血液RNA柱式提取試劑盒由專業(yè)試劑供應商北京百奧萊博提供，僅用于生物化學研究方面，我公司的血液RNA柱式提取試劑盒品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括血液RNA柱式提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：血液RNA柱式提取試劑盒
英文名稱：Blood RNA column Extraction Kit
產(chǎn)品貨號：BTN71202
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒是在血液RNA提取試劑盒(BTN3071)基礎上開發(fā)的柱式升級產(chǎn)品，專門從動物全血樣品中快速提取總RNA。

試劑盒特點：
1. 比BTN3071更加簡單快捷，直接使用新鮮的或冷凍的抗凝全血樣品，不需裂解紅細胞等任何預處理步驟，整個提取過程只需要十分鐘左右，可以全在室溫下進行。
2.產(chǎn)量和純度更高，OD260/280 均在2.0左右，產(chǎn)率一般為2-5μg/mL人血。
3. 每次微量提取的zuì大樣品處理量可以達到1.5mL，高于進口的同類產(chǎn)品。
4.與常用的抗凝劑(包括肝素，EDTA，檸檬酸鈉，草酸鈉)兼容，得到的RNA可以直接用于RT-PCR和Northern雜交等研究。

試劑盒組成：

成分	50T
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脫液	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 將0.2-1.5mL 新鮮或解凍后的抗凝全血加入到1.5mL塑料離心管中。
2. 12000～15000g室溫離心3分鐘，棄上清(血漿)。如果此時血液細胞沉淀體積大于0.2mL，則需要減少血液的使用量，具體減少量需根據(jù)具體情況決定，因為各個個體(尤其是患者)血液中白細胞數(shù)目差別很大。
3. 將1mL溶液A加入到血液細胞沉淀中，用移液槍吹打沉淀使細胞裂解。
4. 將0.3mL的溶液B加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
5.和0.2mL lǜ仿加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
6. 12000～15000g室溫離心3～5分鐘，將上清液(為無色或淺紅色，約0.5-0.9mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈離心管中。注意：轉(zhuǎn)移的液體不要超過0.7mL，否則下一步不能加入等體積的溶液C。為防止污染，zuì好留100μL左右的上清液。下層有機相一般呈深紅色，中間層為白色，含有DNA，蛋白質(zhì)和其他細胞破碎物，避免觸及或吸取。
7. 加入等體積的溶液C，充分顛倒混勻。
8. 分兩次將溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，每次轉(zhuǎn)移后12000～15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液。
9. 加0.7mL 通用洗柱液，室溫離心半分鐘，棄穿透液。
10. 如果有必要，可以再加0.3mL 通用洗柱液，室溫離心半分鐘，棄穿透液。注意：增加此步可以進一步提高RNA的純度。
11.室溫12000～15000g離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的通用洗柱液會影響RNA的后續(xù)反應。
12. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一個RNase-free的收集管中，加入50-100μL RNA洗脫液，室溫放置1-2分鐘。
13. 12000～15000g室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. RNA 完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳，因為非變性膠不能分離所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
15. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定：將5-10μL RNA溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。人血RNA產(chǎn)率一般為2-5μg/mL。
16. RNA 純度測定：無污染的總RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關)，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響RT-PCR等反應。

疑難解答：
Q：如何去除RNA樣品中的DNA污染？
A：可以使用百奧萊博的非酶DNA 清除劑DNA ERASOL-2。
Q：為何有的樣品在第6 步離心后有很厚的中間層，上清很少。
A：這是因為蛋白質(zhì)變性不充分，可以適當減少血液的用量。白細胞多的血液容易產(chǎn)生這種情況。
Q：離心吸附柱的RNA zuì大吸附量是多少？
A：是40μg。


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