慢性淋巴細(xì)胞白血病-小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤細(xì)胞，膠樣癌細(xì)胞系，EHEB細(xì)胞素爾細(xì)胞庫提供遺傳變異細(xì)胞系、正常組織來源細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、工程細(xì)胞系、干細(xì)胞系，涉及人類，大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、...

 慢性淋巴細(xì)胞白血病-小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤細(xì)胞，膠樣癌細(xì)胞系，EHEB細(xì)胞

素爾細(xì)胞庫提供遺傳變異細(xì)胞系、正常組織來源細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞系、工程細(xì)胞系、干細(xì)胞系，涉及人類，大鼠、小鼠、鳥類、倉鼠、魚類、貓類、狗、牛、貂、豬、恒河猴、長鼻袋鼠等。

 細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理與技術(shù)

現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基因工程技術(shù)、細(xì)胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細(xì)胞培養(yǎng)有密切關(guān)系，特別是在醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展，細(xì)胞培養(yǎng)更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的?；蚬こ桃腋我呙绾芏嗍且訡HO細(xì)胞作為載體；細(xì)胞工程中更是離不細(xì)胞培養(yǎng)，雜交瘤單克隆抗體，完全是通過細(xì)胞培養(yǎng)來實(shí)現(xiàn)的，既使是現(xiàn)在飛速發(fā)展的基因工程抗體也離不開細(xì)胞培養(yǎng)。正在倍受重視的基因治療、體細(xì)胞治療也要經(jīng)過細(xì)胞培養(yǎng)過程才能實(shí)現(xiàn)，發(fā)酵工程和酶工程有的也與細(xì)胞培養(yǎng)密切相關(guān)?？傊?，細(xì)胞培養(yǎng)在整個生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展中起到了很關(guān)鍵的核心作用。

一節(jié) 體外培養(yǎng)的概念

一、基本概念 體外培養(yǎng)（in vitro culture），就是將活體結(jié)構(gòu)成分或活的個體從體內(nèi)或其寄生體內(nèi)取出，放在類似于體內(nèi)生存環(huán)境的體外環(huán)境中，讓其生長和發(fā)育的方法。

組織培養(yǎng)：是指從生物體內(nèi)取出活的組織（多指組織塊）在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。

細(xì)胞培養(yǎng)：是指將活細(xì)胞（尤其是分散的細(xì)胞）在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。

器官培養(yǎng)：是指從生物體內(nèi)取出的器官（一般是胚胎器官）、器官的一部分或器官原基在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。慢性淋巴細(xì)胞白血病-小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤細(xì)胞，膠樣癌細(xì)胞系，EHEB細(xì)胞

SUER0902(XR)     697細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病細(xì)胞

SUER0903(XR)     5637細(xì)胞

SUER0904(XR)     1321N1細(xì)胞星形細(xì)胞瘤細(xì)胞

SUER0905(XR)     143B細(xì)胞

SUER0906(XR)     22Rv1細(xì)胞

SUER0907(XR)     23132/87細(xì)胞 腺癌；惡性腺瘤細(xì)胞

SUER0908(XR)     253J細(xì)胞移行細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0909(XR)     253J-BV細(xì)胞移行細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0910(XR)     42-MG-BA細(xì)胞星形細(xì)胞瘤分級IV細(xì)胞

SUER0911(XR)     59M細(xì)胞移行細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0912(XR)     639-V細(xì)胞移行細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0913(XR)     647-V細(xì)胞

SUER0914(XR)     769-P細(xì)胞透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0915(XR)     786-O細(xì)胞透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0916(XR)     8305C細(xì)胞未分化癌細(xì)胞

SUER0917(XR)     8505C細(xì)胞未分化癌細(xì)胞

SUER0918(XR)     8-MG-BA細(xì)胞星形細(xì)胞瘤分級IV細(xì)胞

SUER0919(XR)     A101D細(xì)胞

SUER0920(XR)     A1207細(xì)胞

SUER0921(XR)     A172細(xì)胞星形細(xì)胞瘤分級IV細(xì)胞

SUER0922(XR)     A-204細(xì)胞

SUER0923(XR)     A2058細(xì)胞

SUER0924(XR)     A-253細(xì)胞 粘液表皮樣癌；粘表皮癌細(xì)胞

SUER0925(XR)     A2780細(xì)胞惡性腫瘤腺癌細(xì)胞

SUER0926(XR)     A3/KAW細(xì)胞彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞

SUER0927(XR)     A-375細(xì)胞

SUER0928(XR)     A4/Fuk細(xì)胞彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞

SUER0929(XR)     A-498細(xì)胞腎細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0930(XR)     A549細(xì)胞非小細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0931(XR)     A-673細(xì)胞

SUER0932(XR)     A-704細(xì)胞腎細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0933(XR)     ABC-1細(xì)胞非小細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0934(XR)     ACC-MESO-1細(xì)胞

