新生牛血清蛋白檢測指標有哪些?

  新生牛血清(Newborn Calf Serum)是來自剛出生~出生后2周內的新生牛靜脈取血。經大規(guī)?；旌虾蟪^濾制成成品，主要用于動物細胞培養(yǎng)，是醫(yī)藥生物技術產品的重要原材料之一，其質量好壞直接影響細胞生長情況。

  總蛋白含量是新生牛血清需要檢查的指標。它屬于化學成分的初步分析。有人統(tǒng)計過國產新生牛血清的蛋白含量1，在比較各產區(qū)各年份后，發(fā)現(xiàn)其含量在3.7%~4.4%之間。進口新生牛血清并不與之*一致。因為國內的血清常采自奶牛，而國外的血清常采自肉牛。蛋白質是新生牛血清的主要成分，在細胞培養(yǎng)中起著維持滲透壓、pH 值緩沖、物質運輸和提供營養(yǎng)、促進細胞粘附等重要作用。在胎牛血清中，其總蛋白含量要低。

  血紅蛋白含量也是新生牛血清一項重要檢測指標。它是在血清運輸和加工過程中細胞裂解釋放到血清中的。之所以檢測主要是由于牛血清中血紅蛋白具有氧化性，其含量過高會引起羧基的產生和脂質過氧化反應，從而導致生產細胞受損，也會增加下游純化處理的難度，給藥品質量帶來安全隱患2。有報道血紅蛋白具有神經毒性。在腦皮層細胞的體外培養(yǎng)中，培養(yǎng)24小時后，血紅蛋白會造成神經元的廣泛死亡(EC50為1-2.5μM)3。在《中國藥典》三部(2015 版)中，要求對新生牛血清中血紅蛋白含量應不高于200 mg/L，方法主要為分光光度法。

  使用時常見問題及解決方法：

  一、保存血清-好的方法?

  血清應保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?，再放回冷凍?

  二、如何解凍血清才不會使產品質量受損?

  將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。

  三、如何避免沉淀物的產生?

  1.解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實驗顯示非常容易產生沉淀物。

  2.解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

  3.請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質量。

  4.血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

  5.若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。

  四、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?

  欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因為它可能會阻塞過濾膜。

  血清上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術相關產品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發(fā)高質量的新產品，提供客戶滿意的綜合服務質量”的方針。