一步法質(zhì)粒DNA提取試劑盒2.0由專業(yè)試劑供應商北京百奧萊博提供，用于科學研究，我公司專注于DNA提取純化產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應，為您提供的一步法質(zhì)粒DNA提取試劑盒2.0質(zhì)量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括一步法質(zhì)粒DNA提取試劑盒2.0在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：一步法質(zhì)粒DNA提取試劑盒2.0
英文名稱：One-step plasmid DNA extraction kit 2.0
產(chǎn)品貨號：BTN70903
產(chǎn)品規(guī)格：50次

基于堿變性原理的質(zhì)粒小量制備(Miniprep)是分子克隆研究中zuì常用的方法之一，其操作包括三種溶液處理，一般需要30分鐘左右的時間才能得到可以上柱的質(zhì)粒DNA初提液。本產(chǎn)品采用百奧萊博開發(fā)的一步式細菌裂解技術，只需要一種溶液處理即可以完成細菌裂解，并且裂解物可以直接上柱純化質(zhì)粒DNA。

試劑盒特點：
1.一步式裂解細菌，比傳統(tǒng)的堿變性方法更快捷。
2.產(chǎn)量跟經(jīng)典堿變性法相當或更高，產(chǎn)率一般為3-5μg質(zhì)粒DNA/mL 飽和菌液(對高拷貝質(zhì)粒而言)。
3. DNA 純度高，OD260/280一般在1.8左右，基因組DNA和RNA污染少。
4.可以直接用于電泳、酶切、PCR、細菌轉(zhuǎn)化、分子克隆、測序等實驗。
5. 重復性和穩(wěn)定性好。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	50ml
離心吸附柱	50只
通用預洗液	50ml
通用洗柱液	100ml
DNA洗脫液2.0	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸及保存(溶液A需要4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 用塑料離心管收集不超過3mL 過夜培養(yǎng)飽和菌液，室溫12000～15000g離心半分鐘，棄上清。注意:不能超過3mL菌液，否則質(zhì)?；厥章蕦⒓眲〗档?。
2. 加入0.6-1mL溶液A(用前需搖勻)，充分吹打或振蕩裂解細菌直到裂解變澄清，一般需要半分鐘左右。注:此方法不同于堿裂解法，故可以充分吹打。
3. 將裂解液全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫靜置2分鐘使質(zhì)粒DNA與膜結(jié)合。室溫12000～15000g離心半分鐘，棄穿透液。如果一次不能將上清全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，可以分兩次進行。
4.在離心吸附柱中加入0.7mL的通用預洗液，室溫12000～15000g離心半分鐘，棄穿透液。注意: 如果通用預洗液放置在低溫產(chǎn)生了沉淀，用前需要加熱到60℃左右使之融化，混勻后再用。
5. 再在離心吸附柱中加入0.3mL的通用預洗液，室溫12000～15000g離心半分鐘，棄穿透液。此步預洗zuì好別省略，否則DNA 純度不高。
6.在離心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室溫12000～15000g離心半分鐘，棄穿透液。
7. 再在離心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，室溫12000～15000g離心半分鐘，棄穿透液。此為第二次洗滌。
8. 再在離心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室溫12000～15000g離心半分鐘，棄穿透液。此為第三次洗滌，如果不洗滌三次，zuì后得到的質(zhì)粒DNA的OD260和280的比值達不到1.8。
9.室溫 12000～15000g離心半分鐘，甩干殘留液體。注意：此步不能省略，否則殘留乙醇會影響后續(xù)的電泳上樣(DNA 沉不到加樣孔里去)和酶反應。
10. 將離心柱置于一個新的1.5mL自備塑料離心管中，加入30-100μl DNA 洗脫液2.0，室溫放置2分鐘。如果將DNA 洗脫液2.0預熱到65-80℃，則效果更好。
11.室溫 12000～15000g離心半分鐘，離心管底溶液即質(zhì)粒DNA，可以直接用于后續(xù)實驗或放冰箱長期保存。
 注意：如果需要去除DNA樣品中的內(nèi)毒素，請使用百奧萊博的液相內(nèi)毒素清除劑。

