QN1064 RNase H

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特別提示:包括RNase H在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:RNase H
英文名稱:Ribo
產(chǎn)品貨號(hào):QN1064
產(chǎn)品規(guī)格:600U
RNase H是特異性分解RNA-DNA雜交體中的RNA鏈的核糖核酸內(nèi)切酶,分子量為21,000,zuì適pH約為8.0?;钚砸蜃訛镸g2+或Mn2+。
起源:Escherichia coli HB101 co
活性定義:以poly(rA)·poly(dT)為底物,在30℃、pH7.7的條件下,20分鐘內(nèi)產(chǎn)生1 nmol酸可溶性物質(zhì)所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位 (U)。
純度:1.50 U的本酶和1 μg的λ DNA-Hind III分解物在37℃下反應(yīng)16小時(shí),DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。 2.50 U的本酶和1 μg的超螺旋pBR322 DNA 在37℃下反應(yīng)1小時(shí),DNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。 3.50 U的本酶和1 μg的16S,23S rRNA在37℃下反應(yīng)1小時(shí),RNA的電泳譜帶不發(fā)生變化。
用途:
1.通過Okayama-Berg法進(jìn)行cDNA Cloning。
2.DNA-RNA雜交體的檢定。
3.在Oligo (dT) 存在下除去mRNA的Poly (A) 末端。
使用注意:本酶由大腸桿菌重組體精制而成,雜質(zhì)很少,是純度很高的制品。因此,即便是高濃度制品,大量使用也完全沒有問題。
儲(chǔ)存條件:-20℃
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名稱:平末端DNA加T試劑盒
貨號(hào):BTN60106
規(guī)格:50次
本產(chǎn)品利用Taq DNA polymerase的不依賴于模板的末端轉(zhuǎn)移酶活性,在只有dTTP存在的情況下,在平末端的DNA片段加上一個(gè)dT尾巴,主要用于制備T載體。其流程圖如下:

產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 簡(jiǎn)單,2X Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要單獨(dú)準(zhǔn)備。
2.適用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA成本polymerase等酶合成的DNA片段。
3. 加T后的載體可以作為T載體使用。
產(chǎn)品組成:
成分 | 規(guī)格 |
Taq DNA olymerase(5U/μL) | 50μl |
2×dT Tailing Buffer | 1.25ml |
說明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:反應(yīng)前純化處理:
平末端DNA片段或平末端質(zhì)粒DNA可以采取膠回收和酚/氯fǎng抽提法等常規(guī)方法純化,zuì后溶解在水或TE中,終濃度以0.1μg/μL為宜。必須注意的是,用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3到5外切活性的DNA聚合酶擴(kuò)增得到的DNA片段,必須經(jīng)過徹底的去除殘留的酶的處理過程(如酚/氯fǎng抽提或Proteinase K處理),否則它們將在加T反應(yīng)時(shí),切除掉加上的T尾巴,干擾反應(yīng)。
二:加T反應(yīng)
在干凈的0.5mL或1.5mL離心管中,分別加入下列成分:
回收的DNA片段 | 0.2-2μg |
2×dT Tailing Buffer | 25μL |
Taq DNA polymerase(5U/μL) | 1μL |
補(bǔ)水到 | 50μL |
72℃保溫2小時(shí) |
三:反應(yīng)后處理
加T反應(yīng)后,Taq DNA polymerase將與DNA末端緊密結(jié)合,所以必須酚/氯fǎng抽提去除。如果使用Proteinase K處理后再用酚/氯fǎng抽提效果會(huì)更好。得到的DNA溶于適量水和TE中后即可用于后續(xù)連接反應(yīng)。
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