BI胎牛血清使用中遇到的常見(jiàn)問(wèn)題
發(fā)布時(shí)間：2019-08-13瀏覽次數(shù)：922返回列表
BI胎牛血清
在細(xì)胞培養(yǎng)中,血清供應(yīng)了豐富的高分子蛋白,低分子量營(yíng)養(yǎng)物,疏水載體蛋白和其他體外細(xì)胞生長(zhǎng)必要的成分如激素和粘附因子.同時(shí),血清可以增加培養(yǎng)基的緩沖能力或中和有毒成分,起到保護(hù)細(xì)胞的作用.在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中是否選擇添加血清,主要根據(jù)基礎(chǔ)培養(yǎng)基化學(xué)成分,培養(yǎng)細(xì)胞的類型和培養(yǎng)體系而定.
BI胎牛血清組份的復(fù)雜性及作用機(jī)理的關(guān)聯(lián)性,使得人工無(wú)血清培養(yǎng)基添加物想要模擬胎牛血清組份的作用就難上加難了.但隨著細(xì)胞生物學(xué)及發(fā)酵制藥工業(yè)的發(fā)展,成本及潔凈程度的要求下,勢(shì)必會(huì)有新的人工替代試劑出現(xiàn),而這需要我們科研人員的共同努力.
BI胎牛血清：
1. 指標(biāo)好,內(nèi)毒素低,利于細(xì)胞的生長(zhǎng),不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞過(guò)早的凋亡,有利于下游產(chǎn)物的純化,其他重要指標(biāo)都處于優(yōu)水平,檢測(cè)方法完全符合標(biāo)準(zhǔn)或美國(guó)藥典.
2. 品質(zhì)有保證,BI公司的血清生產(chǎn)完全符合cGMP的生產(chǎn)要求,并通過(guò)了ISO13485: 2003和ISO9001: 2008質(zhì)量認(rèn)證,符合USDA標(biāo)準(zhǔn),并有歐洲藥品監(jiān)督管理局頒發(fā)的EDQM證書,可以用于制藥行業(yè).
3. 血清種類齊全,可以滿足所有血清用戶的需求.
4. 多種血清都提供了熱滅活的包裝,減少了實(shí)驗(yàn)室自行熱滅活的工作,并降低了熱滅活對(duì)血清的負(fù)面影響.
5. 胚胎干細(xì)胞專用血清及TET系統(tǒng)專用血清都經(jīng)過(guò)相關(guān)實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格篩選及驗(yàn)證,出售的FBS原料來(lái)源于根據(jù)動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）認(rèn)可的未發(fā)生瘋牛病BSE）疫情的,確保其質(zhì)量安全.
BI胎牛血清產(chǎn)品說(shuō)明：
1.專為外泌體研究而設(shè)計(jì)；
2.由無(wú)菌采集健康胎牛血清過(guò)濾而成；
3.去除97%以上的胎牛血清內(nèi)源外泌體；
4.與處理前FBS相同細(xì)胞生長(zhǎng)速率與形態(tài).
BI胎牛血清使用中遇到的常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié)：
一 BI胎牛血清滅活問(wèn)題.
1 問(wèn)：加到培養(yǎng)基中的BI牛血清必須滅活嗎？
答：不是必須的,看做什么實(shí)驗(yàn)了.
2 問(wèn)：BI胎牛血清(Bioind胎牛血清)滅活是56℃ 30分鐘嗎？
答：如果用于培養(yǎng)大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞,血清一般是不需要滅活的,這樣可以有效保存血清中的生長(zhǎng)因子. 但是如果用于培養(yǎng)一些表面具有補(bǔ)體受體的細(xì)胞,如內(nèi)皮細(xì)胞,血清是需要滅活,一般是56℃,30min.
3 問(wèn)：我要做滋養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng),胎牛血清要滅活嗎？
答：進(jìn)口的一般都已滅活,國(guó)產(chǎn)的不一定,zui好還是滅活一下再用較安全.
4 問(wèn)：我用病毒上清轉(zhuǎn)染細(xì)胞,培養(yǎng)用的血清需要滅活嗎？因?yàn)檠逯锌赡苡行┭a(bǔ)體和抗體,是不是會(huì)影 響轉(zhuǎn)染？我想未滅活的血清中含些抗體補(bǔ)體可能會(huì)和病毒相結(jié)合,影響轉(zhuǎn)染,正確嗎？細(xì)胞是單核細(xì)胞白血病細(xì)胞, 病毒是病毒包裝細(xì)胞PT67收集的病毒上清.為什么要用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí),目的是什么？
答：血清一定要滅活,可以先用無(wú)血清培養(yǎng)基加病毒孵育幾小時(shí)以后再加血清.避免雜蛋白對(duì)病毒和宿主 結(jié)合過(guò)程的干擾,一般是2-6小時(shí),根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)決定.血清不一定需要滅活,滅活的目的是將血清中的補(bǔ)體滅活 ！這要根據(jù)實(shí)際情況而定,如果沒(méi)有把握那就滅活吧,也不麻煩56度半個(gè)小時(shí).
5 問(wèn)：(1)我買的是BI胎牛血清,要滅活嗎？有些說(shuō)法是需要,有些說(shuō)直接解凍后就可以加入到培 養(yǎng)基中；我配制胰蛋白酶液,用的是D-PBS,有關(guān)系嗎？
答：關(guān)于血清的熱滅活,是很多人感興趣也存在一定爭(zhēng)議的話題.大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室將血清的熱滅活還是作為 常規(guī)來(lái)執(zhí)行,因?yàn)橛袃蓚€(gè)作用,一是滅活補(bǔ)體,第二是滅活血清中可能存在的支原體.但是實(shí)驗(yàn)者并沒(méi)有考慮熱處 理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子 氨基酸等成分帶來(lái)的負(fù)面影響
