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產(chǎn)品詳情

BTN100825 自誘導培養(yǎng)基(lac啟動子)

  • 產(chǎn)品/服務:BTN100825 自誘導培養(yǎng)基(lac啟動子)
  • 型 號:BTN100825
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-05-09
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):1107
產(chǎn)品簡介

自誘導(lac啟動子)由專業(yè)試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科學研究,我公司的自誘導培養(yǎng)基(lac啟動子)品質(zhì)上佳,經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn),已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...

產(chǎn)品詳細介紹

特別提示:包括自誘導培養(yǎng)基(lac啟動子)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:自誘導培養(yǎng)基(lac啟動子)
英文名稱:Auto-induction Medium
產(chǎn)品貨號:BTN100825
產(chǎn)品規(guī)格:200mL

本產(chǎn)品是本產(chǎn)品是在pET 專用生長培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上開發(fā)而成的,它利用E.coli自身對培養(yǎng)基中不同碳源的調(diào)控利用機制,實現(xiàn)外源蛋白在細菌達到飽和生長期后的自動誘發(fā)。

產(chǎn)品特點:
1.本產(chǎn)品自動誘導表達,不需要添加任何IPTG或相關(guān)誘導物,節(jié)約成本。
2.免去了密切監(jiān)控菌液密度的過程,尤其適合大規(guī)模篩選。
3.大將細菌的生長密度OD600從2左右提高20以上。
4.大提高外源蛋白的表達量,zuì高可占細菌總蛋白的45%。
5.與各種細胞培養(yǎng)容器(如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)罐、深孔管、發(fā)酵罐等)兼容。
6.本產(chǎn)品即開即用,非常方便。
7.適用于T7 RNA聚合酶基因由lac啟動子控制的任何表達系統(tǒng),如pET系列。
8.不適用于lacZ或lacY突變的宿主菌。

產(chǎn)品組成:
成分 規(guī)格
成分A 200ml
成分B 1.25ml
說明書 1份


儲存條件:常溫運輸及保存,有效期兩年。

使用方法:

一、培養(yǎng)基的配制
1.配制自誘導培養(yǎng)基:將1.25mL溶液B全部加入到200mL的溶液A中即得自誘導培養(yǎng)基。
 注意:必須嚴格無菌操作,否則自誘導培養(yǎng)基非常容易長細菌。
2.貼好標簽待用。如果長期時間不用,可以凍存在-20℃。

二、培養(yǎng)基的使用
1.將構(gòu)建好的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入細菌,如BL21(DE3),涂于自備的、含有1%葡萄糖的LB培養(yǎng)基中(需要加入適當濃度的抗菌素),37℃培養(yǎng)過夜。
2.挑取單個細菌接種到自備的、含適當濃度抗菌素的液體LB培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)直到菌液渾濁但不飽和(一般需要6-8小時)。
3.將所得菌液按千分之一的體積比例加入自誘導培養(yǎng)基中(如果自誘導培養(yǎng)基體積是100mL,則加入100μl菌液),同時加入適當?shù)目咕?。注意:在自誘導培養(yǎng)基中,如果使用卡拉霉素,其終濃度比一般的培養(yǎng)基高,需要100μg/mL。由于本方法所得菌液密度大,故需要大量氧氣,因此培養(yǎng)基的體積不能超過三角瓶的五分之一。三角瓶底zuì好是皺褶式的,這樣搖晃中氧氣供應更充分。
4.37℃培養(yǎng)過夜,或37℃培養(yǎng)到菌液飽和時降低搖床的溫度到所需溫度(對溫度誘導型啟動子)。
5.收集菌液開始蛋白純化步驟。

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名稱:硫酸卡那霉素溶液(細菌培養(yǎng)用)
貨號:YT432
規(guī)格:5ml
本品為細菌培養(yǎng)常用抗生素,用于配制含卡那霉素的LB或LB平板等,也可以用于培養(yǎng)細胞的殺菌。本品經(jīng)過濾除菌,使用時可以按照1:1000的比例稀釋使用。

CAS:25389-94-0
分子式:C18H36N4O11·H2SO4
分子量:582.58

儲存條件:-20℃。

名稱:胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)
貨號:YT909
規(guī)格:100ml
本品含0.25%胰酶和酚紅,不含EDTA。該消化液經(jīng)過過濾除菌,可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化,或者一些組織的消化。本胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)具有方便快速的特點,通常室溫消化1分鐘左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細胞。

注意事項:
1. 在使用胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。
2. 胰酶細胞消化液(含酚紅,不含EDTA)消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。

儲存條件:4℃,有效期12個月。

名稱:DMEM高糖培養(yǎng)基(含L谷氨酰胺,含丙酮酸鈉,含HEPES)
貨號:SNM557
規(guī)格:500ml

名稱:分散酶II
貨號:SY0513
規(guī)格:100mg|1g
Dispase II,中文名分散酶II,一種非特異性金屬蛋白酶,細胞生物學中常用于從不同的組織或器官分離單細胞,并用于后續(xù)細胞培養(yǎng),如原代細胞的分離,細胞傳代等。另外,Dispase II還可用于消除懸浮細胞培養(yǎng)過程中發(fā)生的細胞聚集。與其他細胞生物學常用蛋白酶(如胰蛋白酶、膠原酶、鏈霉蛋白酶等)相比,該酶具有以下:1)一種快速有效且溫和的細胞消化酶,對細胞損傷小,且能維持細胞膜完整性;2)來源于細菌,無支原體或其他動物病毒污染;3)穩(wěn)定性強,不受溫度、pH及血清組分的影響;4)可用于多種類型組織和細胞的分離等。

本品非無菌Dispase II,來源于Bacillus polymyxa,使用時需對其除菌處理,用于細胞培養(yǎng)時常用工作濃度為0.6-2.4U/ml。

比活性:≥0.8U/mg (+37℃, casein as substrate, pH 7.5)
單位定義:在溫度37℃、pH值為7.5的條件下,每分鐘水解酪蛋白釋放出相當于1μM(181μg)酪氨酸的福林陽性氨基酸和肽所需要的酶量,即為一個蛋白酶活性單位,以U表示。
zuì佳pH:6.0-8.5
抑制劑:EDTA, EGTA, Hg2+, 其他金屬離子。血清不會抑制dispase活性。
激活劑(Activator):Ca2+,Mg2+,Mn2+,F(xiàn)e2+,F(xiàn)e3+,Al3+。zuì佳的Ca2+濃度為2mM。本酶制品已含足量的Ca2+使其處于zuì佳活性。
儲存條件:4℃

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