SUER0935(XR)     ACHN細(xì)胞腎細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0936(XR)     AGS細(xì)胞腺癌；惡性腺瘤細(xì)胞

SUER0937(XR)     Alexander cells細(xì)胞肝癌細(xì)胞

SUER0938(XR)     ALL-SIL細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病細(xì)胞

SUER0939(XR)     AM-38細(xì)胞星形細(xì)胞瘤分級IV細(xì)胞

SUER0940(XR)     AML-193細(xì)胞急性髓性白血病細(xì)胞

SUER0941(XR)     AMO-1細(xì)胞漿細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞

SUER0942(XR)     AN3 CA細(xì)胞星形細(xì)胞瘤細(xì)胞

SUER0943(XR)     AsPC-1細(xì)胞導(dǎo)管癌細(xì)胞

SUER0944(XR)     AU565細(xì)胞

SUER0945(XR)     AZ-521細(xì)胞

SUER0946(XR)     BC-3C細(xì)胞移行細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0947(XR)     BCP-1細(xì)胞B細(xì)胞淋巴瘤不明細(xì)胞

SUER0948(XR)     B-CPAP細(xì)胞乳頭狀癌細(xì)胞

SUER0949(XR)     BDCM細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病細(xì)胞

SUER0950(XR)     Becker細(xì)胞星形細(xì)胞瘤分級IV細(xì)胞

SUER0951(XR)     BEN細(xì)胞

SUER0952(XR)     BFTC-905細(xì)胞移行細(xì)胞癌細(xì)胞

SUER0953(XR)     BFTC-909細(xì)胞

SUER0954(XR)     BHT-101細(xì)胞未分化癌細(xì)胞

SUER0955(XR)     BHY細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌扁平上皮癌細(xì)胞

SUER0956(XR)     BICR 16細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌扁平上皮癌細(xì)胞

SUER0957(XR)     BICR 18細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌扁平上皮癌細(xì)胞

SUER0958(XR)     BICR 22細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌扁平上皮癌細(xì)胞

SUER0959(XR)     BICR 31細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌扁平上皮癌細(xì)胞

SUER0960(XR)     BICR 56細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌扁平上皮癌細(xì)胞

SUER0961(XR)     BICR 6細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌扁平上皮癌細(xì)胞

SUER0962(XR)     BJ hTERT細(xì)胞不滅的纖維母細(xì)胞

SUER0963(XR)     BL-41細(xì)胞伯基特淋巴瘤細(xì)胞

SUER0964(XR)     BL-70細(xì)胞伯基特淋巴瘤細(xì)胞

SUER0965(XR)     BT-20細(xì)胞導(dǎo)管癌細(xì)胞

SUER0966(XR)     BT-474細(xì)胞導(dǎo)管癌細(xì)胞

SUER0967(XR)     BT-483細(xì)胞導(dǎo)管癌細(xì)胞

SUER0968(XR)     BT-549細(xì)胞導(dǎo)管癌細(xì)胞

SUER0969(XR)     BV-173細(xì)胞慢性髓樣白血病爆炸階段細(xì)胞

SUER0970(XR)     BxPC-3細(xì)胞導(dǎo)管癌細(xì)胞

SUER0971(XR)     C2BBe1細(xì)胞腺癌細(xì)胞

慢性淋巴細(xì)胞白血病-小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤細(xì)胞，膠樣癌細(xì)胞系，EHEB細(xì)胞

二、體內(nèi)、外細(xì)胞的差異和分化

1、差異：細(xì)胞離體后，失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響，生活在缺乏動態(tài)平衡相對穩(wěn)定環(huán)境中，日久天長，易發(fā)生如下變化：分化現(xiàn)象減弱；形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡；或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性，變成可生長的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此，培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體，它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能，也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。實(shí)際上從細(xì)胞一旦被置于體外培養(yǎng)后，這種差異就開始發(fā)生了。

2、分化：體外培養(yǎng)的細(xì)胞分化能力并未完全喪失，只是環(huán)境的改變，細(xì)胞分化的表現(xiàn)和在體內(nèi)不同。細(xì)胞是否表現(xiàn)分化,關(guān)鍵在于是否存在使細(xì)胞分化的條件，如Friend細(xì)胞（小鼠紅白血病細(xì)胞）在一定的因素作用下可以合成血紅蛋白，血管內(nèi)皮細(xì)胞在類似基膜物質(zhì)底物上培養(yǎng)時能長成血管狀結(jié)構(gòu)，雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特異的單克隆抗體，這些均屬于細(xì)胞分化行為。

第二節(jié) 細(xì)胞培養(yǎng)的一般過程

一、準(zhǔn)備工作 準(zhǔn)備工作對開展細(xì)胞培養(yǎng)異常重要，工作量也較大，應(yīng)給予足夠的重視，推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無法進(jìn)行。準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試。

