今天我們就來談一談非洲豬瘟檢測問題，因為按照規(guī)定，沒有經(jīng)過允許，是不能做非洲豬瘟檢測的，但現(xiàn)在豬場可以檢測，我們根據(jù)豬場檢測的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，國產(chǎn)的試劑盒的特異性、敏感性相差很大，比如說核酸提取有兩種方法：AB法， 還有一種PCR檢測的免提法，沒有純化的過程，就是核酸提取，檢出效果很低，所以在核酸提取上我們建議用AB法，就是裂解加純化的方法。這是我們在對比研究過程中發(fā)現(xiàn)的一個問題，所以建議就不要用免提法，免提法中還有很多方法，有些差，有些稍微好些，但總體上是不能達到滿意的程度。
    還有一種方法就是測試卡法，就是一個測試板，上面有兩根線，一個P線，一個C線，然后將血滴到上面，然后通過滲透的方式到兩條線上，如果兩條線都出現(xiàn)，就是陽性，如果只有C線出現(xiàn)就是陰性，如果都不出現(xiàn)就是實驗不成立。這種方法在非瘟的檢測上，是一點意義都沒有的，除非是豬都已經(jīng)死掉了，而且含有大量病毒的時候，我們用全血來檢測，這時候可能會起到判斷的作用，但是他的特異性也不強，檢測方法比以前的要差好多倍，這種東西在生產(chǎn)上的意義不大。檢測不準(zhǔn)，一分錢都是貴的，檢測準(zhǔn)，一百塊都是的。所以這個試紙卡是不建議在生產(chǎn)上使用的，還是靜下心來研發(fā)提高他的檢測敏感性，檢測卡就不要推出市場了，檢測卡應(yīng)該退出市場，不要用了，浪費資源，耽誤疫情。
    PCR檢測中的免提法的誤差應(yīng)該說是不可接受的，個別的會很好，但是大部分是不好的， 這種情況就很麻煩了，農(nóng)業(yè)部沒有規(guī)定，說哪家免提法好，哪家不好，是沒有規(guī)定的，所以大家就在市場上自由選擇，因為大部分就不好，所以你選擇就不好，前一步都錯了，那后一步也會有問題，所以在非瘟防控上面，我們說要打人民戰(zhàn)爭也好，要防控也好，但是前提是我們要知道病毒在哪里，我們生物安全做到什么程度要知道，所以檢測的準(zhǔn)確性是非常非常重要的。所以檢測中的測試卡，我們把它排除了，免提法有待進一步提高，建議用 AB 法。
    監(jiān)測非瘟，用血檢會嚴(yán)重滯后
    接下來一個問題就是采血檢查，是非常準(zhǔn)，但是這也是一個非常大的錯誤。我們知道一個病毒要感染一頭豬，先是病毒從口腔內(nèi)進入，有些人做實驗，說病毒先從血液中出現(xiàn)，那是把病毒打到血液中，那肯定就先出現(xiàn)，如果是自然感染的情況下，兩豬接觸那肯定是口腔先出現(xiàn)，口腔中出現(xiàn)后，比如說這個豬身體很弱，那三天血液中就會出現(xiàn)，短三天，長一個月以上40天左右，有可能將出現(xiàn)病毒，原來說潛伏期19天，不是這個概念，可能潛伏期長，那么在這樣一個長的潛伏期，唾液當(dāng)中的病毒在豬的生活過程當(dāng)中就不斷的污染環(huán)境，等你這個豬厭食了，發(fā)燒了，嘔吐了，你這個時候再檢，你前面可能已經(jīng)污染了，病毒就在環(huán)境中大量的襲擊，就耽誤了一個時間，就叫檢測的時效性問題，所以我想用血液檢測就嚴(yán)重滯后了，當(dāng)血液中檢測到病毒時就已經(jīng)晚期了。
    像西班牙是有一個專門的團隊，血檢后整個豬場都要清理掉，我們現(xiàn)在很多豬場是拔牙式清除，比如說這一棟有問題就把它清掉，不斷地拔，對整個行業(yè)的損失性太大了，所以我們發(fā)現(xiàn)了這個規(guī)律后，就推廣唾液檢查，因為唾液上出現(xiàn)問題把它去掉，損失就小一點。
    為什么您建議用唾液檢測監(jiān)測疫情？
