GL1454 亮抑酶肽溶液

亮抑酶肽溶液的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品,本制品用于科研目的,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價(jià)格,深為用戶稱道,了解更多亮抑酶肽溶液等蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...
特別提示:包括亮抑酶肽溶液(leupeptin,1mg/ml)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:亮抑酶肽溶液(leupeptin,1mg/ml)
產(chǎn)品貨號:GL1454
產(chǎn)品規(guī)格:1ml
用途:
蛋白酶抑制劑
注意事項(xiàng):
工作濃度3ug/ml
儲存條件:-20℃,避光,18個(gè)月
根據(jù)您的關(guān)注的亮抑酶肽溶液(leupeptin,1mg/ml),您可能還對以下產(chǎn)品有需求:
貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
YT614 | RIPA裂解液(強(qiáng),無抑制劑) | 100ml |
YT623 | 30% Acr-Bis (29:1) | 100ml |
SNM401 | 甲叉-雙丙烯酰胺(粉劑) | 100g |
SNM411 | BCA法微量蛋白檢測試劑盒 | 96T |
KFS086 | 4-20%預(yù)制膠(205-6.5 kDa分離范圍;12個(gè)樣/膠) | 一盒(10個(gè)) |
SY0343 | 30%丙烯酰胺/甲叉雙丙烯酰胺,29:1 | 500ml |
SY0388 | 小牛腸堿性磷酸酶 | 1000U |
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名稱:Bradford法蛋白定量試劑盒
貨號:BTN80814
規(guī)格:100mL
Bradford法測定蛋白質(zhì)濃度是zuì為常用的蛋白檢測方法之一,在酸性條件下,考馬斯亮藍(lán)染料能與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物,其zuì大吸光值也由465nm轉(zhuǎn)移到595nm,通過顏色的強(qiáng)弱測定蛋白質(zhì)濃度的高低。本產(chǎn)品是基于Bradford法蛋白檢測原理開發(fā)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.快速,10-20個(gè)樣品只需要10分鐘即可完成測定。
2.穩(wěn)定,加樣混勻后2分鐘既可測定,1小時(shí)內(nèi)吸光度變化不超過10%。
3.線性范圍在 50~1000μg/mL。
4.zuì小測量體積為1-20μL,zuì低測量蛋白量為0.5μg。
5.即開即用,不需要單獨(dú)購買每個(gè)成分再配制。
6.有常規(guī)和微量兩種檢測模式。
7.不受大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。
8.但受略高濃度的表面活性劑影響,各種蛋白質(zhì)與染料的結(jié)合效率可能有差異。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
溶液A | 100ml |
BSA標(biāo)準(zhǔn)(2mg/mL) | 1ml |
濾紙 | 20張 |
說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運(yùn)輸和保存,BSA 標(biāo)準(zhǔn)-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、常規(guī)檢測流程:
此方法在蛋白濃度30-1000μg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)R2 = 0.996的直線線性回歸,可定量蛋白濃度在此范圍內(nèi)的蛋白樣品。
1.制備 1×工作液。溶液A與無菌水按1:4 比例充分混合即為1×工作液(例:4mL溶液A+ 16mL 無菌水 = 20mL 1×工作液)。
2.濾紙過濾。過濾后的工作液室溫條件下可穩(wěn)定使用1-2 星期。
3.檢測:蛋白樣品與1×工作液按1:50 比例混合(例:100μl蛋白樣品 + 5mL 1×工作液,適用于3mL的比色杯;40μl蛋白樣品 + 2mL 1×工作液,適用于1mL的比色杯;20μl蛋白樣品 + 1mL 1×工作液,適用于平底透明96孔板)。
4.加樣后,充分混勻。
5.室溫放置5分鐘。
6.檢測吸光度。波長設(shè)定 = 595nm。
注意事項(xiàng):
1.不同型號、規(guī)格的濾紙,具有不同的孔徑,導(dǎo)致可通過的分子各不相同。請使用本公司提供的濾紙,否則會導(dǎo)致不同的測定結(jié)果。
2.檢測樣品之前,應(yīng)先制備蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線。一般可使用BSA。
a)常規(guī)檢測:建議使用下述濃度的BSA。
0μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL、125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、1000μg/mL
b)微量檢測:建議使用下述濃度的BSA。
0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、7.5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL。
3.檢測細(xì)胞提取物或純化蛋白樣品,應(yīng)使用相應(yīng)的緩沖液制備蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4.用 96孔板測定時(shí),應(yīng)確保沒有氣泡,否則會增加吸光度的讀數(shù)。
5.此檢測試劑不受大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。但受略高濃度的表面活性劑影響。若SDS高于0.1%,TritonX-100高于0.1%,Tween20,60,80高于0.06%,可取少量樣品加水稀釋到適當(dāng)濃度,再行測定。
二、微量檢測流程:
此方法在蛋白濃度1~20μg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)R2=0.992的直線線性回歸,可定量蛋白濃度在此范圍內(nèi)的蛋白樣品。
1.蛋白樣品與溶液A按4:1比例混合,例:
蛋白樣品 | 溶液A | 適用性 |
400μL | 100μL | 平底透明96孔板 |
2mL | 0.5mL | 1mL的比色杯 |
4mL | 1mL | 3mL的比色杯 |
2.加樣后,充分混勻。
3.室溫放置5分鐘。
4.檢測吸光度。波長設(shè)定= 595nm。
注意事項(xiàng):
1.Bradford蛋白濃度測定的顯色反應(yīng)受許多去污劑的影響。應(yīng)避免使用SDS,Triton X-100,Tween等溶解蛋白樣品。對于難溶解的蛋白樣品,可用1MNaOH 溶解和稀釋。
2.Bradford蛋白濃度測定的顯色反應(yīng)依賴于蛋白中精氨酸殘基的數(shù)目,因此不同蛋白間測定的差異可能較大。
3.標(biāo)準(zhǔn)品曲線配制時(shí),如果吸量不準(zhǔn)確或者加樣槍不會造成標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)減小,可根據(jù)需要使用倍比梯度稀釋的方法來配制,或者使用度高的加樣槍。
4.由于Bradford法在蛋白濃度增高到一定時(shí)候,顏色反應(yīng)并不成比例增加,因此得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線只是在一定范圍內(nèi)可以近似看成直線,每次應(yīng)按照實(shí)際測得的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出相對的蛋白濃度。
5.不像其它一些蛋白濃度測定方法(包括Lowry法),Bradford法測定蛋白濃度不受大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中巰基乙醇的濃度可高達(dá)1M,二流蘇糖醇的濃度可高達(dá)5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.125%,Triton X-100低于0.125%,Tween 20低于0.06%,可以考慮用超純水稀釋,透析/除鹽,ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超純水等方法來消除干擾物質(zhì)的影響。
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