高通量96孔板DNA產(chǎn)物純化回收由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務支持，本品用于科研目的，我公司的高通量96孔板DNA產(chǎn)物純化回收品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括高通量96孔板DNA產(chǎn)物純化回收試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：高通量96孔板DNA產(chǎn)物純化回收試劑盒
英文名稱：96wells DNA Product Purification and Recovery Kit
產(chǎn)品貨號：WH0157
產(chǎn)品規(guī)格：4×96孔|24×96孔板

本試劑盒通過96孔吸附板特異性地結(jié)合酶切、PCR、測序等反應溶液中的DNA片段，可除去蛋白質(zhì)、有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。純化的DNA可適用于限制性酶切、測序、文庫篩選，連接和轉(zhuǎn)化等分子生物學實驗。

產(chǎn)品特點：
·回收100bp-10kb DNA片段，回收率可達80%以上。
·每孔zuì多可吸附的DNA量為5μg。
·純度高：可直接用于下游實驗。

提取流程：


提取實例：

使用本試劑盒純化900bp，3500bp，4500bp片段。50μl洗脫，3μl上樣，瓊脂糖凝膠濃度為1%，6V/cm電泳20min，1、2、3為本試劑盒純化，4是使用某進口品牌試劑盒純化。

組分	4板	24板
平衡液BL	240ml	3×500ml
結(jié)合液PB	240ml	3×500ml
漂洗液PW	3×50ml	2×500ml
洗脫緩沖液TB	60ml	240ml
半裙邊96孔吸附板CB2	4板	24板
96孔深孔板	8板	48板
250ml試劑瓶	-	1個
封口膜	4張	24張

儲存條件：室溫（15-25℃)干燥條件下，可保存12個月，更長時間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前應將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時間，必要時可在37℃水浴中預熱10min，以溶解沉淀。

注意事項：請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。
1．本試劑盒適用于無選擇性的回收溶液中所有DNA片段（可去除30 bp以下的小片段），如需選擇性回收特定片段，同時去除其他不同大小片段，請選擇膠回收試劑盒。
2．回收得率與DNA初始量及洗脫體積有關(guān)。DNA初始量越低，洗脫體積越少，回收得率越低。洗脫體積zuì好不要少于每孔60μl。
3．每次使用前取50ml漂洗液PW并加入200 ml無水乙醇搖勻后使用。
4．使用前請先檢查平衡液BL是否出現(xiàn)渾濁，如有混濁現(xiàn)象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復澄清。實驗前使用平衡液處理吸附柱，可以zuì大限度激活硅基質(zhì)膜，提高得率。
5．實驗前使用平衡液BL處理吸附板，可以zuì大限度激活硅基質(zhì)膜，提高得率。
6．用平衡液BL處理過的板子zuì好當天使用，放置時間過長會影響效果。

操作步驟：（離心法)
1．板平衡步驟：將96孔吸附板CB2疊放在96孔深孔板上，每孔中加入500 μl的平衡液BL，3,600rpm（～2,130×g)離心3 min，棄廢液，將吸附板重新放回深孔板上。（請使用當天處理過的吸附板）
2．估計PCR反應液或酶切反應液的體積，向其中加入3倍體積的結(jié)合液PB。
  舉例：如PCR反應體系為100 μl （不包括石蠟油體積)，則加入300 μl結(jié)合液PB。如果混合液體積超過PCR管的體積，可將PCR反應液或者酶切反應液轉(zhuǎn)移到96孔深孔板中，與結(jié)合液PB進行混合再進行下游實驗。
3．充分混勻后轉(zhuǎn)移所有上述混合液到步平衡過的96孔吸附板CB2中。室溫放置2 min，3,600rpm（～2,130×g)離心5 min，棄廢液，將吸附板重新放回同一深孔板中。
  注意：單孔吸附柱容量為700 μl，若樣品體積大于700 μl可分批加入離心。
4．向96孔吸附板CB2每孔中加入700 μl漂洗液PW （使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，3,600rpm（～2,130×g)離心3 min，棄廢液，將吸附板重新放回同一深孔板中。
5．重復操作步驟4。
6．3,600rpm（～2,130×g)離心10min，目的是將吸附板中殘余的漂洗液去除。
  注意：漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應（酶切、PCR等）實驗。
7．將96孔吸附板CB2置于一個新的96孔深孔板中，向吸附板各孔膜的中間部位懸空滴加80-100 μl ddH2O（pH≥7.5）或洗脫緩沖液TB，室溫放置5 min，3,600rpm （～2,130×g)離心10min收集DNA溶液。
  注意：通常80 μl的洗脫液平均洗脫得到50 μl的DNA產(chǎn)物。為提高得率，可以增加洗脫液體積。此外，若用ddH2O洗脫應保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)。

