在我們的實驗室若是不能提供很多的色譜柱的情況下，而項目時間緊張的情況下，送到特定的手性公司，以下是氨基酸手性分析柱方法開發(fā)小建議，歡迎大家一起來探討學(xué)習(xí)。

    一、流動相選擇

    因多糖類衍生物可以在水中和鹵代烷烴中溶解，手性方法中避免使用這一類的溶劑，特殊處理工藝的色譜柱除外，所以常規(guī)條件的流動相多選用烷烴，和醇類，在正相色譜中，固定相為性較大的化合物，那么醇類在洗脫劑中為強洗脫性溶劑，而烷烴類為弱洗脫性溶劑，選正己烷和乙醇進(jìn)行方法開發(fā)，這一組體系不能將化合物進(jìn)行分離，將乙醇更改為異丙醇或者正丙醇，或者將正己烷改為正庚烷，可能會有很大的改善，也可能效果不明顯，每一種化合物和溶劑之間的相互作用需要不斷的嘗試。

    二、避免固定思維

    對于剛開始入門的所有的分析人員來說，可能希望找到一種模式，來使得針對所有的化合物有效，比如，低溫一定有助于分離，異丙醇一定比乙醇的體系分離度好，此類等等，但是凡是均有例外，所以需要嘗試摸索不能蓋棺定論，應(yīng)具體化合物具體分析。

    三、矛盾解決

    在整體的研發(fā)中，可能會遇到相互矛盾的情況出現(xiàn)，例如，異構(gòu)體的分離度不夠，流動相中增高烷烴的比例，分離度合格了，該濃度下的靈敏度的信噪比太小，靈敏度和分離度之間形成了矛盾，此時嘗試柱溫的改變和流動體系的改變來滿足我們分離的要求。

    四、添加劑

    酸性添加劑和堿性添加劑，加入添加劑的目的有兩個：di一，有效改善峰形，色譜的硅膠填料性質(zhì)決定了加入堿性添加劑，可以起到掃尾的作用；第二：PH 的作用，可以改善樣品在溶劑中官能團的解離。

    那么如何選擇酸堿添加劑：

    1、堿性化合物選堿性添加劑，例如三乙胺 、二乙胺等，添加堿性添加劑可以有效地防止化合物和硅羥基之間的相互作用而引起的拖尾現(xiàn)象；

    2、酸性化合物選酸性添加劑：例如三氟乙酸，醋酸等，多糖衍生類固定相的性較大，酸性化合物有可能與固定相結(jié)合，從而導(dǎo)致色譜峰洗脫不出來，或者峰形嚴(yán)重拖尾，加入酸性試劑可以有效的抑制化合物的解離，實現(xiàn)化合物的分離。

    但是色譜柱都有PH的耐受上限，因此每一款不同的色譜柱的適用說明說上都有zui高的添加量，比如大賽路的色譜柱DEA zui高0.5% 三氟乙酸 0.5%zui高，若是適用使超過上限會對色譜柱的壽命有很大影響。