十二烷基苯磺酸由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研試驗(yàn)，我公司專注于蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的十二烷基苯磺酸質(zhì)量可靠，批間差小，且價(jià)格公道，熱切盼望您選購(gòu)我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括十二烷基苯磺酸在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：十二烷基苯磺酸
英文名稱：Dodecylbenzenesulfonic Acid(soft type)(mixture)
產(chǎn)品貨號(hào)：L10295
產(chǎn)品規(guī)格：100g|500g|2.5kg

屬性

CAS號(hào)	27176-87-0
分子式	C18H30SO3
分子量	326.49
沸點(diǎn)	82℃
折光率	1.479
密度	0.9920

描述

產(chǎn)品介紹	該產(chǎn)品為有機(jī)弱酸，溶于水，用水稀釋產(chǎn)生熱。
別名	十二烷基苯磺酸;直鏈烷基苯磺酸;Alkylarylsulfonic AcidAlkylbenzenesulfonic AcidLaurylbenzenesulfonic Acid

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN131071	牛血清γ球蛋白標(biāo)準(zhǔn)品(2mg/mL)	1mL
YT053	非變性PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)	2ml
YT620	SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)	2ml|15ml
WE0297	一步法快速WB試劑盒(鼠源一抗)	50次
SNM388	RIPA裂解液(中強(qiáng)度)	100ml
SNM391	蛋白酶抑制劑混合物(100×)	1ml
SNM412	一步法植物活性蛋白提取試劑盒	20T

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名稱：包涵體微量純化試劑盒
貨號(hào)：BTN90508
規(guī)格：20次
包涵體是指超表達(dá)的蛋白在細(xì)胞胞漿內(nèi)(如果超表達(dá)的是胞漿蛋白)或膜間內(nèi)(如果超表達(dá)的是分泌蛋白)凝集形成的無活性的固體顆粒。包涵體形成的主要原因是在重組蛋白的表達(dá)過程中缺乏某些蛋白折疊輔助因子，或環(huán)境不適導(dǎo)致無法形成正確的蛋白質(zhì)次級(jí)鍵。由于包涵體主要由超表達(dá)的重組蛋白質(zhì)組成，因此分離純化包涵體是分離純化具有活性的重組蛋白的步。本產(chǎn)品就是用于快速的提取高質(zhì)量的包涵體。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1．操作簡(jiǎn)單快速，整個(gè)過程只要三十分鐘左右。
2．微量純化，可以在1.5mL離心管中完成。
3．能有效去除包涵體中的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜等非重組蛋白成份，使重組蛋白所占比重達(dá)到60%以上。
4．A型用于超聲法裂菌，B型用于酶法裂菌。
5．可以選擇鹽酸胍和尿素兩種蛋白溶解方式。
6．得到的包涵體溶解液可以用于重折疊、SDS-PAGE或其他純化處理。

試劑盒組成：

成分	20T(A型)	20T(B型)
溶液A	5ml	5ml
溶液B	50ml	50ml
包涵體溶解液	5ml	5ml
尿素	5g	5g
溶菌酶	無	600mg
Benzonase(1U/μL)	無	20μl

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸和保存(B型的溶菌酶和Benzonase 需要低溫運(yùn)輸，-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一、超聲法裂菌(只適用于A型)
1．在蛋白誘導(dǎo)期結(jié)束時(shí)，轉(zhuǎn)移1.5mL菌液到一個(gè)干凈的塑料離心管中。zuì好同時(shí)處理不加誘導(dǎo)物的細(xì)菌做對(duì)照樣。
2．12000rpm室溫離心1分鐘，小心棄上清。沉淀(約10mg)放冰上待用或放-80℃保存。
3．加入250μL 冰浴的溶液A，冰上超聲裂解菌體直到在顯微鏡下看見大多數(shù)細(xì)胞破裂。超聲參數(shù)需根據(jù)儀器型號(hào)自行摸索，但裂解物必須不粘稠，否則不容易沉淀包涵體。
4．直接進(jìn)入第14步。

