我公司致力于為客戶(hù)提供高純度、低成本的活性重組蛋白，包括100bp DNA Ladder在內(nèi)的各類(lèi)受體、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)錄因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...

特別提示：包括100bp DNA Ladder Plus在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱(chēng)：100bp DNA Ladder Plus
產(chǎn)品貨號(hào)：JN0092
產(chǎn)品規(guī)格：500μl(100次)

  本DNA Marker為預(yù)混1×Loading Buffer的DNA溶液，可直接電泳。100bp DNA Ladder Plus在100bp DNA Ladder基礎(chǔ)上添加了1200bp，1500bp，2000bp三個(gè)條帶。

片段組成：
100bp，200bp，300bp，400bp，500bp（加亮），600bp， 700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp，2000bp，其中500bp條帶濃度加倍，約為30 ng/μl，顯示為亮帶，使電泳結(jié)果更容易辨認(rèn)，亦可用于定量。其它各條帶濃度約為10 ng/μl。

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年。

圖1：DNA Marker電泳圖


圖2：DNA Marker條帶示意圖


表1：DNA Marker選擇指南

目的條帶分子量范圍 （推薦瓊脂糖%）	標(biāo)準(zhǔn)分辨率	高精分辨率
1500bp以下 (1.0%到2.0% Agrose)	200bp DNA Ladder	100bp DNA Ladder
	200bp DNA Ladder Plus	100bp DNA Ladder Plus
	100bp DNA Ladder ODD	DNA Ladder 2000 Plus
	100bp DNA Ladder ODD Plus	DIY DNA Marker(條帶任選)
	DNA Ladder 2000
1500bp以上 (0.7% Agrose)	DNA Ladder 3000	1kb DNA Ladder I
	DNA Ladder 5000	1kb DNA Ladder II
	DNA Ladder 9000	1kb DNA Ladder Plus I
	DNA Ladder 10000	1kb DNA Ladder Plus II
	λ/Hind III DNA Marker	DIY DNA Marker(條帶任選)

表2：DNA Marker系列一覽表

DNA Marker	條帶組成(bp)	瓊脂糖(%)
100bp DNA Ladder	100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000	1.5%
100bp DNA Ladder Plus	100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1200、1500、2000	1.0%
100bp DNA Ladder ODD	100、300、500、700、900、1100、1500	1.5%
100bp DNA Ladder ODD Plus	100、300、500、700、900、1100、1500、2000、3000	1.0%
200bp DNA Ladder	200、400、600、800、1000、1200、2000	1.5%
200bp DNA Ladder Plus	200、400、600、800、1000、1200、2000、3000、5000	1.0%
DNA Ladder 2000	100、250、500、750、1000、2000	1.0%
DNA Ladder 2000 Plus	100、250、500、750、1000、2000、3000、4000、5000	1.0%
DNA Ladder 3000	100、250、500、750、1000、1500、2000、3000	0.7%
DNA Ladder 5000	100、250、500、750、1000、1500、2000、3000、5000	0.7%
DNA Ladder 9000	500、1000、2000、3000、5000、9000	0.7%
DNA Ladder 10000	500、1000、2000、4000、7000、10000	0.7%
1kb DNA Ladder I	500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、8000	0.7%
1kb DNA Ladder Plus I	100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、8000	0.7%
1kb DNA Ladder II	500、1000、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000	0.7%
1kb DNA Ladder Plus II	100、250、500、750、1000、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000	0.7%
λ/Hind III DNA Marker	125、564、2027、2322、4361、6557、9416、23130	0.6%
DIY DNA Marker(條帶任選)	100、200、250、300、400、500、600、700、750、800、900、1000、1100、1200、1500、 2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000等24個(gè)fregment任選	詳情請(qǐng)參考說(shuō)明書(shū)

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BTN70608 miRNA尿素-PAGE上樣液 1.5mL
BTN90602J DNA marker(λ-EcoT14 I) 100μg
BTN90602F DNA marker(λ/EcoRI+HindIII) 50次
BTN90308 親和硅烷 25mL
WE0168 瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 50次|200次
WE0246 2kb DNA Marker 100次(500μl)|500次(5×500μl)
RFT001 100bp DNA ladder(100～1500bp) 100T(2×250μl)

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名稱(chēng)：一站式DNA尿素-PAGE電泳套裝
貨號(hào)：BTN90317
規(guī)格：30次
本品是專(zhuān)門(mén)用于DNA 尿素-PAGE電泳的一站式試劑盒。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.一站式，即開(kāi)即用，用戶(hù)不需單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分，十分方便。用戶(hù)不需要單獨(dú)準(zhǔn)備各種成分。
2.可用于DNA 測(cè)序、AFLP、DDRT、TGGE和RNase 保護(hù)實(shí)驗(yàn)等。
3. 安全，免去了實(shí)驗(yàn)人員接觸粉末狀的劇毒物品丙烯酰胺。
4.電泳后可直接用于銀染、EB染色等實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品組成：

