北京百奧萊博供應(yīng)的Protein G磁珠抗體純化試用于科研試驗(yàn)，Protein G磁珠抗體純化試是我司眾多優(yōu)質(zhì)抗體制備及分型之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購(gòu)。...

特別提示：包括Protein G磁珠抗體純化試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：Protein G磁珠抗體純化試劑盒
英文名稱：ProteinG Antibody Purification
產(chǎn)品貨號(hào)：CZ013
產(chǎn)品規(guī)格：5ml/100ml/500ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
Protein A(or Protein G)抗體純化磁珠系列產(chǎn)品是由NHS活化的超順磁性微球與Protein A(or Protein G)共價(jià)結(jié)合形成的復(fù)合微粒。與當(dāng)前免疫磁珠市場(chǎng)上同類產(chǎn)品相比，該產(chǎn)品具有更高的抗體結(jié)合能力和較低的蛋白非特異吸附率，洗脫條件更均一，一步純化即可從血清樣品中分離出純度大于90%的抗體。
本產(chǎn)品為微米級(jí)磁性微球，熟練操作可在15 min內(nèi)完成抗體吸附過程，30 min內(nèi)完成抗體純化流程。本產(chǎn)品可重復(fù)使用，適用于血漿、腹水、組織培養(yǎng)上清液等樣品中的抗體純化，也可用于抗體固定及其它相關(guān)研究。用戶可根據(jù)目標(biāo)抗體的種屬來(lái)源及亞型選擇磁珠的類別，Protein A，Protein G磁珠與不同抗體的親和性比較參見附表1。
操作流程(以純化人血清IgG為例)：
1. 樣品處理：取人血清100 μL至1.5 mL EP管中，接著加入900 μL Binding/Washing buffer，充分混勻。
2. 磁珠預(yù)處理：將抗體純化磁珠漩渦振蕩30 s，使磁珠充分重懸；取200 μL 10%(v/v)磁珠懸液置于另一新的1.5 mL EP管中。對(duì)磁珠懸液進(jìn)行磁性分離，棄上清液，用1 mL Binding/Washing buffer洗滌2次，磁性分離，管中磁珠可直接用于抗體分離。
注：該步驟磁珠的用量可根據(jù)磁珠對(duì)目標(biāo)抗體的zuì大結(jié)合量進(jìn)行調(diào)節(jié)，當(dāng)目標(biāo)抗體的濃度大于150μg/mL時(shí)，用戶可取1.2～1.5倍磁珠用量(計(jì)算方式：如1.5*樣品中目標(biāo)抗體含量/磁珠zuì大結(jié)合量)，若目標(biāo)抗體濃度過低，如低于70 μg/mL時(shí)，客戶為了提高抗體回收率，可增加磁珠用量，如提高至3倍磁珠用量。
3. 抗體吸附：在步驟2預(yù)處理的磁珠管中加入步驟1處理的樣品溶液，漩渦振蕩均勻，在室溫下(約25℃)置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)EP管，促使樣品和磁珠充分接觸并吸附，翻轉(zhuǎn)約15 min后進(jìn)行磁性分離，移棄上清液。
4. 磁珠洗滌：向EP管中加入1 mL Binding/Washing buffer，振蕩重懸磁珠后進(jìn)行磁性分離，移棄上清液；該操作重復(fù)3次。
5. 抗體洗脫：在上述完成磁珠洗滌的EP管中加入0.5～1.0 mL Elution buffer，用移液器吹打或者渦旋震蕩下迅速重懸，然后在室溫下(約25℃)置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)EP管，翻轉(zhuǎn)10 min后進(jìn)行磁性分離，收集上清液至新的EP管。
注意事項(xiàng)：該步驟Elution buffer用量，建議客戶使zuì終洗脫的抗體濃度控制在0.6～1.2 mg/mL，此時(shí)第1次洗脫條件中95%以上的抗體將被洗脫下來(lái)；若Elution buffer用量過少，會(huì)導(dǎo)致部分抗體在第1次洗脫時(shí)仍然留在磁珠上，從而導(dǎo)致抗體回收率降低。
6. 抗體中和：在步驟5抗體洗脫液中加入一定量的Neutrilization buffer，一般為抗體洗脫體積的1/10，zuì終使洗脫的抗體pH值保持中性環(huán)境，以利于維持抗體的生物活性，避免抗體失活。
7. 磁珠后處理：使用后的磁珠用Elution buffer洗滌2次，磁性分離，棄上清液；接著用Binding/Washing buffer洗滌3次，磁性分離，棄上清液，加入200 μL Storage buffer重懸磁珠 ，置于2～8℃保存。
磁珠再生：
1. 磁珠多次使用后會(huì)有沉淀蛋白、強(qiáng)疏水性蛋白、脂蛋白等雜質(zhì)非特異性吸附到磁珠上，為了保證磁珠的使用效率，建議持續(xù)使用5次后進(jìn)行磁珠再生處理。
2. 按約每1 mL 10%(v/v) 磁珠加入1 mL 1%(v/v)Triron X-100磁珠再生緩沖液，振蕩均勻，在室溫下置于翻轉(zhuǎn)混合儀或者手工輕輕翻轉(zhuǎn)混合，10 min后進(jìn)行磁性分離，棄上清液。
3. 立即加入1 mL Binding/Washing buffer進(jìn)行重懸，然后磁性分離，棄上清液，重復(fù)該操作3次。
4. 加入1 mL Storage buffer重懸磁珠 ，置于2～8℃保存。
注意事項(xiàng)：
1. 進(jìn)行抗體純化操作之前，請(qǐng)務(wù)必認(rèn)真閱讀本操作說(shuō)明書。
2. 本產(chǎn)品須與磁性分離器配套使用。
3. 磁珠使用前應(yīng)充分振蕩均勻。
4. 磁珠應(yīng)保存在儲(chǔ)存溶液中，防止干燥。
5. 請(qǐng)勿將磁珠冷凍或離心，以免引起不可逆聚集。
6. 本產(chǎn)品僅供研究使用。
常見問題及解答(FAQ)：
Q1：如何提高抗體與磁珠結(jié)合效率?
A1： 磁珠與抗體的結(jié)合效率與抗體的種屬來(lái)源及所屬亞型有關(guān)，請(qǐng)確認(rèn)抗體的類型與Protein A配基的親和效率(附表1)，如抗體所屬亞型與Protein A的親和度較低，可以通過增加抗體與磁珠的孵育時(shí)間(30～120 min)、提高結(jié)合緩沖液的pH值(8～9)及降低離子強(qiáng)度(25～100 mM NaCl)等方法提高親和效率，或選擇與目標(biāo)抗體具有更高親和度的配基(如Protein G或Protein A/G)。
Q2：如何提高抗體洗脫效率？
A2：抗體與Protein A配基親和度太高導(dǎo)致抗體洗脫效率低，可以通過降低洗脫緩沖液的pH值(1.9～2.5)、增大洗脫緩沖液的離子強(qiáng)度(可選用2～3 M MgCl2)或延長(zhǎng)洗脫時(shí)間，提高抗體的洗脫效率。但應(yīng)注意抗體在低pH條件下容易形成聚集物，抗體洗脫產(chǎn)物應(yīng)馬上用堿性緩沖劑(如Tris、HEPES等)調(diào)節(jié)pH至中性。
Q3：如何避免磁珠在儲(chǔ)存或使用過程中可能出現(xiàn)的聚集情況？
A3：磁珠應(yīng)保存在2～8℃，使用時(shí)應(yīng)避免由于污染而導(dǎo)致的不可逆聚集，或因干燥而導(dǎo)致的聚集。磁珠在低pH的洗脫緩沖液中發(fā)生聚集屬于正?，F(xiàn)象，不影響磁珠的正常使用。在Binding/Washing buffer和Elution buffer中添加終濃度為0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、Tween-20或Triton X-100)可有效防止磁珠聚集。經(jīng)過低pH洗脫操作的磁珠可以用Binding/Washing buffer和Elution buffer洗滌至中性，并用超聲波水浴處理2 min，即可使磁珠恢復(fù)均勻狀態(tài)，以上處理均不影響磁珠的抗體結(jié)合效率。
Q4：如何解決磁珠易粘附管壁的現(xiàn)象？
A4：建議使用低吸附率的耗材進(jìn)行磁珠操作。另外，在緩沖液中添加0.01%～0.1%(v/v)的非離子型去垢劑(如NP-40、Tween-20或Triton X-100)可以有效降低磁珠對(duì)耗材的粘附。
Q5: 磁珠在使用過程中出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象？
A5：磁珠在使用時(shí)如果出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象一般較難振蕩打散，容易導(dǎo)致分布不均，出現(xiàn)該問題的原因是磁珠在磁場(chǎng)中放置太久而使磁珠牢固的結(jié)合在一起。用超聲波水浴處理2 min即可打散磁珠使其重新分散，但應(yīng)注意超聲處理也會(huì)使磁珠在樣品溶液中捕獲的抗體脫落，所以磁珠在加樣后洗脫前不宜使用該方法。