    因為我們研究唾液研究很長時間了，我們是研究圓環(huán)跟藍(lán)耳的唾液檢測，當(dāng)時我們發(fā)現(xiàn)有個錯誤，以前我們測藍(lán)耳的時候，我們是根據(jù)平均血液當(dāng)中的藍(lán)耳的感染量，在保育豬的感染量是30%，但是在唾液中是70%，也就是說檢血液他的漏檢量是40%。然后圓環(huán)在血液中是30%左右，但是檢唾液是90%到，有就是漏檢 60%到70%，漏檢了2/3.那么我們就發(fā)現(xiàn)唾液檢測的效率要比血液高，然后我們就不斷的跟蹤研究，就發(fā)現(xiàn)采血對豬的傷害太大了，采血你這個豬可能一個星期不長肉了，那這樣對生產(chǎn)影響很大的，但是采唾液就不存在這個情況，豬是很愉快的咬蓋子，然后我們把蓋子拿出來，把唾液采出來。國外當(dāng)時是用一根繩子掛在豬圈里面，因為繩子很長，采唾液很麻煩，所以我們就用一個袋子，豬把袋子吞進去了，我們用繩子一拉，然后一擠就出來了，然后就很干凈，主要是檢測效率高。
    那么在藍(lán)耳跟圓環(huán)檢測效率這么高的基礎(chǔ)上，對非瘟的檢測效果會怎么樣？我們委托那些豬場用唾液檢測的方法，發(fā)現(xiàn)檢測出的時間要早很多，河北、云南、浙江都開始做唾液檢測研究了，準(zhǔn)備推廣這種方法。因為非洲豬瘟采血還有一個麻煩的方式，人需要進去到豬舍里面，要去抓豬，假如這個豬有病毒的話，他會掙扎會把病毒釋放出來，人接觸了這個豬，人又會帶病毒，然后再去采下一頭豬的時候，就把病毒帶到下一頭豬了，如果是不同的欄，這就造成了另一個欄也污染了，這個就不好了。
    唾液檢查比血液檢查會好，一個就是唾液里面的病毒量沒有發(fā)病的豬的病毒高，但是如果那個豬不發(fā)病，那么那個血液當(dāng)中根本就沒有病毒，這樣想就是唾液的檢測有意義。根據(jù)現(xiàn)在的統(tǒng)計學(xué)資料，國外開始越來越重視唾液的檢測，但我們還沒有跟上這一步，因為我早期去美國，他們在藍(lán)耳的時候就開始檢測了，后來我們回來研究就發(fā)現(xiàn)不能用繩子而是用手提袋，加方便。
    收集唾液的袋子你可以自己做，有些豬場也有生物安全柜，你用紗布就可以做一個，也還有簡單的，就是用口罩剪個洞往理念塞上棉花也可以做。總而言之，只要豬咬上那個東西能把海綿吸進去就行了。1毫升左右就夠了。其實我們一般采樣會采5-6毫升，或者10毫升，時間一般是1-2分鐘。
    唾液送到哪里檢測？保存多久準(zhǔn)確度高？
    送到哪里都行，一般的獸醫(yī)站都可以檢測，自行檢測結(jié)果取決于PCR反應(yīng)的時間，有些快的可能20分鐘，有些可能久點。
    血液需要冷藏，唾液跟血液一樣，唾液從豬場到檢測實驗室的時間，可能會發(fā)生各種各樣的變化，一般要求是要冷藏來降低酶的活性，我們會發(fā)現(xiàn)25度是非常危險的溫度，比如說你在豬場采的，里面是有病毒的，然后過一段時間，血液中的病毒可能會被血液中的東西給殺掉，就沒有了。唾液也是一樣，唾液里面有很多酶，這可能會把病毒給殺掉。這就出現(xiàn)一個問題，比如查這個豬的健康度，豬比較健康但唾液卻有問題，所以我們在采集唾液的時候， 我們在試管里面會加上核酸酶抑制劑，唾液只要一擠進去，核酸酶抑制劑就立即會跟唾液混合，把酶給抑制住了。我們發(fā)現(xiàn)，至少在冷藏的情況下，一般是兩個星期不會發(fā)生變化，這樣就穩(wěn)定了。送檢的時候，還是要冷藏運輸，一般在里面放一個冰袋，保持4-8℃。
    采集唾液，怎么避免交叉感染？
    我們16年就開始研究了，那時候還沒非洲豬瘟。相對比進豬舍去采血要安全多了，方法簡單，豬會比較安全，用一次性手套拿一個封存一個。
