細(xì)胞組織DNA/RNA/蛋白分離的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的RNA提取純化產(chǎn)品，本制品僅用于生物化學(xué)研究方面，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多細(xì)胞組織DNA/RNA/蛋白分離等RNA提取純化產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括細(xì)胞組織DNA/RNA/蛋白分離純化提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：細(xì)胞組織DNA/RNA/蛋白分離純化提取試劑盒
英文名稱：Tissue Cells DNA/RNA/microRNA/Protein Extraction & Isolation Kit
產(chǎn)品貨號：ALH068
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒用于快速從同一個動物細(xì)胞或者組織樣品中同時提取分離基因組DNA和包括miRNA的總RNA和Protein(如購買額外miRNA吸附柱子和配套溶液，還可以將同一個樣品的總RNA和miRNA分離并提取，富集miRNA。)。獨(dú)特的裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA/DNA酶，然后裂解混合物RNA/miRNA/DNA/Protein同時通過一個基因組DNA吸附柱，基因組DNA被吸附而miRNA/RNA/Protein穿透濾過。DNA吸附柱上基因組DNA經(jīng)過一系列漂洗-離心后洗脫得到純凈基因組DNA。濾過的miRNA/RNA用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后，miRNA/RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于miRNA/RNA吸附柱上，再通過一系列快速的漂洗-離心洗脫得到純miRNA/RNA。濾液經(jīng)選擇性沉淀得到Protein。無苯酚、氯fǎngDNA/RNA快速提取技術(shù)基礎(chǔ)上配合獨(dú)特的分離技術(shù)同時得到的miRNA/RNA/基因組DNA純度高，互不干擾。得到的miRNA/RNA不需要DNase消化，可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)?；蚪MDNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各種試驗(yàn)。

產(chǎn)品組分：
裂解液RLT Plus————50ml
Wash Solution 1————12ml
Wash Solution 2/3————10ml
RNase-free H2O—————10ml
抑制物去除液————25ml
漂洗液————————15ml
緩沖液————————60ml
洗脫緩沖液——————10ml
基因組DNA吸附柱和收集管————50套
RNA吸附柱和收集管————50套

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 完全不使用有毒的苯酚，氯fǎng等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
2. 快速，簡捷，單個樣品miRNA/RNA/基因組DNA/Protein分離操作一般可在1小時內(nèi)完成。
3. 獨(dú)特吸附柱和配方確保有效清除基因組DNA殘留，一般情況下得到的miRNA/RNA不需要DNase消化可直接 用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)。
4. 多次柱漂洗確保miRNA/RNA/基因組DNA高純度，可直接用于下游各種實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：
1. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13000rpm的傳統(tǒng)臺式離心機(jī)，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
2. 樣品處理量不要超過基因組吸附柱和RNA吸附柱處理能力，否則造成DNA殘留或者產(chǎn)量降低。不同組織細(xì)胞種類RNA/DNA相差大，例如胸腺脾臟DNA含量豐富，超過5mg就會超過柱子處理能力。COS細(xì)胞RNA含量豐富，超過3×106細(xì)胞就會超過柱子吸附能力。所以開始摸索實(shí)驗(yàn)條件時，如果不清楚樣品DNA/RNA含量時寧可使用較少的樣品處理量，如細(xì)胞不超過3～4×106，組織不超過10mg。將來根據(jù)樣品試驗(yàn)情況增加或者減少處理量。
3. 裂解液RLT Plus 、抑制物去除液IR、Wash solution 1、Wash solution 2/3中含有刺激性化合物，操作時要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
4. 該試劑盒如需要用于植物樣品尤其是多糖多酚次級代謝產(chǎn)物豐富的困難樣品的DNA/miRNA/RNA提取，請咨詢技術(shù)人員，可能需要用到其它試劑。
5. 如購買額外miRNA吸附柱子和配套溶液，還可以將同一個樣品的總RNA和miRNA分離并提取，富集miRNA。請咨詢我們。
6. 關(guān)于DNA 的微量殘留：
一般說來任何總RNA提取試劑在提取過程中無法完全避免DNA的微量殘留（DNase消化也無法做到無殘留）， 本試劑盒，由于采取了本公司獨(dú)特的緩沖體系和基因組DNA 分離清除技術(shù)，大多數(shù)DNA已經(jīng)被清除，不需要DNase消化，可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR和熒光定量PCR。個別特殊情況如DNA含量過于豐富造成殘留或者要進(jìn)行嚴(yán)格的mRNA表達(dá)量分析熒光定量PCR，我們建議在進(jìn)行模板和引物的選擇時：
1) 選用跨內(nèi)含子的引物,以穿過mRNA 中的連接區(qū),這樣DNA就不能作為模板參與擴(kuò)增反應(yīng)。
2) 選擇基因組DNA和cDNA上擴(kuò)增的產(chǎn)物大小不一樣的引物對。

