非酶DNA清除劑-2說明書

產(chǎn)品編號：BTN70801

規(guī)格：15T

產(chǎn)品及特點：

用Trizol等方法提取的總RNA樣品中經(jīng)常會含有基因組DNA污染，這些污染會影響下游的RT-PCR和Northern雜交等實驗。目前zui常用的RNase-free DNase處理方法因DNase中所含殘留的RNase能破壞RNA完整性而具有很大缺陷。我司基因開發(fā)的非酶DNA清除劑-2不但徹底避免了RNase-free DNase的這一缺陷，同時還具有操作快速，穩(wěn)定性好和高等諸多優(yōu)點，完全可以替代價格昂貴的RNase-free DNase。

1. ，能使總RNA中的基因組DNA污染降上百倍(根據(jù)PCR檢測)而RNA分子完整性不會受到任何影響。

2. 本身不含RNase污染，因為本產(chǎn)品為非酶產(chǎn)品；而在制備RNase-free DNase時，為避免DNase失活，處理條件往往比較溫和，所以終產(chǎn)品中往往殘留有RNase污染。

3. 快速，只需要十多分鐘。

4. 穩(wěn)定，本產(chǎn)品為非酶產(chǎn)品，可以常溫運輸和4℃長期保存；而RNase-free DNase的運輸和長期保存必須在低溫進(jìn)行。

5. 高，單位成本遠(yuǎn)低于RNase-free DNase。

6. 能用于小RNA 中DNA污染的去除。

規(guī)格及成分：

保存條件：

常溫運輸、4℃保存,有效期一年。

自備試劑：

氯fang、75%乙醇

使用方法：

1. 將總RNA 溶液與溶液A 按1：1的比例混合（即100 μL RNA 溶液需加100μL DNA Erasol-2），充分震蕩半分鐘。注意：RNA溶液中鹽（如鈉離子）的濃度不能高于0.2 M，如果RNA 溶液的量不足100μL，zui好加無RNase水補足到100μL以便后續(xù)操作，如果體積大于100μL，試劑的用量也需要按比例增加。

2. 加入相當(dāng)于RNA 溶液和DNA Erasol-2 混合液總體積1/2 的自備氯fang，充分震蕩半分鐘。

3. 12000-15000 g 室溫或4℃離心1-3 分鐘。

4. 轉(zhuǎn)移上清到一個RNase-free 的塑料離心管中，加2 倍體積的溶液B（用前搖勻），充分震蕩半分鐘。

5. 12000-15000 g 室溫或4℃離心10 分鐘后，小心棄上清。如果處理的樣品中含有小RNA，zui好使用30 分鐘的離心時間。

6. 加1 mL 自備75%乙醇，充分震蕩半分鐘。

7. 12000-15000 g 室溫或4℃離心5 分鐘后小心棄上清。

8. 短暫快速離心，小心吸棄余液。

9. 加入自備RNase-free 水溶解RNA 沉淀后立即使用或放-80℃長期保存。

疑難解答：

Q：能否用本產(chǎn)品對同一樣品進(jìn)行反復(fù)處理？

A：可以。

Q：為何處理后的RNA 還有DNA 條帶？

A：有些時候（尤其是使用非變性電泳檢測時）RNA 會形成聚合物，電泳很慢，人們會誤以為是DNA，可以加少量無DNase 的RNase 處理樣品，確認(rèn)就是DNA。

如果是，可能是樣品中鹽濃度過高使DNA 去除效率降低，可以預(yù)先用乙醇沉淀法去掉鹽離子。

Q：本產(chǎn)品跟DNA Erasol(BTN60201) 有何區(qū)別？

A：前者可以用于小RNA（長度小于200nt）的RNA 樣品而后者不能。