大腸桿菌Rosetta由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研試驗，我公司專注于克隆與表達產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng)，為您提供的大腸桿菌Rosetta質(zhì)量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產(chǎn)品。...

特別提示：包括大腸桿菌Rosetta(DE3)化學(xué)感受態(tài)細胞在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：大腸桿菌Rosetta(DE3)化學(xué)感受態(tài)細胞
英文名稱：E.coli Rosetta(DE3) Chemical Competent Cell
產(chǎn)品貨號：BTN121004
產(chǎn)品規(guī)格：0.1mL*10

 本產(chǎn)品是采用大腸桿菌Rosetta(DE3)菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于DNA的化學(xué)轉(zhuǎn)化。使用pUC19質(zhì)粒檢測本產(chǎn)品，轉(zhuǎn)化效率可達107。本感受態(tài)細胞適用于真核蛋白表達，具有氯霉素抗性。

菌株基因型：F-ompT hsdSB(rB- mB-)gal dcm lacY1(DE3)pRARE(argU，argW,ileX，glyT，leuW，proL)(CmR)

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養(yǎng)基等。

使用方法：
1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100μL，根據(jù)實際情況分裝使用。
以下實驗以50μL感受態(tài)細胞為例。
2. 待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。

注意事項：
1. 涂布用量可根據(jù)具體實驗調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計的克隆數(shù)較少，可通過離心(4,000rpm，2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2. 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。

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貨號	名稱	規(guī)格
BTN130803	pression/BTN130803.html" target="_blank">單細胞裂解液(DNA提取)	1mL
BTN140430	pression/BTN140430.html" target="_blank">大腸桿菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化學(xué)感受態(tài)細胞	0.1mL*10
BTN121004	pression/BTN121004.html" target="_blank">大腸桿菌Rosetta(DE3)化學(xué)感受態(tài)細胞	0.1mL*10
BTN130560	pression/BTN130560.html" target="_blank">大腸桿菌Rosetta-gami (DE3)pLys化學(xué)感受態(tài)細胞	0.1mL*10
BTN140390	pression/BTN140390.html" target="_blank">釀酒酵母Y2HGold化學(xué)感受態(tài)細胞	10×100μL
BTN60210	pression/BTN60210.html" target="_blank">硫酸鏈霉素溶液	10mL

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名稱：λDNA(不含N6-甲基腺嘌呤)
貨號：BTN90407B
規(guī)格：5μg
本產(chǎn)品Lambda DNA(λDNA)為λ噬菌體中的DNA，是一種常見的DNA底物，分子量為31.5×106Da/48502bp，濃度為200～500μg/ml。A型為普通Lambda DNA。B型為不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型為非甲基化的cl857 Sam7 λDNA，是從感染的大腸桿菌GM119菌株中分離得到的。該菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作為對DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。

儲存溶液：Tris-HCl(pH8.0)10mM；EDTA 1mM

儲存條件：低溫運輸、-20℃保存、有效期一年。

純度：
1. OD260nm/280nm＞1.8。
2. 瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)清晰單一條帶。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保溫16小時后，瓊脂糖凝膠電泳時出現(xiàn)清晰單一條帶。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃，2小時)后，在瓊脂糖凝膠電泳時出現(xiàn)8條清晰的DNA電泳帶。

名稱：大腸桿菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化學(xué)感受態(tài)細胞
貨號：BTN140378
規(guī)格：10*100μl
本產(chǎn)品來源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，從而減少對重組蛋白的降解，補充大腸桿菌缺乏的4 種稀有密碼子(AGA、AUA、CCC、CUA)對應(yīng)的tRNA(argU、ileY、proL、leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系統(tǒng)中的表達水平。該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3 區(qū)(DE3 區(qū)含有T7 噬菌體RNA聚合酶)，可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達，同時具有四環(huán)素，氯霉素，鏈霉素，壯觀霉素抗性。本產(chǎn)品由特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率高達108cfu/μg。
菌株基因型為：F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養(yǎng)基等

使用方法：
1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100μl，可以根據(jù)實際情況分裝使用。
以下實驗以100μl感受態(tài)細胞為例。
2. 待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊90秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含有相應(yīng)抗生素的LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。

注意事項：
1、涂布用量可根據(jù)具體實驗調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多，可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板；若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計的克隆數(shù)較少，可通過離心(4,000rpm ，2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2、新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
4. 誘導(dǎo)時，IPTG濃度可選(0.1-2mM 均可)。
5. 為獲得需要量的蛋白，zuì佳誘導(dǎo)時間，溫度，IPTG濃度需實驗者優(yōu)化。

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