EL4 細(xì)胞,小鼠淋巴瘤細(xì)胞 現(xiàn)貨復(fù)蘇凍存
復(fù)蘇細(xì)胞下單后的1-2周內(nèi)到貨，凍存細(xì)胞4-7天內(nèi)到貨。
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細(xì)胞在運輸、轉(zhuǎn)移過程中，請勿打開自封袋；拿放細(xì)胞時請持瓶體，切勿在非無菌環(huán)境中碰觸、擰動瓶口封口膜位置
進(jìn)入生物安全柜前，打開自封袋拿出培養(yǎng)瓶，噴上酒精放進(jìn)操作臺(不建議使用酒精棉球擦拭)，撕開封口膜后，用酒精燈外焰對瓶口燒灼一圈(3秒左右)
細(xì)胞凍存如下：
1．細(xì)胞：選對數(shù)生長期細(xì)胞，收集細(xì)胞24小時前換液一次。
2．計數(shù)：按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液，計數(shù)，令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml，離心去上清，吸入離心管中。
3．凍存液：先用培養(yǎng)液9分＋DMSO 1分(或甘油)配成10％的DMSO凍存液，按上法一滴滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。
4．分裝：分裝入無菌安剖中，每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。
5．封口：用塑料安剖時擰緊瓶口即可；如用火焰封閉安剖口后，仔細(xì)檢查，定要封嚴(yán)，必要時可浸入藍(lán)色液中觀察，為安全起見，把安剖縫入紗布小袋中，以防液氮浸入后，融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人；紗袋一端系以線繩，末端扎有小牌，注明：細(xì)胞名稱，凍存日期，以便日后查找。
豎立培養(yǎng)瓶，擰開瓶蓋(如是貼壁細(xì)胞，請用真空泵或吸管移除原配培養(yǎng)基，切勿讓瓶口處的液體回流進(jìn)瓶內(nèi))
更換為含10%-20%血清的完全培養(yǎng)基，嚴(yán)格按照無菌操作要求繼續(xù)培養(yǎng)
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