根據(jù)您的關(guān)注的Protein G磁珠抗體純化試劑盒，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格
F080202	小鼠IgM類單抗腹水純化試劑盒	可純化50ML腹水量
GH0884	Cy5.5標(biāo)記重組蛋白G	200μg/500μg
GH0892	Cy5標(biāo)記重組蛋白G	200μg/500μg
GH0895	Cy5標(biāo)記蛋白A	100μg/200μg
GH0916	HRP標(biāo)記重組蛋白G	100μg/200μg
GH0917	FITC標(biāo)記重組蛋白G(高純)	200μg/500μg
GH0921	FITC標(biāo)記蛋白A	100μg/200μg

關(guān)注Protein G磁珠抗體純化試劑盒，的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：


F080202 小鼠IgM類單抗腹水純化試劑盒 可純化50ML腹水量
F080203 小鼠IgG1/IgG2類單抗腹水純化試劑盒 可純化50ML腹水量
F080204 小鼠IgG3類單抗腹水純化試劑盒 可純化50ML腹水量
CZ010 蛋白A磁珠抗體純化試劑盒 1ml/5ml/25ml
CZ011 蛋白A/G磁珠抗體純化試劑盒 1ml/5ml/25ml
CZ012 Protein A磁珠抗體純化試劑盒 5ml/100ml/500ml
CZ013 Protein G磁珠抗體純化試劑盒 5ml/100ml/500ml
QN2655 巰基氨基蛋白偶聯(lián)樹脂 5ml|25ml

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