì)胞培養(yǎng)液中的pH值和溶氧水平,使系統(tǒng)始終處于狀態(tài),以滿足動物細(xì)胞的生長對pH值和溶解氧的需要。如為提高或達(dá)到一定的溶氧水平可改變通入培養(yǎng)罐內(nèi)氣體中氧氣和氮氣的比例來實現(xiàn)控制DO值的目的。采用二氧化碳/碳酸氫鈉(CO2/NaHCO3)緩沖液系統(tǒng)來控制培養(yǎng)液的pH值是一種較好的方法。
現(xiàn)在,由于動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在規(guī)模和可靠性方面都不斷發(fā)展,且從中得到的蛋白質(zhì)也被證明是安全有效的,因此人們對動物細(xì)胞培養(yǎng)的態(tài)度已經(jīng)發(fā)生了改變。許多人用和獸用的重要蛋白質(zhì)藥物和疫苗,尤其是那些相對較大、較復(fù)雜或糖基化(glycosylated)的蛋白質(zhì)來說,動物細(xì)胞培養(yǎng)是的生產(chǎn)方式。60年代初,英國AVRI研究所在貼壁細(xì)胞系BHK21中將口蹄疫病毒培養(yǎng)成功后,從初的200ml和800ml玻璃容器開始,很快就放大到30L和100L不銹鋼罐的培養(yǎng)規(guī)模。使用的是基于Eagle's配方的培養(yǎng)基,補充5%成年牛血清和蛋白胨。1967年以后,Wellcome(現(xiàn)為Cooper動物保?。┘瘓F(tuán)分布于歐洲、非洲和南美洲8個的生產(chǎn)廠商,應(yīng)用此項技術(shù)工業(yè)規(guī)模化生產(chǎn)口蹄疫疫苗和獸用狂犬疫苗,已掌握了5000L的細(xì)胞罐大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)。
目前已實現(xiàn)商業(yè)化的產(chǎn)品有:口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗、牛白血病病毒疫苗、脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗、乙型肝炎疫苗、皰瘡病毒疫苗、巨細(xì)胞病毒疫苗、α及β干擾素、血纖維蛋白溶酶原激活劑、凝血因子Ⅷ和Ⅸ、促紅細(xì)胞素、松弛素、生長激素、蛋白C、免疫球蛋白、尿激酶、激肽釋放酶及200種單克隆抗體等。其中,口蹄疫疫苗是動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)方法生產(chǎn)的主要產(chǎn)品之一。1983年,英國Wellcome公司就已能夠利用動物細(xì)胞進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)口蹄疫疫苗。美國Genentech公司應(yīng)用SV40為載體,將乙型肝炎病毒表面抗原基因插入哺乳動物細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá),已生產(chǎn)出乙型肝炎疫苗。英國Wellcome公司采用8000L Namalwa細(xì)胞生產(chǎn)α干擾素。英國Celltech公司用氣升式生物反應(yīng)器生α、β和γ干擾素;用無血清培養(yǎng)液在10000L氣升式生物反應(yīng)器中培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體。美國Endotronic公司用中空纖維生物反應(yīng)器大規(guī)模培養(yǎng)動物細(xì)胞生產(chǎn)出免疫球蛋白G、A、M和尿激酶、人生長激素等
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