WE0174 植物基因組DNA提取試劑盒

產(chǎn)品簡介
植物基因組DNA提取試劑盒是高品質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品,由北京百奧萊博供應(yīng),本產(chǎn)品用于科研試驗(yàn),植物基因組DNA提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)DNA提取純化之一,質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品,價格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括植物基因組DNA提取試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:植物基因組DNA提取試劑盒
英文名稱:NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號:WE0174
產(chǎn)品規(guī)格:50次|200次
本試劑盒采用、專一結(jié)合核酸的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖系統(tǒng),適合從各種不同的植物新鮮或凍存組織中提取基因組DNA,并可zuì大限度地去除植物組織中的雜質(zhì)。本試劑盒無需使用酚/氯fǎng抽提,操作安全。提取的基因組DNA片段大、純度高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠,適用于PCR、熒光定量PCR、分子標(biāo)記、文庫構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)。
試劑盒組成:
組份 | 50次 | 200次 |
Buffer LP1 | 25ml | 100ml |
Buffer LP2 | 10ml | 40ml |
Buffer LP3(濃縮液) | 21ml | 84ml |
Buffer GW2(濃縮液) | 15ml | 75ml |
Buffer GE | 15ml | 60ml |
RNase A(10 mg/ml) | 300μl | 1.25ml |
吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自備試劑:無水乙醇
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及重要注意事項(xiàng):
1、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量下降。
2、次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在Buffer LP3和Buffer GW2中加入無水乙醇。使用前請檢查Buffer LP1和Buffer LP2是否出現(xiàn)結(jié)晶或者沉淀,如有結(jié)晶或者沉淀,請將Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重新溶解。
操作步驟:
1、取植物新鮮組織100 mg左右或干重組織約20 mg,加入液氮充分研磨。
2、將研磨后的粉末收集到離心管(自備)中,加入400μl Buffer LP1和6μl RNase A(10 mg/ml),渦旋振蕩1分鐘,室溫放置10分鐘,使其充分裂解。
注意:
1)使用渦旋振蕩或移液器吹打,充分裂解組織,組織裂解不完全會影響zuì終的DNA得率。
2)請勿在使用前將Buffer LP1與RNase A混合。
3、加入130μl Buffer LP2,混勻,渦旋震蕩1分鐘。
4、12000rpm(~~13400×g)離心5分鐘,將上清移至新的離心管(自備)中。
5、加入1.5倍體積的Buffer LP3(使用前檢查是否已加入無水乙醇),充分混勻(如500μl濾液加入750μl Buffer LP3)。
注意:加入Buffer LP3后應(yīng)立即混勻,可能會產(chǎn)生沉淀但不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
6、將上步所得溶液和沉淀全部加入到已裝入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次轉(zhuǎn)入。12000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
注意:如吸附膜呈現(xiàn)綠色,向吸附柱中加入500μl無水乙醇,12000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
8、重復(fù)步驟7.
9、12000rpm離心2分鐘,倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數(shù)分鐘,以徹底晾干。
注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除,乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶促反應(yīng)(酶切、PCR 等)。
10、將吸附柱放到一個新離心管(自備)中,向吸附膜的中間部位懸空滴加50-100μl Buffer GE或滅菌水,室溫放置2-5分鐘,12000rpm離心1分鐘,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游實(shí)驗(yàn)對pH值或EDTA敏感,可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對洗脫效率有很大影響,若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調(diào)到此范圍),pH值低于7.0時洗脫效率不高。
2)離心之前室溫孵育5分鐘可以增加產(chǎn)量。
3)如果要提高DNA的終濃度,可以將步驟10所得的DNA洗脫液重新加至吸附膜上,重復(fù)步驟10;若洗脫體積小于100μl,可以增加DNA的終濃度,但可能會減少DNA的總產(chǎn)量。如果所得DNA的量小于1μg,推薦用50μl Buffer GE進(jìn)行洗脫。
4)因?yàn)楸4嬖谒械腄NA會受到酸性水解作用的影響,如需長期保存,推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。
儲存條件:室溫(15~30℃)。
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名稱:紅細(xì)胞裂解液B型(流式細(xì)胞分析用)
貨號:BTN90309
規(guī)格:250mL
本品用于快速裂解哺乳動物全血中的紅細(xì)胞而基本不破壞白細(xì)胞和其他淋巴細(xì)胞的完整性和生物學(xué)活性。由于紅細(xì)胞是血液的主要細(xì)胞成份,不含DNA和RNA,其所含血紅素能抑制PCR反應(yīng),所以先用本產(chǎn)品裂解紅細(xì)胞,再提取基因組DNA或RNA 有助于提高所得樣品純度。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.可以處理人全血、小鼠全血、脾細(xì)胞中的紅細(xì)胞。
2.,一次處理能裂解80%以上的哺乳動物紅細(xì)胞,能回收90%左右的白細(xì)胞。一般樣品zuì多只需要處理兩次。
3.擴(kuò)容性好,可以一次處理多達(dá)幾十毫升的樣品,也可以處理100μL的血液。
4.基于NH4Cl 裂解法,得到的白細(xì)胞主要用于流式細(xì)胞分析。
儲存條件:常溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
用去離子水將本產(chǎn)品(10×)稀釋為1×工作液(1mL 本產(chǎn)品加9mL去離子水),待溫度回到室溫或37℃加熱到37℃的時候再使用。工作液不能長期放置,只能現(xiàn)配現(xiàn)用。
一.裂解哺乳動物全血中的紅細(xì)胞
1.離心哺乳動物抗凝血液后棄血漿部分,按每1mL 哺乳動物抗凝血液細(xì)胞沉淀加10mL 1×工作液的比例加入紅細(xì)胞裂解液B型的1×工作液。
2. 輕柔吹打充分混勻。
3.室溫放置 15分鐘(注意:放置時間不要超過15分鐘)。
4. 4℃1000rpm離心10分鐘,吸棄紅色的上清液。
5. 如果紅細(xì)胞裂解不完全,可以重復(fù)第 1-4 步。
6. 用適當(dāng)?shù)淖詡渚彌_液(如Hanks溶液)重懸白細(xì)胞沉淀。
7. 用于細(xì)胞計(jì)數(shù)和流式細(xì)胞分析等后續(xù)試驗(yàn)。
二.裂解組織細(xì)胞中的紅細(xì)胞
1. 按標(biāo)準(zhǔn)方法用自備的胰酶將組織消化成單個細(xì)胞懸液,離心棄上清。
2. 按 1:10的比例向細(xì)胞沉淀中加入紅細(xì)胞裂解液B型工作液,輕柔吹打均勻。
3.室溫放置 15分鐘(注意:放置時間不要超過15分鐘)。
4. 4℃ 1000rpm離心10分鐘,吸棄紅色的上清液。
5. 如果紅細(xì)胞裂解不完全,可以重復(fù)第 2-4 步。
6. 用適當(dāng)?shù)淖詡渚彌_液(如 Hanks溶液)重懸白細(xì)胞沉淀。
7. 用于細(xì)胞計(jì)數(shù)和流式細(xì)胞分析等后續(xù)試驗(yàn)。

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