北京百奧萊博供應(yīng)的DNA/RNA/miRNA分離提用于科研試驗(yàn)，我公司專注于RNA提取純化產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的DNA/RNA/miRNA分離提質(zhì)量可靠，批間差小，且價(jià)格公道，熱切盼望您選購(gòu)我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括DNA/RNA/miRNA分離提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：DNA/RNA/miRNA分離提取試劑盒
英文名稱：Tissue Cells DNA/RNA/microRNA Extraction & Isolation Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：ALH069
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒適用于快速?gòu)耐粋€(gè)動(dòng)物細(xì)胞或者組織樣品中同時(shí)提取分離基因組DNA和包括miRNA的RNA(如購(gòu)買額外miRNA吸附柱子和配套溶液，還可以將同一個(gè)樣品的總RNA和miRNA分離并提取，富集miRNA。）。獨(dú)特的裂解液迅速裂解細(xì)胞和滅活細(xì)胞RNA/DNA酶，然后裂解混合物RNA/miRNA/ DNA同時(shí)通過(guò)一個(gè)基因組DNA吸附柱，基因組DNA被吸附而miRNA/RNA穿透濾過(guò)。DNA吸附柱上基因組DNA經(jīng)過(guò)一系列漂洗-離心洗脫得到純凈基因組DNA。濾過(guò)的miRNA/RNA用乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件后，miRNA/RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于miRNA/RNA吸附柱上， 再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心洗脫得到純凈的miRNA/RNA。無(wú)苯酚、lǜ仿DNA/RNA快速提取技術(shù)基礎(chǔ)上配合獨(dú)特的分離技術(shù)同時(shí)得到的miRNA/RNA/基因組DNA純度高，互不干擾。得到的miRNA/RNA不需要DNase消化，可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)?；蚪MDNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各種試驗(yàn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 完全不使用有毒的苯酚，lǜ仿等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
2. 快速，簡(jiǎn)捷，單個(gè)樣品miRNA/RNA/基因組DNA分離操作一般可在40分鐘內(nèi)完成。
3. 獨(dú)特吸附柱和配方確保有效清除基因組DNA殘留，一般情況下得到的miRNA/RNA不需要DNase消化可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR、熒光定量PCR等實(shí)驗(yàn)。
4. 多次柱漂洗確保miRNA/RNA/基因組DNA高純度，可直接用于下游各種實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品組分：
裂解液RLT Plus————50ml
Wash Solution 1————12ml
Wash Solution 2/3————10ml
RNase-free H2O—————10ml
抑制物去除液——————25ml
漂洗液—————————15ml
洗脫緩沖液———————10ml
基因組DNA吸附柱和收集管————50套
RNA吸附柱和收集管————50套

儲(chǔ)存條件：室溫，有效期12個(gè)月。

注意事項(xiàng)
1. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13000rpm的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī)，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機(jī)。
2. 樣品處理量不要超過(guò)基因組吸附柱和和RNA吸附柱處理能力，否則造成DNA殘留或者產(chǎn)量降低。不同組織細(xì)胞種類RNA/DNA相差大，例如胸腺脾臟DNA含量豐富，超過(guò)5mg就會(huì)超過(guò)柱子處理能力。COS細(xì)胞RNA含量豐富，超過(guò)3x106細(xì)胞就會(huì)超過(guò)柱子吸附能力。所以開(kāi)始摸索實(shí)驗(yàn)條件時(shí)，如果不清楚樣品DNA/RNA含量時(shí)寧可使用較少的樣品處理量，如細(xì)胞不超過(guò)3-4x106，組織不超過(guò)10mg。將來(lái)根據(jù)樣品試驗(yàn)情況增加或者減少處理量。
3. 裂解液RLT Plus 、抑制物去除液IR、Wash solution 1、Wash solution 2/3中含有刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
4. 該試劑盒如需要用于植物樣品尤其是多糖多酚次級(jí)代謝產(chǎn)物豐富的困難樣品的DNA/miRNA/RNA提取，請(qǐng)咨詢技術(shù)人員，可能需要用到其它試劑。
5. 如購(gòu)買額外miRNA吸附柱子和配套溶液，還可以將同一個(gè)樣品的總RNA和miRNA分離并提取，富集miRNA。請(qǐng)咨詢我們。
6. 關(guān)于DNA 的微量殘留：
一般說(shuō)來(lái)任何總RNA 提取試劑在提取過(guò)程中無(wú)法完全避免DNA 的微量殘留（ DNase 消化也無(wú)法做到 無(wú)殘留）， 本試劑盒，由于采取了本公司獨(dú)特的緩沖體系和基因組DNA 分離清除技術(shù)，大多數(shù)DNA 已經(jīng)被清除，不需要DNase 消化，可直接用于反轉(zhuǎn)錄PCR 和熒光定量PCR。個(gè)別特殊情況如DNA 含量過(guò)于豐富造成殘留或者要進(jìn)行嚴(yán)格的mRNA 表達(dá)量分析熒光定量PCR，我們建議在進(jìn)行模板和引物的選擇時(shí)：
1) 選用跨內(nèi)含子的引物，以穿過(guò)mRNA 中的連接區(qū)，這樣DNA 就不能作為模板參與擴(kuò)增反應(yīng)。
2) 選擇基因組DNA 和cDNA 上擴(kuò)增的產(chǎn)物大小不一樣的引物對(duì)。

