轉(zhuǎn)鐵蛋白(11096-37-0)由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品僅用于生物化學(xué)研究方面，轉(zhuǎn)鐵蛋白(11096-37-0)是我司眾多優(yōu)質(zhì)蛋白類之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括轉(zhuǎn)鐵蛋白在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)鐵蛋白
英文名稱：Transferrin
產(chǎn)品貨號(hào)：QN0310
產(chǎn)品規(guī)格：10mg

本品用于生化研究。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種能傳遞鐵離子的蛋白質(zhì)。轉(zhuǎn)鐵蛋白可以促進(jìn)人類淋巴細(xì)胞的增殖。是血漿中主要的含鐵蛋白質(zhì)，負(fù)責(zé)運(yùn)載由消化管吸收的鐵和由紅細(xì)胞降解釋放的鐵。以TRF-Fe3+的復(fù)合物形式進(jìn)入骨髓中，供成熟紅細(xì)胞的生成。

別名：鐵傳遞蛋白;人轉(zhuǎn)鐵蛋白
CAS號(hào)：11096-37-0
儲(chǔ)存條件：2～8℃陰涼干燥處
性狀：紅色粉末

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名稱：羅丹明標(biāo)記鬼筆環(huán)肽
貨號(hào)：QN0267
規(guī)格：300T
本品為TRITC標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽，染色反應(yīng)特異性強(qiáng)，對(duì)比性高，具有比Actin抗體更好的染色效果，適合用作F-actin的定性和定量檢測。另外，經(jīng)本品結(jié)合后的F-actin仍能維持actin自身具有的許多生物學(xué)特性。且本品的結(jié)合沒有物種差異性，適用性廣泛。

別名：羅丹明鬼筆環(huán)肽
分子式：C60H70N12O13S2
分子量：1231.4
性狀：紫色粉末(凍干粉)

鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是一種來源于毒蕈類鬼筆鵝膏的環(huán)狀七肽毒素，以高親和力(Kd= 20 nM)選擇性結(jié)合于絲狀肌動(dòng)蛋白F-actin，而不會(huì)與單體肌動(dòng)蛋白G-actin結(jié)合，通常用來標(biāo)記組織切片，細(xì)胞培養(yǎng)物或無細(xì)胞體系中的F-actin，從而對(duì)F-actin進(jìn)行定性和定量分析。另外，鬼筆環(huán)肽衍生物也以相近的親和力結(jié)合于大小纖維，無論是動(dòng)植物來源的肌肉細(xì)胞或非肌肉細(xì)胞，按照每一個(gè)肌動(dòng)蛋白亞基約與一個(gè)鬼筆環(huán)肽分子的計(jì)量比結(jié)合。且非特異性結(jié)合幾乎可忽略，染色區(qū)域和非染色區(qū)域辨識(shí)度非常明顯。因此，鬼筆環(huán)肽衍生物特別適合替代肌動(dòng)蛋白(Actin)抗體進(jìn)行相關(guān)研究。另外鬼筆環(huán)肽衍生物很小，直徑約12-15?，分子量＜2000 Daltons，未標(biāo)記肌動(dòng)蛋白(Actin)的許多生理特性都得以維持，比如，同肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白如肌球蛋白，原肌球蛋白，DNase I等仍能發(fā)生反應(yīng);鬼筆環(huán)肽標(biāo)記的纖維絲仍可穿透固相肌球蛋白基質(zhì);以及甘油抽提的肌纖維標(biāo)記后仍可收縮等。

鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)的結(jié)合阻止絲狀肌動(dòng)蛋白(微絲)的解離，穩(wěn)定微絲結(jié)構(gòu)，從而破壞微絲的聚合-去聚合的動(dòng)態(tài)平衡。此特性使得肌動(dòng)蛋白聚合發(fā)生的臨界濃度(CC)降至＜1μg/mL，因此，可用作一種聚合促進(jìn)劑。此外，鬼筆環(huán)肽還可抑制F-actin的ATP水解活性。

1. 工作液準(zhǔn)備
本品以溶于甲醇的 20μM 儲(chǔ)存液形式提供，總量為 300μl。按照 100 nM 的工作液濃度來換算，可制備總量為 60ml 的工作液。建議收到產(chǎn)品后，根據(jù)單次使用量，對(duì)母液進(jìn)行小量分裝，-20℃避光凍存，一年穩(wěn)定。開始實(shí) 驗(yàn)前，使用 1×PBS 緩沖液稀釋儲(chǔ)存液到需要的工作濃度。推薦工作濃度為：80~200nM。現(xiàn)配現(xiàn)用。

2. 染色步驟
1) 細(xì)胞爬片生長 24h，使其密度達(dá)到 50%匯合度。
2) 吸掉培養(yǎng)液，37℃預(yù)熱的 1×PBS(pH 7.4)清洗細(xì)胞 2 次。
3) 使用溶于 PBS 的 4%甲醛溶液進(jìn)行細(xì)胞固定，室溫固定 10min。 注意：避免固定劑中含有甲醇成分，因?yàn)榧状荚诠潭ㄟ^程中可能破壞肌動(dòng)蛋白。
4) 室溫條件下，用 PBS 清洗細(xì)胞 2~3 次，每次 10min。
5) 室溫條件下，用丙酮(≤-20℃)脫水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化處理 5min。
6) 室溫條件下，用 PBS 清洗細(xì)胞 2~3 次，每次 10min。
7) 取 200μl 配制好的 TRITC 標(biāo)記鬼筆環(huán)肽工作液，覆蓋住蓋玻片上的細(xì)胞，室溫避光孵育 30min(通常情況下， 4℃~37℃孵育皆可)。 注意：為了降低背景，可于 TRITC 標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽工作液內(nèi)加入 1% BSA;另外，孵育過程中為了避免溶液揮 發(fā)，可將蓋玻片轉(zhuǎn)移到一個(gè)密封的容器內(nèi)。
8) 用 PBS 清洗蓋玻片 3 次，每次 5min。
9) 使用 200μl DAPI 溶液(濃度：100 nM)對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行復(fù)染，約 30s。
10) 用 PBS 清洗蓋玻片，然后倒置在已經(jīng)滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片劑的載玻片上。使用紙巾輕輕檫 掉多余封片劑，然后用指甲油封片。此法制備的標(biāo)本玻片可置于 4℃避光保存，通常 6 個(gè)月內(nèi)可繼續(xù)做 F-actin 染色分析。 注意：也可以直接使用含有 DAPI 的抗熒光淬滅封片劑合并步驟 9)10)，簡化步驟。
11) 熒光顯微鏡或者共聚焦顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察，選擇 TRITC 激發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=540/570nm)和 DAPI 激 發(fā)/發(fā)射濾片(Ex/Em=364/454nm)。

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
QN0254	植物血球凝集素M	1g
QN0262	膠原蛋白II型	2mg
QN0266	L-鹽酸半胱氨酸	25g|500g
QN0293	DiI標(biāo)記高密度脂蛋白	500μg
QN0313	肌紅蛋白	100mg
QN0328	膠原蛋白Ⅰ型	1g
QN0330	人血清白蛋白	500mg|1g|5g
GH0953	蓖麻蛋白	1mg/5mg/10mg

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