成分	規(guī)格	保存
電泳級(jí)尿素	210g	常溫
電泳級(jí)丙烯酰胺	77.34g	常溫
電泳級(jí)甲叉雙丙烯酰胺	2.67g	常溫
10×TBE電泳液	250ml	常溫
電泳級(jí)TEMED	1.5ml	4℃，避光
電泳級(jí)過(guò)硫酸銨	1g	常溫
2×尿素-PAGE上樣液	1ml	-20℃
說(shuō)明書(shū)	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸，保存條件見(jiàn)上表，有效期一年。

使用方法：

一、PAGE濃度和交聯(lián)度的選擇指南
尿素-PAGE一般推薦用29：1(丙烯酰胺：甲叉雙丙烯酰胺)的交聯(lián)度，
在此條件下，DNA片段和zuì適PAGE濃度對(duì)應(yīng)關(guān)系如下：

單鏈DNA長(zhǎng)度	zuì佳PAGE濃度	二甲苯青FF遷移率 對(duì)應(yīng)的長(zhǎng)度	溴酚藍(lán)的遷移率 對(duì)應(yīng)的長(zhǎng)度
50-400nt	8%	160nt	45nt
200-1000nt	5%	260nt	65nt
750-2000nt	3.5%	460nt	100nt

二、制備尿素-PAGE膠
1. 配制尿素-PAGE膠(這是配制100mL膠的用量，配制更大體積的膠則需以此用量為基礎(chǔ)按比例增加)
A：新鮮配制10%的APS(過(guò)硫酸銨)：按每0.1 克過(guò)硫酸銨干粉加1mL超純水的比例將水加到裝有硫酸銨干粉的1.5mL EP 管中，搖晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
B：新鮮交聯(lián)度為29:1的40%的丙烯酰胺-甲叉雙丙烯酰胺溶液(AB溶液，下同)：在裝有77.34 g電泳級(jí)丙烯酰胺干粉的瓶中加入約120mL自備的去離子水，然后將全部甲叉雙丙烯酰胺加入到同一塑料瓶中(可以加少量丙烯酰胺溶液沖洗出來(lái)以避免粉末有毒粉末飄出。甲叉雙丙烯酰胺溶解度低，不會(huì)溶解在這少量溶液中)。充分搖晃混勻后所得溶液即40%的AB溶液。配制40%而非30%的原因是這樣可以在下步留出足夠空間加尿素。
C：配尿素-PAGE膠：在一個(gè)250mL的三角瓶中，先按下表的用量加入去離子水、40%AB溶液和10×TBE緩沖液。丙烯酰胺單體溶液具有神經(jīng)毒性，一定要戴手套操作。

PAGE膠濃度	各成分用量(尿素為克，其余單位是mL)			補(bǔ)水到(mL)
	尿素	40%AB溶液	10×TBE緩沖液
5%	42	12.5	5.0	100
6%	42	15.0	5.0	100
7%	42	17.5	5.0	100
8%	42	20.0	5.0	100
9%	42	22.5	5.0	100
10%	42	25.0	5.0	100
11%	42	27.5	5.0	100
12%	42	30.0	5.0	100

D：攪拌溶解，然后用濾紙過(guò)濾。zuì好能抽真空10-15分鐘以去除溶液中的氧氣(氧氣能抑制丙烯酰胺聚合反應(yīng))，無(wú)條件也可以不脫氧。
E：加入500μL 10%APS和100μL TEMED，迅速搖勻后倒膠。
F:在膠的液面距離達(dá)到頂部時(shí)停止灌膠，插入梳子。
G:室溫聚合30-60分鐘(低溫抑制聚合反應(yīng))。
H: 拔出梳子，用0.5×TEB液沖洗加樣孔。

三、樣品準(zhǔn)備
2. 對(duì)一般樣品、測(cè)序樣品、微衛(wèi)星DNA、AFLP樣品、DDRT樣品、RPA樣品：將樣品跟上樣液1:1 混合，95℃ 3分鐘變性，然后放冰上待用。
3. 對(duì)TGGE樣品：可以直接上樣。

四：電泳
4. 將凝膠板固定在電泳裝置上，往上槽和下槽中加入足夠0.5×TEB電泳液。
5.預(yù)電泳5-30分鐘將冰上放置的樣品上樣。
6.連接電源線，打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)。根據(jù)膠的大小選擇功率(固定功率可以固定產(chǎn)熱，這樣不容易發(fā)生過(guò)熱而使膠板破裂的現(xiàn)象。如果固定電流或電壓，產(chǎn)熱都將隨電泳時(shí)間而變化，不好控制)。對(duì)小膠一般用5-6W 固定功率，大膠用15-25W 固定功率。
7. 終止電泳，取出凝膠進(jìn)行后續(xù)的處理(如銀染)。注意：如果銀染，必須延長(zhǎng)固定時(shí)間以便讓洗出尿素，否則殘留尿素會(huì)干擾后面的銀染。

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