耐熱型SYBR染料,電泳級(jí)說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品編號(hào)：BTN61201
規(guī)格：50μL
產(chǎn)品及特點(diǎn)：
本產(chǎn)品是改良型的SYBR Green I，它跟常規(guī)的SYBR Green I 相比檢測(cè)靈敏度相當(dāng)，但具有耐熱、耐水解的特點(diǎn)，所以十分穩(wěn)定，使用更加方便。
1. 穩(wěn)定，本產(chǎn)品濃縮液可以在常溫下存放一年以上，方便運(yùn)輸和保存。本產(chǎn)品的1X 工作液在常溫下的半衰期為120 多天，比常規(guī)的SYBR Green I（5天）長(zhǎng)20 倍以上。
2. 使用方便多樣，既可以在制備凝膠時(shí)加入到融化的瓊脂糖凝膠中，還可以象常規(guī)的SYBR Green I、SYBR Gold、SYBR safe、GelStar 一樣用于電泳后染色。
3. 靈敏，其檢測(cè)靈敏度跟SYBR Green I 相同，比EB 靈敏200-100 倍。
4. 低毒、環(huán)保、健康。
5. 可檢測(cè)各種核酸分子，包括dsDNA、ssDNA、RNA 和Oligo。
6. 兼容性好，不但與常用的TAE、TBE 和5分鐘超快電泳緩沖液SuperBuffer-2等兼容，還與常用的UV 檢測(cè)系統(tǒng)和可見(jiàn)光激發(fā)檢測(cè)系統(tǒng)兼容。
7. 對(duì) DNA 泳動(dòng)速度的影響小于常規(guī)的SYBR Green I。
8. 半衰期長(zhǎng)，自然損耗低，可多次使用，使其相對(duì)使用成本比常規(guī)的SYBR Green I和其它非對(duì)稱花青類染料低。
規(guī)格及成分：
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成分 |
規(guī)格 |
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Super SYBR, 10000× |
50μl |
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說(shuō)明書(shū) |
1份 |
保存條件：
常溫運(yùn)輸保存（避光），保存期為一年。
自備試劑：
電泳試劑。
使用方法：
本產(chǎn)品可以在電泳中染色，優(yōu)點(diǎn)是用量少，但如果與DNA 的比例沒(méi)達(dá)到zui佳時(shí)，帶型容易彌散；也可以在電泳后染色，優(yōu)點(diǎn)是不會(huì)對(duì)DNA 電泳產(chǎn)生干擾，但用量大，還需要額外的染色過(guò)程。客戶可以根據(jù)需要選擇使用方法。百奧萊博不建議將本產(chǎn)品用于染色后再上樣（即先將其與DNA 混合然后再上樣），也不建議將其用于PAGE(因分子較大,難以進(jìn)入凝膠)。
使用方法之一：電泳中染色(僅適于瓊脂糖凝膠電泳)
1. 按常規(guī)方法制備瓊脂糖凝膠，膠中不能含任何其他染料。
2. 將按1：10000 的比例將SuperSYBR 直接加到熔化的瓊脂糖凝膠中并充分搖晃均勻（5 μL 可以加入到50 mL 熔化的瓊脂糖凝膠中），然后倒膠。
3. 其余的上樣、電泳、UV 觀察等步驟按常規(guī)操作進(jìn)行。在254 nm 紫外照射透視下，與雙鏈DNA 接合的SuperSYBR 呈現(xiàn)綠色熒光。拍照時(shí)zui好使用綠色濾光片。如果使用300 nm 紫外照射透視儀觀察也可以，但效果不如254 nm。
4. 未用完的膠可以反復(fù)融化，如果保存時(shí)間在一周以上，zui好閉光。
注意：本方法的靈敏度比在熔化的瓊脂糖凝膠中加EB 染色的方法高，比電泳后染色經(jīng)濟(jì)（后者用量大）。SuperSYBR 與DNA 結(jié)合同SYBR Green I 跟DNA 的結(jié)合一樣，有時(shí)會(huì)影響DNA 樣品的相對(duì)遷移率。如果出現(xiàn)DNA 電泳帶彌散的現(xiàn)象，說(shuō)明SuperSYBR 和DNA 的比例沒(méi)達(dá)到zui佳，可以適當(dāng)調(diào)節(jié)DNA 的上樣量。
使用方法之二：電泳后染色
1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2. 用水將10000×SuperSYBR 原液稀釋2500 倍成4×工作液（如：將5 μL SuperSYBR 原液加到10 mL 水和2.5 mL 5 M NaCl 中，加NaCl 的目的是促進(jìn)SuperSYBR 與DNA 的結(jié)合）。由于SuperSYBR 對(duì)玻璃和非聚丙烯材料具有一定親和力，故建議在稀釋、貯存、染色等使用過(guò)程中用聚丙烯類容器。
3. 將電泳后染色工作液倒入合適的聚丙烯容器中，放入凝膠，用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30 分鐘，染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。
4. 在 254 nm紫外照射透視下，與雙鏈DNA 接合的SuperSYBR 呈現(xiàn)綠色熒光。拍照時(shí)zui好使用綠色濾光片。如果使用300 nm 紫外照射透視儀觀察也可以，但效果不如254 nm。
注意：電泳后染色工作液可以冷凍避光儲(chǔ)存，可以在一個(gè)星期內(nèi)重復(fù)使用多次。
