細胞凍存液配方
發(fā)布時間:2019-05-21瀏覽次數(shù):1082返回列表
細胞凍存前應該做哪些準備呢?
1.準備適量凍存管,做好標記后置于4℃冰箱預冷;
2.配制凍存液:
一般為80%完全培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO, 需要現(xiàn)配現(xiàn)用
3.程序降溫
a.按照細胞傳代步驟1-7操作制備細胞懸液并離心;
b.棄去上清,加入適當體積的凍存液,用滴管輕輕吹打細胞制成細胞懸液;
c.將1 ml細胞懸液加入加入之前已做好標記的凍存管中并做好記錄;
d.將凍存管放入梯度凍存盒然后保存至-80℃過夜(可以先在4℃冰箱放置30 min,然后轉移至-20℃放置1-2 h,zui后轉移至-80℃過夜),第二天取出放入液氮罐,并記錄好位置信息。
是不是很繁瑣?我們來看一下HAKATA無血清細胞凍存液:
直接從4°C冰箱中取出使用,凍存管放于-80°C過夜,再轉移至液氮中。
就是這么簡單直接,那么它的效果怎么樣呢?
我們來看一組對比
普通凍存液與HAKATA無血清細胞凍存液細胞復蘇情況
可見,使用HAKATA無血清細胞凍存液的細胞復蘇(存活率和活力)更好
|
普通凍存液 |
HAKATA無血清細胞凍存液 |
配置 |
需要現(xiàn)配,配方麻煩 |
取出即用 |
凍存方式 |
程序降溫,繁瑣耗時 |
無需程序降溫,直凍-80°C |
適用性 |
一般培養(yǎng)細胞 |
適合無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞 |
安全性 |
無法把控 |
配方明確,不含動物來源性蛋白 |
存活率 |
凍存后復蘇率低 |
細胞(存活率和活力)高達90%-98%,批次差異小 |
HAKATA無血清細胞凍存液,通用于各種動物細胞株(腫瘤細胞和常規(guī)細胞),凍存細胞可在-80°C長期保存(>5年)。Cell Freezing Medium配方明確,不含動物來源性蛋白,不含血清,可減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,提高細胞存活率和活力,亦適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。