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豬瘟的流行凈化以及檢測(cè)試劑盒解讀
發(fā)布時(shí)間:2019-09-17瀏覽次數(shù):1894返回列表
目前豬瘟流行多為豬瘟的變異株——2.1型,C株為1型,針對(duì)C株免疫產(chǎn)生的抗體對(duì)于變異株的防控效果,有待具體數(shù)據(jù)的支持;但市場上免疫C株疫苗針對(duì)豬瘟的防控還是有一定效果的。2、豬瘟疫苗的選擇,并不是兔體感染量/病原含量的高低就能決定的,要結(jié)合豬場的免疫程序,以及免疫效果進(jìn)行選擇,尤其是進(jìn)行免豬瘟疫苗時(shí),母源抗體的干擾有可能導(dǎo)致免疫失敗,建議疫苗免疫要適量。3、針對(duì)豬瘟疫苗免疫的評(píng)價(jià),愛德士公司包被的抗原為豬瘟的E2蛋白,LSI公司包被的為豬瘟全病毒,不同試劑盒檢測(cè)的結(jié)果出入較大,對(duì)于結(jié)果的分析是一大問題,因此需要結(jié)合豬場的實(shí)際情況,有必要時(shí)可結(jié)合相應(yīng)的病原檢測(cè)分析。
一、豬瘟流行情況
通過我們的檢測(cè)數(shù)據(jù)顯示,目前豬瘟處于不穩(wěn)定狀態(tài);豬瘟C株屬于1型,目前我國流行毒株大多為2.1型的。種豬的帶毒率一直是比較高的,大約為8.7%左右,目前豬瘟又呈現(xiàn)不穩(wěn)定的狀態(tài)。主要表現(xiàn)為1.毒株變異2.藍(lán)耳發(fā)病率升高導(dǎo)致免疫抑制,繼而混發(fā)豬瘟。3.種豬帶毒,胎盤傳播形成豬瘟耐受。
二、豬瘟免疫情況
一些豬場遇到這樣的問題,反復(fù)免疫豬瘟疫苗,沒有抗體?
如果母豬帶毒,病毒經(jīng)過胎盤后感染了胚胎,此時(shí)仔豬的免疫系統(tǒng)會(huì)將病原認(rèn)為是自身的物質(zhì),不會(huì)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,出生后再次免疫疫苗時(shí)會(huì)有免疫不應(yīng)答情況,這種豬瘟病毒一般是溫和型的。
如果母豬在妊娠后期免疫,并且免疫量過大,存在免疫抑制傳播至胎盤,也可能導(dǎo)致仔豬免疫耐受。
三、豬瘟抗體檢測(cè)
分享豬瘟野毒抗體檢測(cè)的一個(gè)實(shí)際案例
我們有時(shí)在追求豬瘟疫苗免疫后抗體阻斷值與離散度,一般認(rèn)為阻斷值高于80,離散度低于20%為佳。但是我個(gè)人認(rèn)為,這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)只適合種豬的反復(fù)加強(qiáng)免疫后的結(jié)果,由于仔豬吃初乳的時(shí)間不同,吃的乳頭不同,其母源抗體滴度我是不同的,一般越早吃的初乳含的IgG含量越高,前排的乳池中的乳汁質(zhì)量越高,因此同一窩中仔豬的母源抗體差別是比較大的。母源抗體會(huì)干擾免疫后抗體滴度,因此一免后關(guān)注抗體陽性率即可,滴度不會(huì)太高,此外其實(shí)從免疫機(jī)理上豬瘟主要是細(xì)胞免疫,有時(shí)沒有抗體也能保護(hù)。
分享實(shí)驗(yàn)案例
我們?cè)?jīng)做過一個(gè)實(shí)驗(yàn),用750兔體感染量的疫苗免疫5頭仔豬,設(shè)5頭空白對(duì)照,免疫后一個(gè)月采集血清檢測(cè)抗體,免疫組只有兩頭陽轉(zhuǎn);但是攻毒后,5頭免疫組全部保護(hù),5頭對(duì)照全死亡;這時(shí)檢測(cè)抗體,抗體阻斷值全部超過90%,離散度10%左右。
如何證明存在第3點(diǎn)的問題?一些豬場的問題,豬場在免疫后不是沒抗體,而是抗體太高了,24周齡還有95%抗體陽性率,懷疑野毒感染肉豬。
免疫了合適劑量的疫苗后,雖然檢測(cè)離散度不是很好,但也會(huì)對(duì)豬起到一定的保護(hù)作用,在實(shí)際的生產(chǎn)當(dāng)中不要過度的依賴離散度的高低,需要根據(jù)自己廠里實(shí)際的情況而定。
離散度與做疫苗的方法有很大關(guān)系,沒有幾個(gè)場能完全按照流程來做。現(xiàn)在很多豬場老板懂得并沒有他們想象的那么多,實(shí)驗(yàn)室做的很多效果很好的苗讓他們注射時(shí)容易出現(xiàn)疏忽,后還把責(zé)任歸到疫苗本身!我覺得應(yīng)該把如何做苗這個(gè)基本的要求和流程落實(shí)到各個(gè)場,這樣大家的工作才有意義!
四、不同試劑盒檢測(cè)豬瘟抗體情況
國外的試劑盒大多都是阻斷的,如金諾韓國和西班牙英吉娜的,以及美國愛德士和法國LSI的檢測(cè)試劑盒都是阻斷ELISA。阻斷ELISA大的就是準(zhǔn)確,不容易被干擾,背景值低,這些盒子大多是包被的豬瘟E2蛋白,是針對(duì)單克隆表位的。一般由于個(gè)體差異,宿主針對(duì)某一單一表位的抗體滴度會(huì)有很大差異,因此,在某些特殊情況下其數(shù)值是有差異的。
的試劑盒大多是間接ELISA,包被的是一段抗原,多個(gè)表位。因此有時(shí)需對(duì)照的看,如果毒株變異,正好在阻斷ELISA的單一表位處變異,可能得出的結(jié)果是陰性的。
疫病防控中心遇秀玲有一個(gè)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù):愛德士陰性,LSI都是陽性。
在此提問:不同廠家豬瘟疫苗的效果?每頭份兔體感染量,差異很大,是否越高越好?
回答:這個(gè)很敏感,因場而異,應(yīng)該適中;太低、太高了,均受母源抗體干擾比較大。因?yàn)樨i瘟母源抗體具有中和活性,如果仔豬恰處于母源抗體高峰期會(huì)被中和,不但沒起到正面效果,還會(huì)消耗母源抗體。
愛德士包被的是E2蛋白,LSI包被的是全病毒,所以通常愛德士的結(jié)果看起來沒那么好,就是一個(gè)特異性和敏感性怎么取舍的問題。
E2蛋白是豬瘟病毒誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體的主要保護(hù)性蛋白,愛德士檢測(cè)的抗體與中和抗體無相關(guān)性。
兔體感染量是一個(gè)不太準(zhǔn)確的標(biāo)定抗原的方法。有一個(gè)客戶,將一頭份的豬瘟疫苗注入兔子體內(nèi),沒有引起發(fā)熱,認(rèn)為豬瘟疫苗不合格。但用wo熒光定量PCR檢測(cè),抗原合格。咨詢生產(chǎn)一線人員,必須對(duì)兔子有要求:兔子品種有要求,5至6斤兔子,不能打兔瘟疫苗。
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