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名稱：白細胞裂解液
貨號：BTN130989
規(guī)格：250mL
本品為即用型白細胞裂解溶液，可以用于裂解分離純化好的血液白細胞，用于DNA提取、RNA提取等后續(xù)實驗。

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(以DNA提取為例)
1. 取新鮮抗凝血5mL，在10mL或15mL的塑料離心管中用紅細胞裂解液裂解紅細胞(紅細胞裂解液有幾種配方，用戶需要根據(jù)所選產(chǎn)品的使用手冊進行操作，這里不列出每種的詳細步驟)，也可以直接2500rpm離心5分鐘后取白細胞層到一新的10mL或15mL的塑料離心管中。
2.在所得的白細胞沉淀中或所得白細胞層溶液中加自備的生理鹽水使得白細胞的終體積為2mL。
3. 加1mL的本產(chǎn)品，混勻后55℃ 保溫3小時，其間輕輕振搖數(shù)次。
4. 加入3mL自備的Tris飽和酚，輕輕震搖5分鐘，使得水相和酚相充分分開。
5. 3500rpm離心15分鐘，上層水相含DNA，中間白色層為蛋白質(zhì)，下層為酚相。
6. 將非常粘稠的含DNA的上清液轉(zhuǎn)移到一干凈的10mL或15mL的塑料離心管中。
7. 再用Tris飽和酚重復上面的抽提步驟，直到離心后中間層沒有白色的蛋白出現(xiàn)為止。
8.在上清液中加入等體積的自備的lǜ仿，輕輕震搖5分鐘，3500rpm離心5分鐘，轉(zhuǎn)移上清液到一干凈的10mL或15mL的塑料離心管中。此步可以除去殘留的酚。
9.在上清液中加入0.1倍體積的自備的3 M 乙酸鈉溶液(pH5.2)和2倍體積的無水乙醇，輕柔顛倒混勻，將出現(xiàn)絮狀的DNA沉淀。
10. 用移液槍頭將DNA沉淀挑取出來，轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中，用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中殘留的鹽離子。
11.轉(zhuǎn)移DNA沉淀到一個1.5mL的塑料離心管中，空氣中放置10分鐘左右待乙醇揮發(fā)后，加入0.5mL自備的TE緩沖液溶解DNA，4℃放置待用。

名稱：一步離心式石蠟清除劑
貨號：BTN70302
規(guī)格：100次
用石蠟包埋組織作為材料進行PCR的難題之一是如何有效去除石蠟，因為殘留的石蠟不但會影響DNA提取，還會干擾PCR擴增。常規(guī)的脫蠟方法一般需要1-2小時的時間，需要多次離心，每次離心都會造成樣品的丟失。本產(chǎn)品只需要一步離心，克服了常規(guī)方法的缺點。

產(chǎn)品特點：
1.快速簡單，只需要離心一次，免去了反復換液和離心，減少了樣品的丟失。
2. 脫蠟效果好，跟經(jīng)典的二甲苯/乙醇法相當。
3. 即開即用，客戶自己不需要準備額外的試劑。

產(chǎn)品組成：

成分	規(guī)格
溶液A	100mL
溶液B	7.5ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 將1mL溶液A加入到1.5mL塑料離心管中。
2. 放入一片不超過25μm的石蠟包埋組織切片。
3.以zuì大速度振蕩10秒。
4. 加入75μL溶液B。
5. 振蕩10秒混合。
6. 7000 g離心2分鐘，小心吸棄上清。
7.真空抽干機抽干離心管中殘留的液體。此步驟約需要一小時。
8. 得到的石蠟包埋組織切片即可用于DNA提取。

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