組織樣本細胞核/胞漿分離試劑盒可以從各種動物實體組織如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等組織樣本中分離細胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個系統(tǒng)，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。...

組織胞漿/胞核分離試劑盒

 

產(chǎn)品編號：HR0243

產(chǎn)品組成：

組織胞漿/胞核分離試劑盒儲存條件：

試劑A和B 2-8℃保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存，有效期1年。

【注】：

● 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。

● 蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

產(chǎn)品簡介：

組織樣本細胞核/胞漿分離試劑盒可以從各種動物實體組織如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等組織樣本中分離細胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個系統(tǒng)，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。

本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能，適合下游分析如轉(zhuǎn)錄活性，RNA拼接，gel-shift分析，報告分析，酶活性分析和WB等。

本試劑盒提取得到的為完整結(jié)構的細胞核，需要提取得到核蛋白請選擇其他貨號的試劑盒。

試劑盒以外自備試劑和儀器：

● 勻漿機/勻漿器 ● 移液器 ● 離心機 ● 渦旋混勻器 ● 振蕩器 ● PBS ● 蛋白定量試劑盒

組織胞漿/胞核分離試劑盒注意事項：

● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。

● 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。

● 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。

● 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

使用方法：

1、取50mg-100mg組織樣本，用PBS洗干凈，用手術剪刀盡可能剪碎，加入500μL冷的試劑A，用組織勻漿機/勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。

【注】：

● 也可以用液氮研磨后加入500μL試劑A。

2、將勻漿液置2-8℃條件下振蕩20-30分鐘。

【注】：

● 用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速，保持液體有輕微晃動即可。

● 沒有振蕩條件的話，也可冰上靜置，稍微延長處理時間，中間每隔5分鐘渦旋振蕩或移液器吹打混勻。

● 組織樣本量根據(jù)實驗情況調(diào)整，每次的提取液用量并不是一定的，大約為組織體積的5-10倍即可，請根據(jù)實際情況調(diào)整。

● 可以根據(jù)自己實驗需要在每500μL提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑。

3、在4℃，1200×g條件下離心5分鐘。

4、將上清吸入另一預冷的干凈離心管，即得到胞漿組分，請置冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?

5、沉淀用PBS洗滌一次，在4℃，2000×g條件下離心15分鐘，棄上清。

6、沉淀為細胞核組分，將沉淀直接用于下游實驗或用200μL保存液B重懸后保存?zhèn)溆谩?br />

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