ALH284 2.5mM dNTP混合溶液

產(chǎn)品簡介
2.5mM dNTP混合溶液是高品質(zhì)的核酸擴(kuò)增(PCR)產(chǎn)品,由北京百奧萊博供應(yīng),本產(chǎn)品用于科學(xué)研究,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價(jià)格,深為用戶稱道,了解更多2.5mM dNTP混合溶液等核酸擴(kuò)增(PCR)產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括2.5mM dNTP混合溶液在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:2.5mM dNTP混合溶液
英文名稱:2.5mM dNTPs Solution
產(chǎn)品貨號:ALH284
產(chǎn)品規(guī)格:1ml|5ml
本品是dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩爾混合液,濃度為2.5mM,PCR反應(yīng)時(shí),不用稀釋可直接使用,PCR反應(yīng)時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)使用量為每50μl反應(yīng)液使用4μl(終濃度200μM)
儲存條件:-20℃。
本制品別名:2.5mM dNTP mix
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名稱:dNTP溶液(10mM)
貨號:BTN51208B
規(guī)格:0.5mL
本產(chǎn)品是dATP、dTTP、dGTP、dCTP四種核苷酸的混合液,每種核苷酸的濃度為10mM,純度在98%以上(HPLC檢測),不含DNA內(nèi)切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA測序、DNA探針標(biāo)記等反應(yīng)。使用濃度根據(jù)具體的反應(yīng)決定,請參考相關(guān)手冊。

儲存條件:低溫運(yùn)輸和-20℃保存、有效期一年。
DNA為何使用2"-脫氧核糖和胸腺嘧啶?
DNA為何不選擇現(xiàn)成的光合作用產(chǎn)物核糖和合成RNA的原料尿嘧啶(uracil)分別作為其糖分子和堿基,而去選擇需要額外的合成步驟才能得到的2"-脫氧核糖和胸腺嘧啶(thymine),其原因何在呢?目前的主流觀點(diǎn)是:DNA不能選擇核糖的原因之一是由于核糖2"位置上的OH基團(tuán)會(huì)使得到的雙螺旋骨架結(jié)構(gòu)不均勻、不平行,難以有效地折疊進(jìn)染色體結(jié)構(gòu)中,而使用2"-脫氧核糖則能得到均勻平行的雙螺旋結(jié)構(gòu);原因之二是核糖2"位置上的OH基團(tuán)會(huì)對鄰近的磷酸二酯鍵進(jìn)行分子內(nèi)親核攻擊,降低分子的穩(wěn)定性,而對遺傳物質(zhì)來說穩(wěn)定性十分重要,所以DNA選擇了失去分子內(nèi)親核攻擊能力的2"-脫氧核糖。對信使分子而言,穩(wěn)定性并不重要,所以RNA仍然使用核糖。
DNA使用胸腺嘧啶的原因是DNA中的胞嘧啶(cytosine)會(huì)緩慢水解變成尿嘧啶,如果尿嘧啶也是DNA的正常組成成份,則DNA修復(fù)系統(tǒng)就不能區(qū)分哪些尿嘧啶是正常的,哪些是需要修復(fù)的。使用胸腺嘧啶(比尿嘧啶分子多一個(gè)甲基)不但能保持跟尿嘧啶一樣的形成堿基對的能力,同時(shí)又能跟尿嘧啶區(qū)別開來,使DNA分子中出現(xiàn)的任何尿嘧啶都能被尿嘧啶DNA糖苷酶(uracil-DNA glycosylase)發(fā)現(xiàn)和修復(fù)。
名稱:PCR級綠如藍(lán)DNA染料
貨號:BTN70909
規(guī)格:0.1mL
第二代的非飽和型熒光染料(如SYBR Green I)在高濃度下會(huì)抑制熒光PCR,所以反應(yīng)重復(fù)性很不穩(wěn)定,并且不能用于要求嚴(yán)格的Tm分析。本產(chǎn)品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一樣,是第三代飽和型熒光染料,在飽和濃度下也不抑制熒光PCR反應(yīng)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 飽和濃度不抑制PCR反應(yīng),因此得到的熒光信號更強(qiáng)。
2. 抗水解、抗熱解和抗光解的能力強(qiáng)于目前zuì常用的SYBR Green I。
3. 飽和濃度下染料分子沒有機(jī)會(huì)在DNA分子間發(fā)生移位,因此熒光強(qiáng)度跟DNA變性程度呈線性關(guān)系,可以用于精細(xì)的Tm 測定實(shí)驗(yàn),如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 儀器(包括iCycler、LightCycler、ABI 測序儀)兼容。激發(fā)和發(fā)射光譜跟FAM和SYBR Green I 接近,可以使用SYBR Green I的光學(xué)設(shè)置參數(shù)。
5. 不能滲透進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),毒性和致突變性遠(yuǎn)低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲線分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛細(xì)管電泳等研究。
儲存條件:常溫運(yùn)輸、-20℃避光保存,有效期一年。
使用方法:
先將本產(chǎn)品放置在室溫融化,然后震蕩10秒鐘,短暫離心后待用。下面以50μL的標(biāo)準(zhǔn)PCR反應(yīng)體系為例說明其使用:
1.在一干凈的PCR 管中,加入下列成分:
試劑 | 加入量 |
10×PCR Buffer(No Mg2+) | 5μl |
MgCl2 50mM | 2.5μl |
dNTP 10mM | 1μl |
本產(chǎn)品(PCR級綠如藍(lán)染料) | 2.5μl |
Taq DNA聚合酶 | 1-5U |
DNA模板 | 適量 |
PCR引物 | 5-50 pmol each |
補(bǔ)水到 | 50μl |
2. 放入熒光PCR 儀中進(jìn)行qPCR,并在退火或延長反應(yīng)時(shí)記錄熒光信號。使用的光學(xué)參數(shù)可以跟FAM或SYBR Green I 完全一樣。
注意事項(xiàng):
1. 如果使用iCycler,可以不加FAM;如果使用ABI系統(tǒng),需要在Well Inspector選項(xiàng)下的非特異參照中選擇“無”;使用LightCycler時(shí),zuì好在PCR 體系中再加入終濃度為0.5mg/mL的BSA以降低儀器對染料和模板的非特異吸附。
2. 如果使用化學(xué)修飾過的Taq DNA聚合酶,可能需要減低KCl的濃度并提高Tris的濃度。
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