MQ0008 XL1-Blue化學感受態(tài)細胞

產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應的XL1-Blue化學感受態(tài)細胞用于科研目的,我公司的XL1-Blue化學感受態(tài)細胞品質(zhì)上佳,經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn),已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產(chǎn)品詳細介紹
特別提示:包括XL1-Blue化學感受態(tài)細胞在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:XL1-Blue化學感受態(tài)細胞
英文名稱:XL1-Blue Chemically Competent Cell
產(chǎn)品貨號:MQ0008
產(chǎn)品規(guī)格:10×100μl/50×100μl
XL1-Blue菌株能保證高拷貝質(zhì)粒穩(wěn)定復制,recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
hsdR17突變導致EcoK核酸內(nèi)切酶系統(tǒng)缺失,增強了外源DNA的穩(wěn)定性和提取質(zhì)量。lacIqZΔM15的存在使XL2-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環(huán)素抗性。
XL1-Blue感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>1×109cfu/μg。
保存條件:-80℃
基因型:
recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44(rk-,mk+),relA1 lac [F" proAB lacIqZ?M15:Tn10(tetr)]
操作說明:
1.XL1-Blue感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中),加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
注意事項:
1.感受態(tài)細胞zuì好在冰上融化。
2.混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚵实倪B接產(chǎn)物可相應減少zuì終用于涂板的菌量。
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儲存條件:低溫運輸,-20℃避光保存,有效期6個月。
名稱:N端YFP標簽融合蛋白質(zhì)粒(黃色熒光蛋白)
貨號:YT478
規(guī)格:1μg
本質(zhì)粒是哺乳動物細胞表達質(zhì)粒,用于表達N端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黃色熒光蛋白)標簽的融合蛋白。該質(zhì)粒含有CMV啟動子,可以啟動目的蛋白在細胞中的表達。在多克隆位點的前面有一個YFP的完整編碼序列,因此在多克隆位點根據(jù)閱讀框插入目的基因就可以表達N端含有YFP標簽的融合蛋白。利用YFP的熒光特性可以比較容易地觀察融合蛋白的表達水平和細胞內(nèi)定位,也可以利用YFP抗體來檢測或免疫沉淀融合蛋白。YFP與GFP高度相似,可以嘗試用GFP抗體檢測YFP。該質(zhì)粒為卡那霉素抗性。轉(zhuǎn)染細胞后,可以使用G418篩選穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株。
本質(zhì)粒質(zhì)粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
YFP | 677-1393 |
Multiple clo | 1394-1483 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1503-1524 |
SV40 polyA signal | 1536-1919 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2057-2363 |
bla promoter | 2388-2512 |
SV40 promoter | 2532-2870 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2905-3696 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3697-4155 |
pUC origin | 4284-4951 |
本質(zhì)粒(5003bp)的圖譜如下:

使用說明:
1. 次使用時請先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,進行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)??梢酝ㄟ^酶切電泳進行鑒定,或通過測序進行鑒定。
2. 本質(zhì)粒在其多克隆位點適當酶切后可以插入待表達的目的基因,構建的質(zhì)??梢杂贸R?guī)方法轉(zhuǎn)染細胞。
儲存條件:-20℃。
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