MT0112 dNTP/dUTP混合物

產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應(yīng)的dNTP/dUTP混合物僅用于生物化學(xué)研究方面,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多dNTP/dUTP混合物等核酸擴(kuò)增(PCR)產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括dNTP/dUTP混合物在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:dNTP/dUTP混合物
英文名稱:dNTP/dUTP Mixture
產(chǎn)品貨號:MT0112
產(chǎn)品規(guī)格:1 ml
根據(jù)您的關(guān)注的dNTP/dUTP混合物,您可能還對以下產(chǎn)品有需求:
BTN51208B dNTP溶液(10mM) 0.5mL
BTN130833 LAMP可見光染料 1mL
YT389 dNTP套裝(100mM) 4×50μl
WE0108 2×Pfu MasterMix(含染料) 5ml
WE0145 實(shí)時熒光定量PCR的預(yù)混體系(探針法)(低含量ROX校正染料) 5ml
ALH253 長片段Taq PCR MasterMix 0.5ml|5ml
RFT094 2×SYBR qPCR MasterMix 1ml|5×1ml|20×1ml
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關(guān)注dNTP/dUTP混合物,的同時,為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品:
名稱:6nt隨機(jī)引物(抗水解)(0.5mM)
貨號:BTN120679
規(guī)格:100μL
本產(chǎn)品為具有外切酶抗性的隨機(jī)引物,是單鏈隨機(jī)寡核苷酸混合物,可、隨機(jī)引發(fā)不同DNA的合成反應(yīng)。本產(chǎn)品含有2個3′-末端硫代磷酸酯(PTO)修飾,對校正DNA聚合酶的3′至5′外切核酸酶有抗性。該引物還含有5′和3′-羥基末端。本產(chǎn)品濃度為500μm,可用于基因組DNA和質(zhì)粒的鏈置換擴(kuò)增以及隨機(jī)引發(fā)的DNA標(biāo)記。
儲存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期兩年。
名稱:雙酶一管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)
貨號:BTN91202
規(guī)格:50次
本產(chǎn)品是經(jīng)過精心優(yōu)化的、基于MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq DNA聚合酶的雙酶一管式RT-PCR試劑盒,它含有除模版RNA和其專一性引物以外的所有RT-PCR試劑,包括MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq DNA聚合酶、RT-PCR緩沖液等,可以在同一反應(yīng)管內(nèi)完成RNA→cDNA→PCR反應(yīng)(RT-PCR反應(yīng))。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.一管式完成RT-PCR反應(yīng),避免樣品交叉污染。
2. 即開即用,用戶不需要單獨(dú)準(zhǔn)備RT-PCR所需的各種試劑。
3. 主要成分只有兩個RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix,將加樣步驟減少到zuì低,大降低了加樣誤差,增加了可重復(fù)性。
4. 使用范圍廣,適用于從病毒RNA 到人RNA的各種RNA 模板。
5.高靈敏度,每個RT-PCR 體系zuì低可以檢測200拷貝的RNA分子,可擴(kuò)增的模版RNA的zuì長達(dá)2000nt。
6. 所得RT-PCR產(chǎn)物可以直接用于AT克隆。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
雙酶一管式RT-PCR Buffer(2×) | 750μl |
MMLV-Taq Mix | 100μl |
RNase-free水 | 1ml |
說明書 | 1份 |
儲存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:所有離心管用前zuì好全部短暫離心幾秒使管壁上溶液沉淀到管底。下面以一個30μL 體系的RT-PCR 為例,如果體積不同,各成分用量需要適當(dāng)調(diào)節(jié)。
