RNA純化濃縮試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研試驗，RNA純化濃縮試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)RNA提取純化之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括RNA純化濃縮試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：RNA純化濃縮試劑盒
英文名稱：RNA Cleanup Kit
產(chǎn)品貨號：SV2001
產(chǎn)品規(guī)格：10次|100次

本試劑盒適用于RNA的快速純化，操作簡便，特別適用于DNase I處理、蛋白酶K處理、標(biāo)記、加帽和體外轉(zhuǎn)錄后的RNA濃縮純化，瓊脂糖凝膠RNA的純化回收，對長度大于25nt的RNA純化效率尤其高（≥15nt的RNA操作步驟調(diào)整后也可純化濃縮），回收率達(dá)70%以上，也可用于純化TRIzol或其他類似方法提取RNA溶液，純化的RNA可用于包括轉(zhuǎn)染在內(nèi)的各種下游應(yīng)用。

本試劑盒操作非常簡單方便，操作流程圖如下：


產(chǎn)品組成：

組分	10次	100次
結(jié)合液	4ml	40ml
洗滌液(5×)	2.5ml	2×20ml
離心吸附柱(50μg)	10個	100個
收集管	10個	100個
無酶水	2.5ml	25ml

產(chǎn)品參數(shù)：
結(jié)合能力：50μg
RNA長度：≥25nt
回收率：70～
操作時間：5min
純化：A260/280＞1.8，A260/230＞1.8
下游應(yīng)用：RT-PCR，NGS文庫構(gòu)建，用于基因編輯的RNP復(fù)合物，RNA標(biāo)記，轉(zhuǎn)染等
保存溫度：25℃

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BTN3060 非凍型組織RNA保存液 250mL
BTN81102 石蠟包埋組織RNA提取試劑盒 30次
BTN160907 植物RNA提取試劑盒2.0(無氯fǎng柱式提取) 50次
BTN140402 植物RNA提取專用高鹽溶液 250mL
BTN3073 一管式病毒RNA提取試劑盒 100次
BTN3290 RNase抑制劑(人源)(40U/μL) 2500U
BTN3091 液相RNase清除劑 1.5mL
BTN90318 柱式DNA清除劑 50次

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名稱：非凍型血液RNA保存液
貨號：BTN111202
規(guī)格：100mL
由于血液富含RNase，因此血液RNA非常容易降解，是臨床分子生物學(xué)研究中的一個棘手的問題。為解決此問題，本公司在非凍型組織RNA保存液的基礎(chǔ)上，開發(fā)了本產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點：
1. 能快速滲透到新鮮血液細(xì)胞內(nèi)，抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常溫可放置3天，4℃可放置5天，-20℃可放置3個月。
2. 操作簡單，直接將本產(chǎn)品和新鮮血液細(xì)胞沉淀按比例混合即可。
3.適用于人新鮮血和哺乳動物新鮮血液，不適用于陳舊血液和凍凝血液，也不適用于禽類血液和其他動物血液。
4. 重復(fù)性好，效果跟進(jìn)口同類產(chǎn)品相當(dāng)。
5. 保存的樣品可直接用本公司血液RNA提取試劑盒提取RNA。

儲存條件：室溫運輸及保存，有效期兩年。

使用方法：
注意：RNase污染無處不在，zuì好用本公司的固相RNase清除劑處理RNA工作區(qū)域，千萬不要使用烷基化試劑DEPC(相當(dāng)于芥子氣)。

一:以白細(xì)胞為材料的保存方法(此法效果好于全血保存法)
1.室溫1500-2000 g離心新鮮抗凝血液10-15分鐘，zuì上層為血漿，zuì下層為紅細(xì)胞，中間層為膜狀的、含白細(xì)胞的Buffy Coat(含白細(xì)胞多的血液此層可能很厚)。
2. 吸出血漿后，小心將中間的白細(xì)胞層吸出(允許污染部分紅細(xì)胞)到新的離心管中，加入5-10倍體積的本產(chǎn)品，混勻后放常溫(不超過30℃)保存不超過3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要現(xiàn)在4℃放置過夜，然后再離心去除保存液，zuì后再把細(xì)胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃，冰晶會刺破白細(xì)胞，釋放出其中的RNA，在后續(xù)實驗去掉上清時會丟失)。