操作步驟：

操作步驟：（實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng)）
提示：
? 次使用前請(qǐng)先在漂洗液RW 瓶、漂洗液WB 和70%乙醇瓶中加入量無(wú)水乙醇!
1. 組織培養(yǎng)細(xì)胞
a. 收集<107 懸浮細(xì)胞到一個(gè)1.5ml 離心管，對(duì)于貼壁細(xì)胞，孔板培養(yǎng)可以直接裂解，細(xì)胞瓶培養(yǎng)應(yīng)該先用胰蛋白酶消化后吹打下來(lái)收集。
b. 13000rpm 離心10 秒（或者300xg 離心5 分鐘），使細(xì)胞沉淀下來(lái)。完全吸棄上清，留下細(xì)胞團(tuán)，注意不完全棄上清會(huì)稀釋裂解液導(dǎo)致產(chǎn)量純度降低。
c. 輕彈管壁將細(xì)胞沉淀完全松散重懸， 加350μl（ <5×10^6細(xì)胞） 或600μl（5x106-1×10^7細(xì)胞）裂解液RLT Plus，吹打混勻后用手劇烈振蕩20 秒充分裂解。
d. 勻漿：（處理細(xì)胞量少時(shí)<1×10^5一般不需要，渦旋振蕩一分鐘勻漿）。用帶鈍針頭的一次性1 ml(配0.9mm 針頭) 注射器抽打裂解物5-10 次或直到得到滿
意勻漿結(jié)果(或者電動(dòng)勻漿30 秒) ，可以剪切DNA，降低粘稠度防堵塞柱子和提高產(chǎn)量。
e. 將裂解混合物或勻漿混合物全部加到DNA 吸附柱上（吸附柱放在收集管內(nèi)）。
f. 接操作步驟項(xiàng)下3。

2. 動(dòng)物組織（例如鼠肝腦）
a. 電動(dòng)勻漿：新鮮組織用解剖刀迅速切成小碎塊,加入350μl(<20mg 組織)或者600μl(20-30mg 組織)的裂解液RLT Plus 后電動(dòng)徹底勻漿20-40 秒。
b. 液氮研磨+勻漿：在液氮中研磨組織成細(xì)粉后，取適量組織細(xì)粉(20mg/30mg)轉(zhuǎn)入裝有350μl/600μl 組織裂解液RLT Plus 的1.5ml 離心管中， 用手劇烈振蕩20秒，充分裂解。用帶鈍針頭的一次性1 ml(配0.9mm 針頭) 注射器抽打裂解物10次或直到得到滿意勻漿結(jié)果(或者電動(dòng)勻漿30 秒) ，可以剪切DNA，降低粘稠度防堵塞柱子和提高產(chǎn)量。
c. 將勻漿后裂解物13，000rpm 離心3 分鐘,沉淀可能存在的裂解困難的碎片或者不溶物，將裂解物上清全部加到DNA 吸附柱上（吸附柱放在收集管內(nèi)）。
d. 接操作步驟項(xiàng)下3。

