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古朵技術(shù)分享:免疫組化和免疫熒光的區(qū)別
發(fā)布時(shí)間:2023-07-13瀏覽次數(shù):835返回列表
古朵技術(shù)分享:免疫組化和免疫熒光的區(qū)別
免疫組化和免疫熒光都經(jīng)過(guò)免疫原,原理相似,只是顯色劑不同,免疫熒光是免疫組化技術(shù)之一。
1、免疫組化是應(yīng)用免疫學(xué)的基本原理,即抗原和抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)確定組織細(xì)胞中的抗原,使標(biāo)記有抗體的顯色試劑顯色,并對(duì)其進(jìn)行定位、定性和相對(duì)定量研究。在免疫組化過(guò)程中,常用的顯示劑包括熒光素、酶、金屬離子或同位素。
2、免疫熒光是一種不會(huì)影響抗原和抗體活性的熒光色素,被標(biāo)記在抗體或抗原上,然后與其對(duì)應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)特異性的熒光反應(yīng)。免疫熒光是免疫組化技術(shù)之一,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、速度快的特點(diǎn)。但相對(duì)結(jié)果判斷的客觀性不足,技術(shù)程序復(fù)雜。
免疫組化與免疫熒光的真正目的均為明確病理診斷,以便患者獲得治療。
請(qǐng)問(wèn)你曾經(jīng)被IHC、ICC和IF所困擾過(guò)嗎?
在實(shí)驗(yàn)中,有沒(méi)有一種感覺(jué),就是對(duì)免疫組化(IHC),免疫細(xì)胞(ICC),以及免疫熒光(IF)傻傻分不清,那么今天我們就來(lái)討論一下這三者的區(qū)別,先貼圖上來(lái)以便有個(gè)大致的區(qū)分。

從圖中我們可以看出,免疫檢測(cè)技術(shù)可以根據(jù)報(bào)告標(biāo)簽的不同,分為免疫化學(xué)和免疫熒光兩類(lèi),而根據(jù)樣品類(lèi)型不同,可以分為組織和細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)。因此,才會(huì)延伸出三個(gè)相近的概念。
為了好的區(qū)分這三個(gè)概念,我們還可以根據(jù)他們的英文詞根來(lái)分析一下,他們的英文名分別是免疫組織化學(xué)Immunohistochemistry (IHC),免疫細(xì)胞化學(xué)Immunocytochemistry
(ICC),免疫熒光 Immunofluorescence (IF)。
詞根分析:
Immuno-指的是免疫技術(shù)(例如,抗體和抗原的結(jié)合)
Histo-指的是組織(細(xì)胞以及它周?chē)募?xì)胞外基質(zhì))
Cyto-指的是細(xì)胞(不包含細(xì)胞外的基質(zhì))
Chemistry-在這里指的是化學(xué)檢測(cè)方法(例如,顏色的變化)
Fluorescence-對(duì)被激發(fā)的熒光團(tuán)的檢測(cè)
通過(guò)對(duì)詞根的解釋?zhuān)嘈拍阍谛闹胁辉倜悦A税伞?
這三個(gè)應(yīng)用技術(shù)都屬于免疫技術(shù),都是將抗原與抗體的結(jié)合可視化,即通過(guò)一定的方法可以直接看到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。而常用的方法就是化學(xué)顯色和熒光顯色。如果報(bào)告標(biāo)簽是酶促的,就是免疫化學(xué),如果是熒光的,就是免疫熒光。
其實(shí)我們糾結(jié)免疫熒光的一個(gè)原因還在于免疫熒光的英文名字Immunofluorescence (IF),但若是寫(xiě)成免疫組織熒光(IHF)或是免疫細(xì)胞熒光(ICF),那我們是不是就豁然開(kāi)朗了。雖然這兩個(gè)詞匯在英文文獻(xiàn)中應(yīng)用的還不是很廣泛,但不是我自己杜撰的哦,已經(jīng)有些學(xué)者在使用了,規(guī)范化應(yīng)該也只是時(shí)間的問(wèn)題。
可能文字描述還是有些晦澀難懂,那我們就直接上圖吧。先不看下面答案,僅從幾張圖片,你能明白哪張圖代表哪種應(yīng)用嗎?

A免疫組織化學(xué):兔EGFR單克隆抗體(10001-R043-50)—人胎盤(pán)
B 免疫細(xì)胞化學(xué):兔α微管蛋白單克隆抗體抗—MEF1細(xì)胞
C免疫熒光組織:兔Cdk5單克隆抗體—雞腦組織
D免疫熒光細(xì)胞:兔JNK2/MAPK9(10745-R004-50)單克隆抗體—人Hela細(xì)胞
A圖和B圖是免疫化學(xué)(Immunochemistry),這種應(yīng)用是抗體檢測(cè)目標(biāo)蛋白,發(fā)生了化學(xué)反應(yīng),然后顯色,根據(jù)樣本類(lèi)型的不同,又可以分為免疫組織化學(xué)(A)和免疫細(xì)胞化學(xué)(B)。
C圖和D圖是免疫熒光(Immunofluorescence),這種應(yīng)用根據(jù)抗體檢測(cè)目標(biāo)蛋白然后通過(guò)偶聯(lián)熒光基團(tuán)來(lái)顯色。根據(jù)樣本類(lèi)型的不同可以分為免疫熒光組織(C)和免疫熒光細(xì)胞(D)。
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