二：以EDTA抗凝全血為材料的保存方法
3. 將血液取到EDTA抗凝管中后，迅速將0.5mL血液與1.5mL本產(chǎn)品混合，充分顛倒混勻，然后放常溫(不超過30℃)保存不超過3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要現(xiàn)在4℃放置過夜，然后再離心去除保存液，zuì后再把細(xì)胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃，冰晶會刺破白細(xì)胞，釋放出其中的RNA，在后續(xù)實驗去掉上清時會丟失)。

三：血液RNA的提取(本產(chǎn)品不含RNA提取試劑。此處以本公司的跟Trizol相當(dāng)?shù)膭游颮NA提取試劑盒操作步驟為參考。用戶也可以使用其他RNA純化試劑)
4. 提取RNA時，如果保存的白細(xì)胞在-20℃，則需要先室溫化凍，如果保存在常溫或4℃，則直接使用。
5. 取1.8mL混合液到新的2mL離心管中，5000g室溫離心1分鐘。
6.小心吸棄上清液(本產(chǎn)品)，細(xì)胞將形成沉淀(如果樣品時全血，沉淀中將含有大量血液蛋白)。注意：上清一般會很渾濁，一定要盡可能棄盡。有時沉淀上面有白色晶體出現(xiàn)，屬于正?，F(xiàn)象。
7.在細(xì)胞沉淀中加入動物RNA提取試劑盒 1mL溶液A，劇烈震蕩30秒(不能感覺到震蕩即可，一定要看見管底液體旋轉(zhuǎn)起來，否則只是液體表面的震動，下同)。震蕩后顛倒幾次看溶液是否均勻，如果有顆粒狀物體說明還需要震蕩裂解。
8.室溫放置5分鐘以使細(xì)胞充分裂解。
9. 將0.2mL自備的氯fǎng加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
10. 12000～15000g4℃離心3分鐘。一般上清為無色的水相(含RNA，約0.5-0.9mL)；中間層為白色，含有DNA、蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞破碎物，不要觸及；下層為有機相，一般呈深紅色。注意：有時水相比重大于有機相，出現(xiàn)反相現(xiàn)象，此時應(yīng)該取下面的水相。
11.小心將水相轉(zhuǎn)移到另一自備的1.5mL塑料離心管中。如果水相超過0.75mL，則需要分成2管，否則在下步?jīng)]法加入等體積的異丙醇。
12. 加入等體積的異丙醇到水相中，充分顛倒混勻。
13. 12000～15000g4℃離心10分鐘沉淀RNA。
14. 吸棄上清。注意：如果離心后出現(xiàn)兩個相，則需要吸棄上面的一相，然后在下相(含RNA)中加入一倍體積的超純水和一倍體積的異丙醇，混勻后12000～15000g4℃離心10分鐘沉淀RNA，吸棄上清。
15. 將75% RNase-free乙醇加入到RNA沉淀中，震蕩幾秒后12000～15000g4℃離心1分鐘。
16. 棄上清
17. 12000～15000g4℃離心半分鐘，用移液槍去除殘留的液體。
18. 將20-50μL DEPC處理的水加入到沉淀中并吹打溶解，立即用于下述完整性、產(chǎn)率和純度的檢測，也可直接用于后續(xù)RT-PCR等試驗或存放于-80℃待用。

四: RNA的檢測(列出步驟僅供參考，本產(chǎn)品不提供相關(guān)產(chǎn)品)
19. RNA完整性的電泳檢測：強烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳，因為非變性膠中單鏈RNA分子會自生折疊成各種形狀，尤其不能使用DNA上樣液，因為沒有經(jīng)過去RNase處理。
20. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定：將5-10μl RNA用TE緩沖液(pH8.2)稀釋10倍后檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進(jìn)而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。人血RNA產(chǎn)率一般為2-5μg/mL。
21. RNA純度測定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān))，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。


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