QN0927 總RNA提取試劑

產品簡介
北京百奧萊博供應的總RNA提取試劑用于科學研究,我公司專注于RNA提取純化產品的研發(fā)、生產和供應,為您提供的總RNA提取試劑質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括總RNA提取試劑在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:總RNA提取試劑
英文名稱:Resgent (Trizol Substitute)
產品貨號:QN0927
產品規(guī)格:100mL|500mL
本試劑是一種通用的總RNA提取試劑,適用于動植物細胞或組織及細菌的總RNA抽提,可有效防止RNA在提取過程中的降解。獲得的RNA可直接用于Northern雜交,純化mRNA,體外翻譯,RNase保護實驗,RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。該試劑可用于100次總RNA提取(10平方厘米細胞或100mg組織)。
使用方法
自備新開封或專用氯fǎng,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。
1. 細胞裂解或組織勻漿:
1)貼壁細胞:吸盡培養(yǎng)液,每10平方厘米(6孔板孔或35 mm平皿)細胞加入1ml本試劑,使其覆蓋培養(yǎng)細胞,再用吸管或加樣器吹打2~3次,細胞應完全裂解,然后轉移至離心管中。
2)懸浮細胞:離心收集細胞,吸盡液體,每五百萬至一千萬(5×106~1×107)動植物或酵母細胞,或一千萬 (1×107)細菌,加入1ml本試劑 。用吸管或加樣器吹打,使其完全裂解。某些酵母和細菌如裂解不充分,可用勻漿器勻漿,以確保其完全裂解。轉移至離心管中。
3)組織:先將組織剪切成小塊,放入玻璃勻漿器內。冷凍組織可在研缽中研磨勻漿。每50~100mg組織加入1ml本試劑 ,勻漿至完全裂解。轉移至離心管中。
裂解產物應呈澄清的透明粘稠液體。室溫放置5分鐘。對于多糖、蛋白等雜質豐富的組織樣品,勻漿后仍會存留有不溶物質,可12000g 4℃離心10分鐘,然后吸取上清至一新的離心管中。
2. 分離:在裝有裂解物的離心管中加入0.2倍體積的氯fǎng(1ml本試劑加入0.2ml氯fǎng),振蕩器上充分振蕩混勻30秒,室溫放置2-3分鐘。12000g 4℃離心10分鐘,然后吸取含總RNA的上層水相至一新的離心管中,每毫升本試劑 約可吸取0.5-0.6ml。有機相和中間層含有DNA和蛋白質,應避免觸及。
3. 沉淀:按每ml本試劑加入0.5ml異丙醇,顛倒數(shù)次混勻,室溫沉淀10分鐘。12000g 4℃離心10分鐘,在管底可見RNA沉淀。棄上清,按每毫升本試劑加入1ml 75%乙醇,輕輕顛倒混勻,以清洗RNA沉淀。12000g 4℃離心2分鐘,棄去液體,小心勿丟棄RNA沉淀。室溫倒置晾干5~10分鐘。
4. 溶解:加入適量DEPC處理水使RNA沉淀溶解。存放于-80℃。
注意事項:
1,RNA提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應保證無污染無RNA酶。操作中應小心,防止外源性RNA酶污染樣品導致RNA樣品降解。
2,試劑中含有酚等有害物質,注意個人防護。
儲存條件:4℃避光,有效期12個月
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