3. 13000rpm 離心30 秒，保留濾過(guò)液（miRNA/RNA 在濾過(guò)液中）。DNA 吸附柱子（膜上吸附有基因組DNA）短時(shí)間可存放4℃度備用。確保離心后液體全部濾過(guò)去，膜上沒(méi)有殘留，如有必要，可以加大離心力和離心時(shí)間。

以下步驟為提取RNA 步驟：
4. 用微量移液器較估計(jì)濾過(guò)液體積（350μl 或者600μl 左右，濾過(guò)時(shí)候損失體積應(yīng)該減去），加入1.25 倍體積的無(wú)水乙醇，此時(shí)可能出現(xiàn)沉淀，但是不影響提取過(guò)程，立即吹打混勻，不要離心。
5. 立刻將混合物(每次小于700μl，多可以分兩次加入)加入一個(gè)RNA 吸附柱 中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm 離心30 秒，棄掉廢液。裝濾過(guò)液體和乙醇混合物的DNA 吸附柱的收集管（混合物轉(zhuǎn)入RNA 吸附柱后剩下的空收集管）需要保留，將DNA 吸附柱放回此收集管保留在4℃，備用于步驟11 開(kāi)始的基因組DNA提取。
6. 加700μl Wash Solution 1（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇!），12,000rpm 離心30秒，棄掉廢液。
7. 加入500μl Wash Solution 2/3（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇!），12000rpm 離心30 秒，棄掉廢液。加入500μl Wash Solution 2/3，重復(fù)一遍。
8. 將吸附柱 放回空收集管中，13000rpm 離心2 分鐘，盡量除去漂洗液, 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
9. 取出吸附柱，放入一個(gè)RNase free離心管中，根據(jù)預(yù)期RNA產(chǎn)量在吸附膜的中間部位加30-50μl RNase free water，室溫放置1分鐘，12000rpm離心1分鐘。
10. 如得到的RNA 可以立即用于下游反應(yīng)或者盡快置于低溫保存。

以下步驟為提取DNA 步驟：
11. 在步驟3 的DNA 吸附柱上加入500μl 抑制物去除液IR，12,000rpm 離心30 秒，棄廢液。
12. 加入700μl 漂洗液WB（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇!），12,000rpm 離心30 秒，棄掉廢液。
13. 加入500μl 漂洗液WB，12,000rpm 離心30 秒，棄掉廢液。
14. 將DNA 吸附柱放回空收集管中，13,000rpm 離心2 分鐘，盡量除去漂洗液， 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
15. 取出DNA 吸附柱，放入一個(gè)干凈的離心管中，在吸附膜的中間部位加100μl 洗脫緩沖液EB （洗脫緩沖液事先在65-70℃水浴中預(yù)熱效果更好）， 室溫放置3-5分鐘，12,000rpm 離心1 分鐘。將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，室溫放置2 分鐘，12,000rpm 離心1 分鐘。洗脫體積越大，洗脫效率越高，如果需要DNA 濃度較高，可以適當(dāng)減少洗脫體積， 但是zuì小體積不應(yīng)少于50μl，體積過(guò)小降低DNA 洗脫效率，減少DNA 產(chǎn)量。
16. DNA 可以存放在2-8℃，如果要長(zhǎng)時(shí)間存放，可以放置在－20℃。

本制品別名：RNA/DNA分離提取試劑盒|DNA/RNA分離純化試劑盒|RNA/miRNA/DNA分離提取試劑盒|細(xì)胞DNA/RNA分離提取試劑盒|DNA/RNA分別提取試劑盒|DNA/RNA分開(kāi)提取試劑盒

根據(jù)您的關(guān)注的DNA/RNA/miRNA分離提取試劑盒，RNA/miRNA/DNA分離提取試劑盒，DNA/RNA分別提取試劑盒，DNA/RNA分開(kāi)提取試劑盒，DNA/RNA分離純化試劑盒，RNA/DNA分離提取試劑盒，細(xì)胞DNA/RNA分離提取試劑盒，DNA/RNA/miRNA分離提取試劑盒，ALH069，百奧萊博，，，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：