二、酶法裂菌(只適用于B型)
5．將600mg 溶菌酶全部加入到5mL溶液A中溶解，然后根據(jù)每次的需要量(一次微量提取需要250μl)分成小份放-20℃待用。每次只取用一管。
6．包涵體中的重組蛋白一般比溶解狀態(tài)中的蛋白質(zhì)更能夠抵抗微量?jī)?nèi)源性蛋白水解酶的降解，如果實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)得到的重組蛋白確有降解，則需要在溶液A中新鮮加入自備的蛋白酶抑制劑混合物(BTN80808)。
7．在蛋白誘導(dǎo)期結(jié)束時(shí)，轉(zhuǎn)移1.5mL菌液到一個(gè)干凈的塑料離心管中。zuì好同時(shí)處理不加誘導(dǎo)物的細(xì)菌做對(duì)照樣。
8．12000rpm室溫離心1分鐘，小心棄上清。
9．加入250μL含溶菌酶的溶液A重懸細(xì)胞。
10．室溫放置10-20分鐘裂解細(xì)菌，其間可以用手輕彈離心管混勻。
11．-20℃冷凍至凝固，一定要凝固到細(xì)菌溶液變成固體為止。
12．室溫水浴解凍。如果裂解充分，細(xì)菌釋放出的DNA 將使裂解物十分粘稠。如果不粘稠，說明裂解不充分，需要重復(fù)凍融步，否則完整細(xì)菌將和包涵體一起沉淀，影響包涵體的純度。zuì好在顯微鏡下檢查細(xì)菌是否充分裂解。
13．加入1μL Benzonase(1U/μL)，脫色搖床上搖晃直到裂解液不再粘稠，一般需要30分鐘左右，否則還需要延長(zhǎng)保溫時(shí)間。
14．12000rpm 4℃離心5分鐘，留存上清作為SDS-PAGE 對(duì)照樣品一。
15．將沉淀(包涵體)懸浮在1mL的溶液B中，輕柔混勻后室溫放置5分鐘。
16．12000rpm 4℃離心10分鐘，留存上清作包涵體洗滌的對(duì)照樣品二。
17．將沉淀(包涵體)懸浮在1mL的溶液B中，輕柔混勻后室溫放置5分鐘。
18．12000rpm 4℃離心10分鐘，留存上清作包涵體洗滌的對(duì)照樣品三。本產(chǎn)品提供的溶液B足夠兩次洗滌(兩次洗滌一般可得到足夠純凈的包涵體)。如果需要更多洗滌，用戶需要單獨(dú)購(gòu)買包涵體洗滌液(溶液B)
19．沉淀為純化的包涵體，可以長(zhǎng)期放置在冰箱待用或直接用于包涵體溶解。

三、包涵體的溶解：
20.在包涵體沉淀中加入250μL包涵體溶解液，用槍頭充分吹打后漩渦震蕩室溫放置1小時(shí)使蛋白質(zhì)充分溶解。注意：包涵體溶解液含6M 鹽酸胍，溶解蛋白能力強(qiáng)于含8M尿素的溶解液，但SDS-PAGE時(shí)不能直接上樣?？蛻粢部梢杂帽驹噭┖刑峁┑哪蛩馗煞圩耘?-10 M 尿素的溶液(尿素溶液不穩(wěn)定，所以不能長(zhǎng)期放置)溶解包涵體，得到的溶解液可以直接用于SDS-PAGE或后續(xù)純化。但其溶解能力弱于鹽酸胍。
21. 20000g 4℃離心20分鐘，小心收集上清，保留不溶性沉淀(未能溶解的包涵體)。SDS-PAGE 檢查是否大部分重組蛋白都在上清中。如果沒有，說明包涵體沒有完全溶解，需要用適當(dāng)增加包涵體溶解液的用量。
22. 所得蛋白質(zhì)溶液可以用于復(fù)性等試驗(yàn)。用戶可本公司購(gòu)買包涵體復(fù)性套裝。

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