Klenow片段的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的工具酶產(chǎn)品，本制品僅用于生物化學(xué)研究方面，我公司專注于工具酶產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的Klenow片段質(zhì)量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括Klenow片段(3′→5′exo-)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：Klenow片段(3′→5′exo-)
英文名稱：Klenow Fragment(3′→ 5′exo-)
產(chǎn)品貨號：BTN131235
產(chǎn)品規(guī)格：200U

Klenow片段是大腸桿菌DNA聚合酶I的蛋白水解產(chǎn)物。它保留了DNA聚合酶活性，具有3′→5′外切酶活性，但不具有5′→3′外切核酸酶活性?？梢栽贒NA模板和引物存在的條件下，選擇性地催化底物dNTP沿5′→3′方向合成與模板互補的DNA。本產(chǎn)品是重組表達(dá)得到。

產(chǎn)品用途：
1．雙鏈DNA 5′突出末端的平滑化。
2．用隨機引物制備探針。
3．隨機引物標(biāo)記法。
4．寡核苷酸定向誘變中雙鏈DNA的合成。
5．雙脫氧法DNA序列測定(Sanger法)。

產(chǎn)品組成：

成分	規(guī)格
Klenow片段(5U/μL)	20μl
10×Klenow Fragment Buffer	1ml
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

活性定義：以合成的Poly d(A-T)DNA為模板/引物，在37℃、pH7.4的條件下，30分鐘內(nèi)使10nmol的全核苷酸摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定義為1個活性單位。

使用舉例：(隨機引物的同位素標(biāo)記反應(yīng))
1．在微量離心管中配制下列反應(yīng)液

成份	用量
模板DNA	25ng
隨機引物(6-9mer)(1nmol/μl)	2μL
補超純水到	14μL

2．95℃保溫3分鐘。然后冰中急冷5分鐘。
3．加入2.5μl 10×Klenow Fragment Buffer。
4．加入2.5μl dNTP(0.2mM dATP,dGTP,dTTP)。
5．加入5μl 111TBq/mmol[α-32P].dCTP(3000 Ci/mmol)(1.85 MBq，50μCi)
6．加入1μl本產(chǎn)品，反應(yīng)液共25μl。
7．37℃反應(yīng)3小時。
8．65℃加熱5分鐘。
 反應(yīng)液可直接作為探針使用。如有必要，可以通過用我司柱式探針純化試劑盒除去未反應(yīng)的標(biāo)記的dCTP。

注意事項：
1．本酶有高度穩(wěn)定性，稀釋時不失活，但劇烈攪拌會失活。
2．由于不含有 5′→3′的外切核酸酶活性，因此沒有切口平移活性。
3．可用于雙鏈DNA末端以及缺口的修復(fù)。
4．與T4 DNA Polymerase相比，對模板結(jié)構(gòu)的抵抗性能較好。
5．由于對DNA的親和性較強，過量使用易發(fā)生凝集作用從而抑制反應(yīng)進(jìn)行。
6．若用于5′突出末端的修飾時，補平后有時會多加一個堿基。
7．與DNA Polymerase I相同，ddNTPs的摻入不受底物抑制。

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貨號	名稱	規(guī)格
BTN131235	Klenow片段(3′→5′exo-)	200U
SV0027	AgeI限制性內(nèi)切酶	1,500U|300U|150U
SV0193	BsmBI限制性內(nèi)切酶	1KU|200U
SV0287	Cac8I限制性內(nèi)切酶	500U|100U
SV0561	NruI限制性內(nèi)切酶	5KU|5KU|1KU|1KU|500U
SV0593	PluTI限制性內(nèi)切酶	2500U|500U
SV0801	Nt.AlwI切刻內(nèi)切酶	2500U|500U

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SV0116 BclI限制性內(nèi)切酶 15KU|3KU|1500U
SV0163 BsaI-HF限制性內(nèi)切酶 5KU|1KU|500U
SV0242 BssSαI限制性內(nèi)切酶 1KU|200U
SV0445 KasI限制性內(nèi)切酶 1250U|250U
SV0543 NheI-HF RE-Mix限制性內(nèi)切酶 50次
SV0550 NmeAIII限制性內(nèi)切酶 1250U|250U
SV0630 PvuII限制性內(nèi)切酶 25KU|25KU|5KU|5KU|2500U
SV0656 SalI限制性內(nèi)切酶 10KU|10KU|2KU|2KU|1KU

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