HR0241 細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒
- 產(chǎn)品/服務(wù)：HR0241 細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒
- 型 號：HR0241
- 品 牌：百奧萊博
- 單 價(jià)：面議
- 更新日期：2023-08-24
- 有效期至：長期有效
- 瀏覽次數(shù)：984
細(xì)胞核/胞漿分離試劑盒可以從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分離細(xì)胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個(gè)系統(tǒng)，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能，適合下游分析如轉(zhuǎn)錄活性，RNA拼接，gel－shift分析，報(bào)告分析，酶活性分析和...
細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒
產(chǎn)品編號：HR0241
產(chǎn)品組成：
|
組份 |
50T |
100T |
|
組分A：提取液A |
20mL |
40mL |
|
組分B：核保存液B |
10mL |
20mL |
|
組分C：蛋白酶抑制劑混合物 |
100μL |
200μL |
細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒保存條件：
提取液、核保存液2-8℃保存；蛋白酶抑制劑-20℃保存。有效期1年。
【注】：
● 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
● 蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
● 試劑拆封后請盡快使用完。
產(chǎn)品說明：
細(xì)胞核/胞漿分離試劑盒可以從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分離細(xì)胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個(gè)系統(tǒng)，維持核和胞漿組分是分開和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿，而幾乎沒有交叉污染。
本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能，適合下游分析如轉(zhuǎn)錄活性，RNA拼接，gel－shift分析，報(bào)告分析，酶活性分析和WB等。
試劑盒以外自備試劑和儀器：
● 離心機(jī) ● 振蕩器 ● 渦旋混勻器 ● PBS ● 蛋白定量試劑盒
使用注意事項(xiàng)：
● 預(yù)實(shí)驗(yàn)很重要。必須要做預(yù)實(shí)驗(yàn)，在正式實(shí)驗(yàn)之前取少量樣本優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，并像正式樣本一樣認(rèn)真進(jìn)行，看實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否可行，實(shí)驗(yàn)條件是否適合自己的樣本。由于生物樣本的多樣性，不同贗本的實(shí)驗(yàn)條件通常差異較大，同種細(xì)胞的不同模型下需要的實(shí)驗(yàn)條件也可能不同，為了避免浪費(fèi)正式樣本和試劑，一定要提前預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。
● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。
● 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。
● 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
● 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒使用方法：
1、取5-10×106個(gè)細(xì)胞，在4℃，500×g條件下離心3分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞。
2、用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
【注】：
● 在4℃，500×g條件下離心5分鐘。
3、在細(xì)胞沉淀中加入400μL冷的提取液A，渦旋振蕩混勻或吹打混勻，置冰上振蕩20-30分鐘。
● 使用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速，提取液能輕微晃動(dòng)即可。
● 如果沒有振蕩條件，也可冰上靜置，稍微延長處理時(shí)間，中間每隔5分鐘渦旋振蕩或移液器吹打混勻。
● 細(xì)胞數(shù)量根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況調(diào)整，每次的提取液用量并不是一定的，大約為細(xì)胞體積的5-10倍即可，請根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。
● 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要在每400μL提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑。
4、在4℃，1200×g條件下離心5分鐘。
5、將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，即得到胞漿組分，請置冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。
6、沉淀用PBS重懸，然后在4℃，2000×g 條件下離心5分鐘，棄上清。
7、沉淀為細(xì)胞核組分，將沉淀用200μL保存液B 重懸后保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。
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