至尊版會(huì)員 第13年
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基因擴(kuò)增儀與PCR儀兩者一模一樣?
發(fā)布時(shí)間：2015-04-20瀏覽次數(shù)：2135返回列表
PCR應(yīng)該是聚合酶鏈?zhǔn)椒矗F(xiàn)在有一種儀器叫做基因擴(kuò)增儀，另外一種儀器叫做PCR儀，這兩種儀器是一模一樣的嗎?
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，可以選擇性擴(kuò)增一段DNA序列。其基本步驟是，先將待擴(kuò)增的模板DNA變性使之成為單鏈，DNA樣品中，特異性的引物能夠與其互補(bǔ)的序列雜交，在dNTPs和Taq酶存在時(shí)，就可以合成模板 DNA的互補(bǔ)鏈，反應(yīng)完成后，將反應(yīng)混合物加熱使DNA雙鏈變性，溫度下降后，過(guò)量的引物又可以開(kāi)始第二輪的合成反應(yīng)。這種延伸—變性—退火—延伸的循環(huán)可以重復(fù)多次，使所需要的DNA片段得到特異性的擴(kuò)增。
1.變性：加熱使模板DNA在高溫下(94℃)變性，雙鏈間的氫鍵斷裂而形成兩條單鏈。
2.退火：使溶液溫度降至50～60℃，模板DNA與引物按堿基配對(duì)原則互補(bǔ)結(jié)合。
3.延伸：溶液反應(yīng)溫度升至72℃，耐熱DNA 聚合酶以單鏈DNA為模板，在引物的引導(dǎo)下，利用反應(yīng)混合。
