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所在地:上海
型號(hào):50次
更新時(shí)間:2021-08-16
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公司地址:上海市漕寶路66號(hào)20F
劉小姐(女士)
實(shí)時(shí)熒光定量PCR:
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限,實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,通過(guò)對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得定量結(jié)果。因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR無(wú)需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的:
1)第三代免提核酸提取病毒采運(yùn)試劑盒Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí),剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對(duì)數(shù)期),此時(shí)微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性極好,即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線(xiàn)性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對(duì)數(shù)存在線(xiàn)性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知樣品進(jìn)行定量測(cè)定,因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴(lài)的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性最定量方法,已得到全世界的公認(rèn),廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測(cè)等諸多領(lǐng)域。
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)EB病毒C/D基因基因分型試劑盒,其特征在于,由定量PCR反應(yīng)液(1)、C型標(biāo)準(zhǔn)品(2)、D型標(biāo)準(zhǔn)品(3)、陽(yáng)性對(duì)照品(4)、陰性對(duì)照品(5)、病毒DNA抽提裂解液(6)、操作說(shuō)明書(shū)(7)、盒體(8)、盒蓋(9)組成,其中定量PCR反應(yīng)液(1)含有PCR緩沖液、Mgcl2、dNTPs、EB病毒C/D基因基因通用上游引物、EB病毒C/D基因基因通用下游引物、C型熒光探針、D型熒光探針、Taq DNA聚合酶,上游引物序列為:5’ATACTCCCGCCATGCGACT3’,下游引物序列為:5’CTGTCACAACCTCACTGTCAT3’C型熒光探針為:5’FAMCCTGCGGACCCCGATMGB 3’,D型熒光探針為:5’VICCCTGCGGATCCCGATMGB 3’。
下面是公司正在打折促銷(xiāo)產(chǎn)品:
CCL12-8℃ for 6 mo
人肺癌細(xì)胞,A549細(xì)胞Sandwich ELISA, Double AntibodyCCL12-8℃ for 6 mo
人肺癌細(xì)胞,A549細(xì)胞 4-氨基-L-苯丙氨酸
骨成型蛋白質(zhì)受體II(BMP RII)2-8℃ for 6 mo
人肺癌細(xì)胞,NCI-H2126細(xì)胞Sandwich ELISA, Double Antibody骨成型蛋白質(zhì)受體II(BMP RII)2-8℃ for 6 mo
E-鈣粘附分子(E-Cadherin)2-8℃ for 6 months用于Illumina平臺(tái)的Small RNA-Seq Library Prep Kit試劑盒
人肺癌細(xì)胞,Calu-1細(xì)胞Sandwich ELISA, Double AntibodyE-鈣粘附分子(E-Cadherin)2-8℃ for 6 months用于Illumina平臺(tái)的Small RNA-Seq Library Prep Kit試劑盒
人肺癌細(xì)胞,Calu-1細(xì)胞 2-硝基-4-異丙基甲苯
人肺癌細(xì)胞,NCI-H2126細(xì)胞 茴香酸乙酯
第三代免提核酸提取病毒采運(yùn)試劑盒0.188ng/ml大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試盒Prepro-TRH (178-199)
9.375pg/ml大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試盒TRH, Thyroliberin
2.344pg/ml大鼠腎素(Renin)ELISA試盒 TRH (free acid)
2.344pg/ml大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA試盒 (Glu2)-TRH
0.094ng/ml大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試盒(Phe2)-TRH
0.188ng/ml大鼠激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試盒Secretin (rat)
46.9pg/ml大鼠吡啶酚(PYD)ELISA試盒Suc-AAPD -pNA
9.375pg/ml大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試盒Suc-AAPD-pNA
37.5pg/ml大鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試盒 Suc-AAPE-pNA
9.375pg/ml大鼠蛋白酶(PP)ELISA試盒 Suc-AAPI-pNA
內(nèi)標(biāo)對(duì)熒光定量PCR的影響:
1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR無(wú)需內(nèi)標(biāo)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限,實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度,并記錄在電腦軟件之中,通過(guò)對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得定量結(jié)果。因此,無(wú)需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個(gè)基礎(chǔ)之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時(shí),剛剛進(jìn)入真正的指數(shù)擴(kuò)增期(對(duì)數(shù)期),此時(shí)微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性極好,即同一模板不同時(shí)間擴(kuò)增或同一時(shí)間不同管內(nèi)擴(kuò)增,得到的Ct值是恒定的。
2)第三代免提核酸提取病毒采運(yùn)試劑盒Ct值與起始模板的線(xiàn)性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對(duì)數(shù)存在線(xiàn)性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知樣品進(jìn)行定量測(cè)定,因此,實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量的方法。
2.內(nèi)標(biāo)對(duì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR的影響若在待測(cè)樣品中加入已知起始拷貝數(shù)的內(nèi)標(biāo),則PCR反應(yīng)變?yōu)殡p重PCR,雙重PCR反應(yīng)中存在兩種模板之間的干擾和競(jìng)爭(zhēng),尤其當(dāng)兩種模板的起始拷貝數(shù)相差比較大時(shí),這種競(jìng)爭(zhēng)會(huì)表現(xiàn)得更為顯著。但由于待測(cè)樣品的起始拷貝數(shù)是未知的,所以無(wú)法加入合適數(shù)量的已知模板作為內(nèi)標(biāo)。也正是這個(gè)原因,傳統(tǒng)定量方法雖然加入內(nèi)標(biāo),但仍然只是一種半定量的方法。