    抽血是一個非常糟糕的事情，我們現(xiàn)在的想法是想把注射器消滅掉，因為本身針頭本身就是帶著恐懼，現(xiàn)在就是要解決這樣一個問題，所以我們這一代就看能不能解決掉這個注射器的問題。
    唾液收集這個方法很快就能學(xué)會，大概2-3分鐘就可以。采血就不一樣了，要學(xué)好多天，可能還學(xué)不會，我采血都是跟廣東動檢的一個人學(xué)的，所以我們現(xiàn)在就想推廣唾液檢測這種方法。一個是考慮動物福利，還有關(guān)鍵就是口腔里面的病毒比血液里面多，出現(xiàn)早，一般血液都是比較干凈的，如果血液里有比較多病毒，那就是病毒血癥。
    用唾液檢測監(jiān)測疫情，怎么抽查好？
    如果這個地方不是疫區(qū)，我們建議就按照場里的計劃，比如一個季度或者一個月隨機抽查， 如果是疫區(qū)建議每天抽查，隨機抽查就要看你要知道多少的可信度，如果，那就是全查，如果是95%，那可能抽查25-28頭就夠了，比如想把母豬作為一個群體，想要達到95%的可信度，那么抽查28 頭豬，那樣就夠了?，F(xiàn)在很多獸醫(yī)工作者，以為豬群越大，采樣的就需要越多，其實按照隨機原則都是一樣的。具體看你怎么分群體。
     為什么抽查28 頭？這個是生物統(tǒng)計的概念，大樣本抽樣，按照抽樣的基本差。數(shù)據(jù)就是25-28。這個就是抽樣，就像人口普查一樣，并不代表每個地方都要查到，是分一個點，隨機抽樣來的數(shù)據(jù)。抽樣判斷總體。很多獸醫(yī)不知道，還以為是按照百分比。
    非洲豬瘟，口腔的傳播，到血液傳播，到糞便的傳播，所以一個地區(qū)如果污染了，夏天下雨多的地方也比較麻煩，比如兩廣，地下水也會變得很危險。
    您有聽說過有復(fù)養(yǎng)成功的嗎？
    復(fù)養(yǎng)基本沒有成功的，環(huán)境已經(jīng)污染了，豬苗引進回來也帶毒，養(yǎng)豬所有的做法還跟以前是一樣的。疫區(qū)是很難成功的，所以這種情況下一定要養(yǎng)種豬，需要改掉以前的飼養(yǎng)模式，終消滅非洲豬瘟的是豬不是人。
    哨兵豬其實也存在風(fēng)險，比如養(yǎng)少量豬的時候密度小，發(fā)病風(fēng)險高，小豬可能不發(fā)病，長大了才發(fā)病，當(dāng)大規(guī)模進豬時，它可能又發(fā)病了。水源、環(huán)境的安全性沒法改變，能改變的只有豬的抵抗力。當(dāng)然，可以打深水井，70米以上的，那個水質(zhì)我們研究過，沒有問題。
    水如果感染病毒，應(yīng)該是幾天就會發(fā)病。東北就有個老太太請人吃了四次盒飯，喂了豬以后豬三天就發(fā)病了，在這次非洲豬瘟疫情中，損失大的一般都是大企業(yè)。不死的豬一般分為兩種情況，康復(fù)豬的抵抗力特別強，也有豬一點抵抗力沒有?，F(xiàn)在所有的工作都建立在“保豬”上，沒有豬啥都是空的。
    您對養(yǎng)豬業(yè)怎么看？
    這個問題比較難，就看你從哪個角度來看，比如你可以說養(yǎng)豬業(yè)的災(zāi)難來了，從另外一個角度，機會來了。豬少了，就會研究控制這個病的方法，人總能找到一種方法來研究提高豬的抵抗力，包括檢測方法的改善；生物安全角度而言，生物安全級別提高，很多其他病毒都可能凈化掉，企業(yè)可能會有生存危機，但行業(yè)不會消失。
    唾液檢測，其實也只有唾液檢測才有價值。因為此時還沒有出現(xiàn)病毒血癥，豬糞排毒還沒出現(xiàn)，拔牙式清除還來得及。

    血檢發(fā)現(xiàn)病毒陽性，已經(jīng)晚了，大量糞便排泄很難隔和清除，場內(nèi)凈化也很難做到，后續(xù)就慢火連營了。這也是為什么很多豬場拔牙清除都失敗的原因。

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