ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟詳解

  做任何實(shí)驗(yàn)，都不行能完全沒有差錯(cuò)，我們能做的就是盡大的努力削減實(shí)驗(yàn)差錯(cuò)。在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中，差錯(cuò)分有系統(tǒng)差錯(cuò)、偶然差錯(cuò)、過錯(cuò)差錯(cuò)，而一個(gè)小小的差錯(cuò)主意可以影響到實(shí)驗(yàn)，那么怎樣才干縮小實(shí)驗(yàn)差錯(cuò)呢?除了需求仔細(xì)之外，還有一些需求要點(diǎn)留意的當(dāng)?shù)亍?

  1：留意試劑盒保存期，過保存期的試劑不能運(yùn)用。

  2：評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性，試劑的穩(wěn)定與否，對(duì)率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽對(duì)照及樣品重復(fù)對(duì)比實(shí)驗(yàn)，斷定試劑符合要求后方可運(yùn)用。

  3：嚴(yán)厲把握顯色時(shí)刻，顯色時(shí)刻過短，參加停止液反應(yīng)停止后，底物結(jié)合物的量過少，易呈現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時(shí)刻后顯色，應(yīng)判為假陽性，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色，不行報(bào)陽性，這可能是本底顯色的成果。

  4：加樣要、快速。如果加樣不，酶生成物的量不能斷定，直接影響顯色成果。顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和停止液的量有關(guān)，所以加樣應(yīng)穩(wěn)重。要求在必定時(shí)刻內(nèi)加樣結(jié)束的實(shí)驗(yàn)，如果加樣緩慢，便呈現(xiàn)差錯(cuò)，并且試劑長時(shí)刻暴露在外，特別室溫過高時(shí)，保存期會(huì)縮短乃至失效。

  5：檢驗(yàn)技師應(yīng)具有從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能嫻熟操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械，具有必定總結(jié)和剖析問題的才干，對(duì)實(shí)驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。

  6：運(yùn)用校對(duì)過的微量移液器，掃除自然差錯(cuò)。移液器與否對(duì)定量檢測尤為重要。

  7：仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)厲依照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不行混用。值得改善的當(dāng)?shù)?，重?fù)實(shí)驗(yàn)斷定建立后才干改善。

  8：洗刷完全，如若洗板不完全，酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽性。洗刷液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳腐的洗刷液會(huì)呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能呈現(xiàn)假陽性。

  9：嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)刻，反應(yīng)時(shí)刻過長，酶失活;反應(yīng)時(shí)刻過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松懈不結(jié)實(shí)，容易洗掉，都可能造成假陰性。

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