操作步驟：（負壓法)
1．正確連接負壓裝置，將96孔吸附板CB2置于負壓裝置上；向96孔吸附板CB2每孔中添加200 μl平衡液BL，開啟并調(diào)節(jié)負壓，吸盡板中溶液。
2．在PCR、酶切、酶標或測序反應液中，加3倍體積的PB；混合均勻后轉(zhuǎn)移到平衡過的96孔吸附板CB2中，室溫放置2 min，開啟并調(diào)節(jié)負壓吸盡板中溶液。
3．向96孔吸附板CB2中每孔添加200 μl漂洗液PW，吸盡板中溶液。
4．重復第3步驟。
5．以zuì大負壓將96孔吸附板CB2抽吸10min。
  注意：漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應（酶切、PCR等）實驗。
6．導流管朝下將96孔吸附板CB2于吸水紙上用力拍擊6次。
7．將96孔吸附板CB2置于96孔深孔板上，在膜正中央加80-100 μl ddH2O（pH≥7.5）或洗脫緩沖液TB，室溫靜置5 min。3,600rpm離心10min收集DNA溶液。
8．在該96孔深孔板上覆蓋一張新的封口膜，DNA溶液保存于-20℃?zhèn)溆谩?br />
DNA濃度及純度檢測：
1．DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。
2．DNA應在OD₂₆₀處有顯著吸收峰，OD₂₆₀值為1相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml單鏈DNA。
3．OD₂₆₀/OD₂₈₀比值應為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用ddH2O，比值會偏低，但并不表示純度低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值。

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名稱：紅細胞裂解液A型(核酸純化)
貨號：BTN60403
規(guī)格：250mL
本品用于快速裂解哺乳動物全血中的紅細胞而基本不破壞白細胞和其他淋巴細胞的完整性。由于紅細胞是血液的主要細胞成份，不含DNA和RNA，其所含血紅素能抑制PCR反應，所以先用本產(chǎn)品裂解紅細胞，再提取基因組DNA或RNA 有助于提高所得樣品純度。

產(chǎn)品特點：
1.快速，一次處理只需要2-3分鐘。處理后提取血液DNA可以不需要酚/lǜ仿去蛋白質(zhì)。
2.，一次處理能裂解80%以上的哺乳動物紅細胞，一般樣品zuì多只需要處理兩次。
3.擴容性好，可以一次處理多達幾十毫升的樣品，也可以處理100μL的血液。
4. 兼容性好，可以與市場上大多數(shù)血液DNA提取試劑盒結(jié)合使用。

儲存條件：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在裝有抗凝血液的離心管中，按1:1的比例加入紅細胞裂解液A型并輕柔顛倒混勻。
2. 5000-10000 g室溫離心2分鐘，小心吸棄棄上清。
3. 將細胞沉淀重懸于1/2 體積的紅細胞裂解液A型中，輕柔吹打混勻后5000-10000g室溫離心2分鐘。
4.沉淀即為去除了紅細胞的血液細胞，可以直接用于后續(xù)的實驗。

名稱：血液細胞核DNA和線粒體DNA共提試劑盒
貨號：BTN120810
規(guī)格：25次
本試劑盒是在本公司血液DNA提取試劑盒產(chǎn)品基礎上開發(fā)的、專門用于從新鮮或冷凍的哺乳動物抗凝全血中同時提取細胞核DNA和線粒體DNA的試劑。

