克拉霉素試劑(81103-11-9)(BR級，98%)由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，僅用于生物化學(xué)研究方面，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價位合理，需要克拉霉素試劑(81103-11-9)(BR級，98%)等抗生素類產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括克拉霉素在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：克拉霉素
英文名稱：Clarithromycin
產(chǎn)品貨號：Y13606
產(chǎn)品規(guī)格：1g|5g|25g|100g

CAS：81103-11-9
分子式：C₃₈H₆₉NO₁₃
分子量：747
介紹：白色結(jié)晶性粉末或無色針狀結(jié)晶，無臭，味苦
熔點：222 225℃
儲存條件：RT
來源：合成
溶解性：較易溶于氯fǎng或丙酮，微溶于乙醇，yǐ醚或甲醇，幾不溶于水

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名稱：羧芐青霉素溶液(500mg/ml)
貨號：RFT175
規(guī)格：5×1ml

名稱：頭孢他啶
貨號：QN0052
規(guī)格：1g
CAS：72558-82-8
分子式：C22H22N6O7S2
分子量：546.58
儲存條件：RT
性狀：無色結(jié)晶或白色粉末。
別名：頭孢噻甲羧肟

名稱：他克莫司
貨號：QN0067
規(guī)格：50mg
CAS：104987-11-3
分子式：C44H69NO12
分子量：804.02
儲存條件：-20℃
純度：≥98%
別名：大環(huán)哌喃;他克莫斯;泰克利馬;富吉霉素;藤毒素

名稱：潮霉素B
貨號：QN0095
規(guī)格：1g
本品由吸水鏈霉菌代謝產(chǎn)生的一種氨基糖苷類抗生素，通過干擾70S核糖體易位和誘導(dǎo)對mRNA模板的錯讀而抑制蛋白合成，從而殺死原核(如細菌)、真核(如酵母菌，真菌)和高等哺乳動物真核細胞。本品是無菌的潮霉素B溶液(100mg/ml)，可直接用培養(yǎng)液稀釋使用。

CAS：31282-04-9
分子式：C20H37N3O13
分子量：527.52
儲存條件：2～8℃
性狀：澄清或輕微渾濁黃色溶液

大腸桿菌( Escherichia coli.)來源的潮霉素抗性基因(hyg或hph)，編碼潮霉素B磷酸轉(zhuǎn)移酶，將潮霉素B轉(zhuǎn)化成不具有生物活性的磷酸化產(chǎn)物，從而起到解毒作用。針對這一原理，潮霉素B是一種非常有用的選擇性標(biāo)記，用來篩選和維持培養(yǎng)成功轉(zhuǎn)染潮霉素抗性基因的原核或者真核細胞。另外，由于作用模式的差異，常與G418，Zeocin? 和Blasticidin S聯(lián)合使用進行雙抗性陽性細胞株的選擇。潮霉素B還能用作抗病毒劑，因其選擇性滲透進入因病毒感染增強通透性的細胞，且具有抑制翻譯的功效。還可混合入動物飼料中起到驅(qū)蟲功能。

使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：潮霉素B用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve)，即劑量反應(yīng)性曲線，來確定zuì佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素zuì低濃度，可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度。
1)天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜;注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2)根據(jù)細胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

終濃度(μg/mL)	培養(yǎng)基體積(ml)	5mg/ml潮霉素B加入體積(ml)
50	9.9	0.1
100	9.8	0.2
250	9.5	0.5
500	9.0	1.0
750	8.5	1.5
1000	8.0	2.0

3)第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4)接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5)按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死大多數(shù)細胞的zuì低濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1)轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷效果zuì好。則當(dāng)細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，zuì好將細胞稀釋至豐度不超過25%。
2)每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3)篩選7天后觀察并評估細胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4)挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5)之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

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貨號	名稱	規(guī)格
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QN0092	硫酸慶大霉素	1g|10g
QN0097	鹽酸阿霉素	25mg
Y13491	地塞米松	1g|5g|25g
Y13493	桿菌肽	1g|5g|25g
Y13499	托普霉素	1g|5g|25g

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