名稱：非凍型血液RNA保存液
貨號(hào)：BTN111202
規(guī)格：100mL
由于血液富含RNase，因此血液RNA非常容易降解，是臨床分子生物學(xué)研究中的一個(gè)棘手的問(wèn)題。為解決此問(wèn)題，本公司在非凍型組織RNA保存液的基礎(chǔ)上，開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. 能快速滲透到新鮮血液細(xì)胞內(nèi)，抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常溫可放置3天，4℃可放置5天，-20℃可放置3個(gè)月。
2. 操作簡(jiǎn)單，直接將本產(chǎn)品和新鮮血液細(xì)胞沉淀按比例混合即可。
3.適用于人新鮮血和哺乳動(dòng)物新鮮血液，不適用于陳舊血液和凍凝血液，也不適用于禽類血液和其他動(dòng)物血液。
4. 重復(fù)性好，效果跟進(jìn)口同類產(chǎn)品相當(dāng)。
5. 保存的樣品可直接用本公司血液RNA提取試劑盒提取RNA。

儲(chǔ)存條件：室溫運(yùn)輸及保存，有效期兩年。

使用方法：
注意：RNase污染無(wú)處不在，zuì好用本公司的固相RNase清除劑處理RNA工作區(qū)域，千萬(wàn)不要使用烷基化試劑DEPC(相當(dāng)于芥子氣)。

一:以白細(xì)胞為材料的保存方法(此法效果好于全血保存法)
1.室溫1500-2000 g離心新鮮抗凝血液10-15分鐘，zuì上層為血漿，zuì下層為紅細(xì)胞，中間層為膜狀的、含白細(xì)胞的Buffy Coat(含白細(xì)胞多的血液此層可能很厚)。
2. 吸出血漿后，小心將中間的白細(xì)胞層吸出(允許污染部分紅細(xì)胞)到新的離心管中，加入5-10倍體積的本產(chǎn)品，混勻后放常溫(不超過(guò)30℃)保存不超過(guò)3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要現(xiàn)在4℃放置過(guò)夜，然后再離心去除保存液，zuì后再把細(xì)胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃，冰晶會(huì)刺破白細(xì)胞，釋放出其中的RNA，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)去掉上清時(shí)會(huì)丟失)。

二：以EDTA抗凝全血為材料的保存方法
3. 將血液取到EDTA抗凝管中后，迅速將0.5mL血液與1.5mL本產(chǎn)品混合，充分顛倒混勻，然后放常溫(不超過(guò)30℃)保存不超過(guò)3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要現(xiàn)在4℃放置過(guò)夜，然后再離心去除保存液，zuì后再把細(xì)胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃，冰晶會(huì)刺破白細(xì)胞，釋放出其中的RNA，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)去掉上清時(shí)會(huì)丟失)。