產(chǎn)品特點：
1.一份樣品可以同時得到細胞核DNA和線粒體DNA，節(jié)約寶貴的實驗材料。
2. DNA產(chǎn)率高。細胞核DNA產(chǎn)率一般為30-50μg/mL 新鮮血液，線粒體DNA產(chǎn)率約為1μg/mL 新鮮血液。陳舊血液DNA產(chǎn)率差別較大。
3. DNA 純凈，OD260/OD280在1.8-2.0 之間，可直接用于PCR、酶切、雜交等實驗。
4.適用于哺乳動物血液，不適用于其他動物血液。
5. 所用試劑安全，健康環(huán)保。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
紅細胞裂解液D型	250mL
溶液A	25ml
溶液B	2ml
溶液C	5ml
DNA 洗脫液2.0	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸和保存，保存期限一年。

使用方法：

一：白細胞核和線粒體的分離
1. 將3mL 用EDTA 抗凝管收集的新鮮血液轉(zhuǎn)移到一個干凈的15mL塑料離心管中。注意：zuì好使用新鮮血液。對于陳舊血液，由于凍凝過程中冰晶已經(jīng)對細胞核膜和線粒體膜產(chǎn)生損傷，所以DNA 得率會大大減少，具體減少多少根據(jù)凍凝時間長短不同而不同。
2. 向血液中加入等體積(3mL)的D型紅細胞裂解液；輕柔顛倒數(shù)次混勻，室溫靜置10分鐘以裂解紅細胞和白細胞的細胞膜，直至溶液變成清澈的紅色。注意：D型紅細胞裂解液一旦打開后，非常容易污染細菌，未用完的部分zuì好-20℃保存，下次使用前，要溶解后充分搖勻。
3.室溫下1000 g離心10分鐘沉淀白細胞核。
4.轉(zhuǎn)移上清(含線粒體)到新的15mL塑料離心管中，注意不要觸及白細胞核沉淀。
5.在白細胞核沉淀中加入3mL D型紅細胞裂解液。輕柔顛倒數(shù)次混勻后，室溫下1000 g離心10分鐘以沉淀白細胞核。
6.轉(zhuǎn)移上清(含線粒體)到第4 步所得的、已經(jīng)含有上清的15mL塑料離心管中。
將白細胞核沉淀放置冰上，和即將準備好的線粒體一起用于DNA提取，也可以放置在-20℃待用。
7. 將匯集的含線粒體的上清于4℃下15000g離心30分鐘。
8.小心移棄上清，小心將線粒體沉淀重懸在1mL D型紅細胞裂解液中，然后轉(zhuǎn)移到1.5mL塑料離心管中，15000g離心5分鐘，移棄上清得到線粒體沉淀。
9. 用1mL D型紅細胞裂解液洗滌線粒體2次(每次先重懸線粒體，再15000g離心5分鐘得沉淀)。
10. 所得線粒體可以直接用于DNA提取，也可放置在-20℃待用。

二：DNA的提取(下面步驟為白細胞核DNA提取和線粒體DNA提取通用)
11.在白細胞沉淀或線粒體沉淀中加入0.5mL溶液A，用移液槍吹打數(shù)次混勻后再加入75μL溶液B，混勻后于55℃溫育10分鐘。注意：溶液將成渾濁狀。
12. 再加入0.2mL溶液C充分顛倒混勻。
13.在4℃下13000g離心20分鐘后，將上清(含DNA)轉(zhuǎn)入一新的1.5mL塑料離心管中。
14. 加入兩倍體積的自備無水乙醇充分震蕩混勻后，室溫13000 g離心5分鐘，去盡上清。
15. 加入1mL 75%乙醇，充分混勻后室溫13000g離心5分鐘，去盡上清。
16. 重復上步一次。
17. 短暫離心，去盡殘留溶液(此步十分重要，不要省略)。
18. 短暫晾干半分鐘，加入適量DNA 洗脫液2.0 溶解DNA(對細胞核DNA，可加入500μL DNA 洗脫液2.0，對線粒體DNA，可加入50μL DNA 洗脫液2.0)。
19. 65℃保溫15分鐘以便徹底溶解DNA沉淀。溶解后的DNA可以立即用于后續(xù)的OD 檢測、酶切、PCR或其他實驗，也可以放置在-20℃長期保存。

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