1.在一干凈的無RNase的PCR管中,先加入下列成分:
成分 | 陰性對照 | 樣品 |
RNA模板(自備,分下面三種情況) | 無 | 見下 |
總RNA | 無 | 100-500ng |
或poly(A)mRNA | 無 | 10-500ng |
或體外轉(zhuǎn)錄得到的專一RNA | 無 | 0.01 pg-500ng |
RNA特異性引物一(自備) | 終濃度300nM | 終濃度300nM |
RNA特異性引物二(自備) | 終濃度300nM | 終濃度300nM |
探針(僅對Realtime RT-PCR) | 終濃度200nM | 終濃度200nM |
RNase-free水 | 補(bǔ)到13μL | 補(bǔ)到13μL |
雙酶一管式RT-PCR Buffer(2×) | 15μl | 15μl |
MMLV-Taq Mix | 2μl | 2μl |
注:通常初次使用本試劑時,可用引物濃度300nM,探針濃度200nM進(jìn)行實(shí)驗(yàn),根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果具體情況,在200~800nM 范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度,在50~400nM 范圍內(nèi)調(diào)整探針濃度以達(dá)到zuì佳檢測效果。引物、探針、待檢樣品的具體加量用戶可以根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整,同時增減DEPC 水用量,保證總反應(yīng)體積不變即可。
2. 輕柔混合均勻后放入PCR 儀中進(jìn)行RT-PCR。
3. 設(shè)定RT-PCR反應(yīng)條件時,一般將RT的條件設(shè)定成42℃,30 鐘,后接94℃變性5分鐘,然后進(jìn)入PCR循環(huán)(PCR參數(shù)將根據(jù)自備引物的Tm 值由用戶自行決定注)、zuì后72℃,5分鐘。對Realtime PCR,在復(fù)性步驟設(shè)置熒光檢測,檢測通道:FAM/HEX/VIC/ROX/CY5
4. RT-PCR結(jié)束后取5-10μL電泳檢查。
注意事項(xiàng):
1. 使用已校準(zhǔn)的移液器,選用一次性PCR反應(yīng)管、離心管、tip 頭等進(jìn)行樣本處理及配液等操作,所有用具應(yīng)不含DNA酶和RNA酶。
2.引物、探針設(shè)計(jì)過程中應(yīng)盡可能避免發(fā)夾結(jié)構(gòu)、二聚體等現(xiàn)象的發(fā)生,探針的位置盡可能靠近上游引物,PCR 目標(biāo)片段zuì好小于200bp,盡可能在150bp以內(nèi)。
3. 實(shí)驗(yàn)樣品盡可能新鮮,提取過程應(yīng)嚴(yán)防RNA酶污染及操作不當(dāng)導(dǎo)致的RNA 降解。
4. 使用本產(chǎn)品時建議對RT-PCR擴(kuò)增條件、引物濃度和樣品用量進(jìn)行調(diào)整,選擇zuì適當(dāng)?shù)囊餄舛?、樣品濃度和PCR擴(kuò)增條件。
5. 本產(chǎn)品使用前應(yīng)在室溫充分融解,并用漩渦震蕩器充分混勻。
6. 統(tǒng)一配液后分裝以減少加樣誤差,每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)設(shè)置陰性對照。
7. 禁止標(biāo)記PCR反應(yīng)管,避免外源性熒光信號干擾。
8. PCR反應(yīng)管中不能有氣泡,否則會產(chǎn)生非特異的熒光信號。若有氣泡,可先用手指將氣泡彈破,然后再低速離心消除。
9. 實(shí)時熒光PCR 儀器連續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時,zuì好間隔一小時以上再使用。
10. 實(shí)時熒光PCR 儀需經(jīng)常校正和清潔載樣板板孔。
11. 若使用Roch LightCyclerTM熒光PCR 儀,應(yīng)將毛細(xì)管放在專門套管中,以便分裝反應(yīng)體系和加入待檢樣品。前述操作完畢應(yīng)低速離心數(shù)秒再將毛細(xì)管垂直緩慢放入樣品架,以免折斷;若發(fā)生折斷,應(yīng)小心取出,用專用小毛刷擦拭干凈后方可進(jìn)行擴(kuò)增。
12. 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)嚴(yán)格分區(qū),避免PCR產(chǎn)物污染。
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