凝固血液DNA提取試劑盒說明書

產(chǎn)品編號(hào)：BTN71002

規(guī)格：30T/100T

產(chǎn)品及特點(diǎn)：

凝固血液DNA提取試劑盒是百奧萊博開發(fā)的專門提取新鮮或冷凍凝固血液基因組DNA 的試劑盒。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

1.DNA 純凈，OD260/280 在1.8-2.0之間，可直接用于PCR、酶切、雜交等。提取得到的DNA 大小在30-50Kb之間。

2.每mL 新鮮凝固全血DNA 產(chǎn)量為20-50μg左右，每mL凍存的凝固全血DNA產(chǎn)量為2-10μg左右。

3.安全，本試劑盒對(duì)人體，無腐蝕性和刺激性氣味。

4.操作快速，整個(gè)過程在30分鐘內(nèi)即可完成。

規(guī)格及成分：

保存條件：

常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。

自備試劑：

氯fang、異丙醇、75%乙醇。

使用方法：

1. 65℃預(yù)熱溶液A，待其沉淀溶化后，充分混勻，取0.5 mL 加入到10-15mL塑料離心管中并放置于65℃待用。

2. 稱取新鮮凝固血液組織0.5 g 左右(如果是干的血塊，只需要50 mg 左右并需要剪成微小的碎片)，加入到上步的溶液A 中勻漿，直到。勻漿過程中將產(chǎn)生大量泡沫，屬于正?，F(xiàn)象。

3. 將勻漿液置于65℃水浴保溫5 分鐘，然后將勻漿液(包括凝固血液碎片)全部轉(zhuǎn)移到新的1.5 mL 塑料離心管中。

4. 12000-15000 g 室溫離心3 分鐘，將上清轉(zhuǎn)移到新的1.5 mL塑料離心管中(上清液的體積一般為300 μL 左右)。

5. 在上清液中加入等體積的溶液B，上下顛倒30秒充分混勻后冰浴5 分鐘。

6. 12000-15000 g 室溫離心3 分鐘，轉(zhuǎn)移上清到新的1.5 mL 塑料離心管中。

7. 加入0.2 mL 的氯fang(自備)，震蕩器上充分振蕩30秒混勻。

8. 12000-15000 g 室溫離心3 分鐘，兩相交界面將有白色膜狀物。小心轉(zhuǎn)移上清到新的1.5 mL 塑料離心管中。

9. 重復(fù)7-8 步一次。

10. 加入1 倍體積的異丙醇(自備)，上下顛倒30秒混勻，12000-15000 g 離心5分鐘，棄上清，管底將有微小DNA 沉淀。

11. 沉淀用75%乙醇清洗2 次后，室溫晾干。

12. 加入50-100 μL 自備TE 溶解DNA 沉淀。DNA 即可用于電泳，酶切和PCR等反應(yīng)。