植物脫氫酶(Plant dehydrogenase, pDHA) 試劑盒說(shuō)明書

  植物脫氫酶試劑盒測(cè)定意義

  生物體的脫氫酶(Plant dehydrogenase , DHA)的活性在很大程度上反映了生物體的活性狀態(tài)，能直接表示生物細(xì)胞對(duì)其基質(zhì)降解能力的強(qiáng)弱。

  植物脫氫酶試劑盒測(cè)定原理

  受氫體 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride，即 TTC)在細(xì)胞呼吸過(guò)程中接受氫以后，其還原產(chǎn)物三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone，即 TF)呈現(xiàn)紅色，在波長(zhǎng) 485nm 處有大吸收峰，測(cè)定其 485nm 吸光值，即得植物脫氫酶活性。

  需自備實(shí)驗(yàn)儀器及用品

  恒溫培養(yǎng)箱或水浴鍋、低溫離心機(jī)、研缽、濾紙、可見分光光度計(jì)、1mL 比色皿、冰、蒸餾水和乙酸乙酯(不允許快遞，請(qǐng)用戶自備)。

  植物脫氫酶試劑盒試劑的組成和配制

  試劑一：粉劑×2瓶，使用前加少量水溶解，定容至60mL，避光、4℃保存(盡量現(xiàn)配現(xiàn)用)。

  試劑二：液體 60mL×6，4℃保存。

  試劑三：乙酸乙酯，自備。

  植物脫氫酶試劑盒樣品處理

  稱取 0.5-1g 的植物組織，用雙蒸水清洗 3-4 次，用濾紙吸干水分，備用。

  酶活單位定義：在 37℃時(shí)，每小時(shí)每克樣品使反應(yīng)體系 OD 值每增加 0.01 為一個(gè)酶活單位。

  計(jì)算公式：脫氫酶活性(U/g·h)=(OD485測(cè)定-OD485對(duì)照)÷0.01 ÷樣品質(zhì)量(g) ÷反應(yīng)時(shí)間(h)。

  植物脫氫酶試劑盒注意事項(xiàng)

  1. 配制好的試劑一避光保存于 4℃，盡量在一周內(nèi)使用，若出現(xiàn)紅色，則不能使用。

  2. 試劑三易揮發(fā)，有毒，為了您的健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，戴口罩，戴乳膠手套操作。

  3. 反應(yīng)完成后立即冰浴以終止反應(yīng)，并去除干凈殘留的反應(yīng)液。

  4. 如果測(cè)定出來(lái)的吸光值較大，需把樣品適當(dāng)稀釋再進(jìn)行測(cè)定。

  5. 試劑盒 2-8℃保存。

  植物脫氫酶(Plant dehydrogenase, pDHA) 試劑盒說(shuō)明書 古朵既能滿足研發(fā)類客戶對(duì)產(chǎn)品種類、包裝、純度的特殊要求，也能滿足生產(chǎn)型企業(yè)從小試、中試到規(guī)模化生產(chǎn)各個(gè)階段的綜合需求。產(chǎn)品涵蓋有機(jī)試劑、無(wú)機(jī)試劑和生 化試劑，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、天然植物提取物及中藥標(biāo)準(zhǔn)品，核酸、酶、緩沖劑、顯色底物，醫(yī)藥中間體、原料藥、催化劑、高純?nèi)軇?、特種高分子材料及實(shí)驗(yàn)室常用耗材。 品種類超過(guò)2萬(wàn)種，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞藥理、藥劑、分子生物學(xué)等科研領(lǐng)域。