二、取材 在無菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞（視實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ǎ?jīng)過一定的處理（如消化分散細(xì)胞、分離等）后接入培養(yǎng)器血中，這一過程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無取材這一過程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。

理論上講各種動物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng)，實(shí)際上幼體組織（尤其是胚胎組織）比成年個體的組織容易培養(yǎng)，分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng)，腫瘤組織比正常組織容易培養(yǎng)。取材后應(yīng)立即處理，盡快培養(yǎng)，因故不能馬上培養(yǎng)時，可將組織塊切成黃豆般大的小塊，置4℃的培養(yǎng)液中保存。取組織時應(yīng)嚴(yán)格保持無菌，同時也要避免接觸其他的有害物質(zhì)。取病理組織和皮膚及消化道上皮細(xì)胞時容易帶菌，為減少污染可用抗菌素處理。

三、培養(yǎng) 將取得的組織細(xì)胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng)，則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部，幾個小時后組織塊可貼牢在底部，再加入培養(yǎng)基。如系細(xì)胞培養(yǎng)，一般應(yīng)在接入培養(yǎng)器皿之前進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)，按要求以一定的量（以每毫升細(xì)胞數(shù)表示）接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基。細(xì)胞進(jìn)入培養(yǎng)器皿后，立即放入培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞盡早進(jìn)入生長狀態(tài)。未分化癌細(xì)胞，BHT-101細(xì)胞

正在培養(yǎng)中的細(xì)胞應(yīng)每隔一定時間觀察一次，觀察的內(nèi)容包括細(xì)胞是否生長良好，形態(tài)是否正常，有無污染，培養(yǎng)基的PH是否太酸或太堿（由酚紅指示劑指示），此外對培養(yǎng)溫度和CO2濃度也要定時檢查。

原代培養(yǎng)一般有一段潛伏期（數(shù)小時到數(shù)十天不等），在潛伏期細(xì)胞一般不分裂，但可貼壁和游走。過了潛伏期后細(xì)胞進(jìn)入旺盛的分裂生長期。細(xì)胞長滿瓶底后要進(jìn)行傳代培養(yǎng)，將一瓶中的細(xì)胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培養(yǎng)。每傳代一次稱為“一代”。二倍體細(xì)胞一般只能傳幾十代，而轉(zhuǎn)化細(xì)胞系或細(xì)胞株則可地傳代下去。轉(zhuǎn)化細(xì)胞可能具有惡性性質(zhì)，也可能僅有不死性（Immortality）而無惡性。

四、凍存及復(fù)蘇（可參閱后面有關(guān)章節(jié)）為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度－196℃，將細(xì)胞收集至凍存管中加入含保護(hù)劑（一般為二甲亞砜或甘油）的培養(yǎng)基，以一定的冷卻速度凍存，終保存于液氮中。在低的溫度下，細(xì)胞保存的時間幾乎是的。復(fù)蘇一般采用快融方法，即從液氮中取出凍存管后，立即放入37℃水中，使之在一分鐘內(nèi)迅速融解。然后將細(xì)胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進(jìn)行培養(yǎng)。

凍存過程中保護(hù)劑的選用、細(xì)胞密度、降溫速度及復(fù)蘇時溫度、融化速度等都對細(xì)胞活力有影響。

五、常用儀器設(shè)備 無菌室,超凈工作臺,三重純水蒸餾器,抽氣泵,壓力蒸氣消毒器,電熱恒溫培養(yǎng)箱,培養(yǎng)器具，CO2培養(yǎng)箱,恒溫水浴鍋,倒置顯微鏡,離心機(jī),無菌過濾器,洗刷裝置,細(xì)胞計數(shù)板和電子細(xì)胞技術(shù)儀等等。

購買素爾生物慢性淋巴細(xì)胞白血病-小淋巴細(xì)胞性淋巴瘤細(xì)胞，膠樣癌細(xì)胞系，EHEB細(xì)胞注意事項(xiàng)如下：

1 收到細(xì)胞后先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2 對于貼壁細(xì)胞，若細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封，用75%酒精擦拭后平躺置于培養(yǎng)箱內(nèi)。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉；如細(xì)胞還不貼壁，將細(xì)胞離心收集移到新的培養(yǎng)瓶中，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

3 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和本公司技術(shù)部溝通交流。

我們?nèi)娜鉃槟?wù)，提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，保障售后服務(wù)，真心把客戶奉為上帝，及時處理客戶訂單，全程跟蹤貨源，采用誠信快遞運(yùn)輸，認(rèn)真解答客戶疑問，對客戶售后問題，不拖沓，不推卸責(zé)任，認(rèn)真負(fù)責(zé)的態(tài)度。

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