儲存條件：室溫，有效期一年。

本制品別名：組織細(xì)胞DNA/RNA/蛋白分離提取試劑盒|組織細(xì)胞DNA/RNA/蛋白分離純化試劑盒|組織細(xì)胞核酸與蛋白分離純化試劑盒|組織細(xì)胞蛋白/DNA/RNA/分離提取試劑盒|DNA/RNA/蛋白分離提取試劑盒|DNA/RNA/蛋白分離純化試劑盒|核酸與蛋白分離純化試劑盒|蛋白/DNA/RNA/分離提取試劑盒

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貨號	名稱	規(guī)格
BTN81102	石蠟包埋組織RNA提取試劑盒	30次
BTN3191	Tris飽和酚	100mL
WE0195	miRNA提取試劑盒	50次
WE0199	細(xì)菌RNA提取試劑盒(含DNase I)	50次
WE0202	植物RNA提取試劑盒(含DNase I)	50次
ALH071	血液miRNA提取試劑盒	50次
ALH003	總RNA提取試劑(組織/細(xì)胞/液體樣本)	50ml|100ml

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名稱：植物RNA柱式提取試劑盒
貨號：BTN71203
規(guī)格：50次
本試劑盒是植物RNA提取試劑盒(BTN3080)的柱式升級產(chǎn)品，它結(jié)合了BTN3080性(其效果在近五十多種各類植物中得到驗(yàn)證，植物名單見BTN3080產(chǎn)品介紹的附錄)和百奧萊博柱式純化系列產(chǎn)品的快捷性。

試劑盒特點(diǎn)：
1. 操作更加簡單快速，處理一個樣品只需要約十分鐘，比植物RNA提取試劑盒快一倍。
2. RNA純度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能夠有效去除大多數(shù)植物中的多糖污染。
3.小RNA回收效率更高。
4.適用于所有用植物RNA提取試劑盒能提出RNA的植物(注:對有些植物可能需要在溶液A中額外添加RVC)。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern雜交、cDNA合成等實(shí)驗(yàn)。
6. 高于進(jìn)口的柱式植物RNA提取產(chǎn)品。
7.一站式，提供RNase-free的樣品收集管。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脫液	10ml
說明書	1份

注：溶液B為淡黃色液體，使用前請觀察顏色是否正常。若溶液B有油粒狀顆粒及分層，屬正?，F(xiàn)象，不影響使用。

儲存條件：常溫運(yùn)輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 估算組織細(xì)胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物葉片、或50-100mg植物種子、或200-500mg植物果實(shí)。
2. 先將新鮮植物組織剪切成小塊(保存在RNAhold中的植物組織需用紙吸去RNAhold液體后再剪切成小塊)，放入10-15mL塑料離心管中，加入1mL溶液A，然后用勻漿器勻漿5-20秒。勻漿時會產(chǎn)生泡沫，但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎植物組織，硯磨完后加入1mL溶液A。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
3. 將勻漿物或硯磨物轉(zhuǎn)移至干凈的1.5mL塑料離心管中(可以不必轉(zhuǎn)移非液體的細(xì)胞碎片)。有的植物組織(比如果實(shí))含有大量水份，勻漿液會多于1mL，轉(zhuǎn)移時也只取1mL。
4.在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備氯fǎng，在振蕩器上振蕩30秒混勻，此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。
5.室溫12000～15000g離心3～5分鐘，兩相間將有約5-10毫米厚的細(xì)胞破碎物。
6. 將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中，下層有機(jī)相和中間層含有DNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)，避免觸及或吸取。zuì好留下100μL上清液不取。
7. 加入等體積的溶液C，充分顛倒混勻。如果有沉淀產(chǎn)生(對某些植物，屬于正?，F(xiàn)象)，千萬不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
8. 將一半的溶液(如果有沉淀，則先混勻)轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，13000-15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液。
9. 將剩下的一半溶液(如果有沉淀，則先混勻)轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中，13000-15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液。
10. 加0.7mL通用洗柱液，室溫離心半分鐘，棄穿透液。再加0.3mL通用洗柱液，室溫離心半分鐘，棄穿透液。一般樣品如此洗滌兩次即可，但如果在第7步加入溶液C后有沉淀產(chǎn)生，則需要洗三次，每次加入的通用洗滌液的量分別為0.4、0.3和0.3mL。
11.室溫離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。
12. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中，加入50-100μl RNA洗脫液，室溫放置1-2分鐘。
13. 13000-15000g室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳，因?yàn)榉亲冃阅z不能分離所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
15. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定：將5-10μl RNA溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進(jìn)而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度×體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。
16. RNA純度測定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān))，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。

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