三：血液RNA的提取(本產(chǎn)品不含RNA提取試劑。此處以本公司的跟Trizol相當(dāng)?shù)膭?dòng)物RNA提取試劑盒操作步驟為參考。用戶也可以使用其他RNA純化試劑)
4. 提取RNA時(shí)，如果保存的白細(xì)胞在-20℃，則需要先室溫化凍，如果保存在常溫或4℃，則直接使用。
5. 取1.8mL混合液到新的2mL離心管中，5000g室溫離心1分鐘。
6.小心吸棄上清液(本產(chǎn)品)，細(xì)胞將形成沉淀(如果樣品時(shí)全血，沉淀中將含有大量血液蛋白)。注意：上清一般會(huì)很渾濁，一定要盡可能棄盡。有時(shí)沉淀上面有白色晶體出現(xiàn)，屬于正?，F(xiàn)象。
7.在細(xì)胞沉淀中加入動(dòng)物RNA提取試劑盒 1mL溶液A，劇烈震蕩30秒(不能感覺(jué)到震蕩即可，一定要看見(jiàn)管底液體旋轉(zhuǎn)起來(lái)，否則只是液體表面的震動(dòng)，下同)。震蕩后顛倒幾次看溶液是否均勻，如果有顆粒狀物體說(shuō)明還需要震蕩裂解。
8.室溫放置5分鐘以使細(xì)胞充分裂解。
9. 將0.2mL自備的lǜ仿加入到離心管中，劇烈震蕩30秒。
10. 12000～15000g4℃離心3分鐘。一般上清為無(wú)色的水相(含RNA，約0.5-0.9mL)；中間層為白色，含有DNA、蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞破碎物，不要觸及；下層為有機(jī)相，一般呈深紅色。注意：有時(shí)水相比重大于有機(jī)相，出現(xiàn)反相現(xiàn)象，此時(shí)應(yīng)該取下面的水相。
11.小心將水相轉(zhuǎn)移到另一自備的1.5mL塑料離心管中。如果水相超過(guò)0.75mL，則需要分成2管，否則在下步?jīng)]法加入等體積的異丙醇。
12. 加入等體積的異丙醇到水相中，充分顛倒混勻。
13. 12000～15000g4℃離心10分鐘沉淀RNA。
14. 吸棄上清。注意：如果離心后出現(xiàn)兩個(gè)相，則需要吸棄上面的一相，然后在下相(含RNA)中加入一倍體積的超純水和一倍體積的異丙醇，混勻后12000～15000g4℃離心10分鐘沉淀RNA，吸棄上清。
15. 將75% RNase-free乙醇加入到RNA沉淀中，震蕩幾秒后12000～15000g4℃離心1分鐘。
16. 棄上清
17. 12000～15000g4℃離心半分鐘，用移液槍去除殘留的液體。
18. 將20-50μL DEPC處理的水加入到沉淀中并吹打溶解，立即用于下述完整性、產(chǎn)率和純度的檢測(cè)，也可直接用于后續(xù)RT-PCR等試驗(yàn)或存放于-80℃待用。

四: RNA的檢測(cè)(列出步驟僅供參考，本產(chǎn)品不提供相關(guān)產(chǎn)品)
19. RNA完整性的電泳檢測(cè)：強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳，因?yàn)榉亲冃阅z中單鏈RNA分子會(huì)自生折疊成各種形狀，尤其不能使用DNA上樣液，因?yàn)闆](méi)有經(jīng)過(guò)去RNase處理。
20. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測(cè)定：將5-10μl RNA用TE緩沖液(pH8.2)稀釋10倍后檢測(cè)其在OD260的光吸收。通過(guò)光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，進(jìn)而計(jì)算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。人血RNA產(chǎn)率一般為2-5μg/mL。
21. RNA純度測(cè)定：無(wú)污染的總RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān))，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。


關(guān)注DNA/RNA/miRNA分離提取試劑盒，RNA/miRNA/DNA分離提取試劑盒，DNA/RNA分別提取試劑盒，DNA/RNA分開(kāi)提取試劑盒，DNA/RNA分離純化試劑盒，RNA/DNA分離提取試劑盒，細(xì)胞DNA/RNA分離提取試劑盒，DNA/RNA/miRNA分離提取試劑盒，ALH069，百奧萊博，，的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：


BTN3060 非凍型組織RNA保存液 250mL
BTN80929 液體樣品RNA和DNA提取試劑盒 50次
BTN160906 植物RNA提取試劑盒(無(wú)酚無(wú)lǜ仿柱式提取) 50次
BTN130971 柱式病毒RNA-DNA共提試劑盒 50次
BTN131231 Oligo(dT)纖維素 25mg
BTN3110 氧釩核糖核苷復(fù)合物(RVC/VRC) 10mL
BTN3091 液相RNase清除劑 1.5mL
BTN71207 RNA洗脫液 10mL

如果您覺(jué)得“ALH069 DNA/RNA/miRNA分離提”描述資料不夠齊全，請(qǐng)聯(lián)系我們獲取詳細(xì)資料。(聯(lián)系時(shí)請(qǐng)告訴我從給覽網(wǎng)看到的，我們將給您最大優(yōu)惠！)
本頁(yè)鏈接：http://jssdj.com/com_bjbiolab01/sell/itemid-8516857.html
已經(jīng)有1044位訪客查看了本頁(yè).