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骨髓間充質(zhì)干細胞如何誘導(dǎo)分化為軟骨細胞呢?
發(fā)布時間:2019-02-22瀏覽次數(shù):1446返回列表
骨髓間充質(zhì)干細胞具有自我更新能力和多向分化的潛能,在特定環(huán)境下可以分化為多種組織細胞,其中包括軟骨細胞。骨髓間充質(zhì)干細胞來源廣泛、取材方便,可取自健康人或者患者本人,創(chuàng)傷小,且體外分離、培養(yǎng)、擴增操作簡單,可作為關(guān)節(jié)損傷后軟骨細胞移植的細胞來源,是生物工程治療骨關(guān)節(jié)疾病的基礎(chǔ)。
那么,如何將骨髓間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)分化為軟骨細胞呢?
北京協(xié)和醫(yī)院的趙巖等老師建立了穩(wěn)定的人骨髓間充質(zhì)干細胞誘導(dǎo)分化為軟骨細胞的方法,為后續(xù)實驗研究提夠了穩(wěn)定的細胞供給。
在實驗中,先要找到合適的骨髓間充質(zhì)干細胞,趙巖等老師購買了美國ScienCell公司的原代的骨髓間充質(zhì)干細胞(HMSC-bm,貨號#7500),并對干細胞表型CD90和CD105的表達進行了鑒定,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在3-8代之間細胞表型及狀態(tài)能夠維持穩(wěn)定的骨髓間充質(zhì)干細胞特征,另外,為排除造血干細胞混雜的可能,老師們還進行了CD34、CD45免疫細胞化學(xué)檢測,未發(fā)現(xiàn)陽性細胞染色,故而可證明此ScienCell的細胞完全為骨髓間充質(zhì)干細胞來源,可以作為轉(zhuǎn)化為軟骨細胞的穩(wěn)定的細胞來源。
隨后,老師們將人的骨髓間充質(zhì)干細胞通過加入含有TGF β3和FBS的培養(yǎng)基進行三維誘導(dǎo)培養(yǎng),成功誘導(dǎo)分化了具有軟骨細胞形態(tài)和軟骨功能的細胞。通過此方法誘導(dǎo)得到的細胞,不僅具有軟骨細胞形態(tài),還能夠產(chǎn)生II型膠原和蛋白多糖這兩種關(guān)節(jié)軟骨成分,具有軟骨細胞的功能。
綜上可知,利用含有TGF β3和FBS的培養(yǎng)基進行三維誘導(dǎo)培養(yǎng),可以成功的誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞,使其轉(zhuǎn)化為軟骨細胞,從而為后續(xù)的各項研究提供了穩(wěn)定的細胞來源。
另外Sciencell公司也有配好的間充質(zhì)干細胞軟骨細胞培養(yǎng)基(MCDM,貨號#7551),包括500ml基礎(chǔ)液、5ml細胞生長因子、5ml雙抗,用的時候混勻即可,簡單方便,且效果也是非常不錯的,大家也可以選擇一下。