改良Bradford法蛋白定量試的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品，本制品僅用于生物化學研究方面，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多改良Bradford法蛋白定量試等蛋白質(zhì)研究產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括改良Bradford法蛋白定量試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：改良Bradford法蛋白定量試劑盒
英文名稱：Protein Quantitation Kit By Bradford
產(chǎn)品貨號：ALH375
產(chǎn)品規(guī)格：1000次|2500次

本試劑盒是在上常用的蛋白濃度檢測方法之一Bradford法基礎(chǔ)上（考馬斯亮藍結(jié)合顯色法）改進而成。當Bradford染色液（考馬斯亮藍）和蛋白在酸性條件下結(jié)合時，zuì大吸光值波長立刻由465 nm轉(zhuǎn)移至 595nm，同時顏色由褐色轉(zhuǎn)為藍色，通過測定吸光值大小并對照標準蛋白的吸光值，推算出蛋白濃度。

試劑盒組份(1000次)：
蛋白標準（5mg/ml BSA）—————1ml
Bradford染色液—————————200ml

產(chǎn)品特點：
1.靈敏度高，檢測濃度下限達到25μg/ml，zuì小檢測蛋白量達到0.5μg，待測樣品體積為1-20μl。
2.檢測速度快，10-20個樣品只需不足10分鐘即可完成。
3.在50-1000μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

注意事項
1. Bradford 染色液含有刺激性或者腐蝕性化合物，操作時要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。
2. Bradford 染色液中考馬斯亮藍易聚集成團，每次使用前請顛倒6～8 次并且豎直抓住瓶口做水平劃圈動作，旋轉(zhuǎn)瓶中液體，幫助充分混勻，但不可以上下振蕩混勻。
3. 低溫會降低Bradford 染色液的敏感度，因此每次使用前應(yīng)該使Bradford 染色液回復到室溫。僅僅將需要的Bradford 染色液復溫，可以減少復溫時間。倒出每次需要的Bradford 染色液回復到室溫，將原瓶放回冰箱。
4. 蛋白標準請在全部溶解后先混勻，再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標準。標準品曲線配制時，如果吸量不準確或者加樣槍不會造成標準曲線相關(guān)系數(shù)減小，可根據(jù)需要使用倍比梯度稀釋的方法來配制，或者使用度高的加樣槍。
5. 由于Bradford 法在蛋白濃度增高到一定時候，顏色反應(yīng)并不成比例增加，因此得到的標準曲線只是在一定范圍內(nèi)可以近似看成直線，每次應(yīng)按照實際測得的標準曲線計算出大致的蛋白濃度。
6. 需要酶標儀一臺，zuì佳檢測波長為595nm，也可以在570-610nm 之間波長測定，但會降低一些敏感度；并需96 孔板。如果沒有酶標儀，也可以使用普通的分光光度計測定，但是測定蛋白濃度時，需根據(jù)測定吸光度的杯子的體積，按比例調(diào)整Bradford 染色液和樣品的體積。使用分光光度計測定蛋白濃度時，每個試劑盒可以測定的樣品數(shù)量可能會顯著減少。
7. Bradford 法測定蛋白濃度不受大部分樣品中的化學物質(zhì)的影響，樣品中巰基乙醇的濃度可高達1M，二硫蘇糖醇的濃度可高達5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS 低于0.125%，Triton X-100 低于0.125%，Tween 20 低于0.06%。可以考慮用超純水稀釋，透析/除鹽，ACETONE/TCA 沉淀蛋白后重溶于超純水等方法來消除干擾物質(zhì)的影響。

儲存條件：-20℃，有效期9個月。

本制品別名：改進型Bradford法蛋白定量試劑盒|Bradford蛋白濃度測定試劑盒

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名稱：卵白蛋白標準品(2mg/mL)
貨號：BTN90610
規(guī)格：1mL
本產(chǎn)品是濃度為2mg/mL的卵白蛋白，用做蛋白測定的標準品。

儲存條件：低溫運輸和-20℃保存，有效期一年。

名稱：Bradford蛋白定量試劑盒
貨號：WE0275
規(guī)格：800次微孔板(100管次)
  Bradford 法是zuì簡單和快速的比色蛋白定量方法。 這一方法基于考馬斯亮藍G-250與蛋白質(zhì)結(jié)合后， 產(chǎn)生藍色化合物，反應(yīng)迅速而穩(wěn)定。反應(yīng)化合物在465-595 nm處有zuì大的光吸收值，化合物顏色的深淺與蛋白濃度的高低成正比關(guān)系，因此可通過檢測595 nm的光吸收值的大小來計算蛋白的含量。本產(chǎn)品將傳統(tǒng)的Bradford方法進行了改良，zuì大限度的加大蛋白定量的線性范圍，變異性小于普通考馬斯亮藍染色法，靈敏度范圍為100-1,500μg/ml。使用本產(chǎn)品反應(yīng)迅速，顏色產(chǎn)物1小時內(nèi)保持穩(wěn)定。本試劑盒適用于多種緩沖液系統(tǒng)，不受金屬離子、還原劑和螯合劑的干擾。

試劑盒組成：

組成	規(guī)格
Bradford Protein Assay Reagent	2×100ml
BSA Standard Solution(2mg/ml)	2ml

注意事項：
1、BSA標準品的稀釋液需與待測樣品的稀釋液一致(可用1×PBS或0.9%生理鹽水進行稀釋)。
2、本試劑盒不適合含有去污劑的蛋白定量，具體干擾物質(zhì)(具體見附表1)，可采用BCA蛋白定量試劑盒(WE0276)或其他蛋白定量產(chǎn)品。
3、所測蛋白分子量必須大于3 kD。

使用方法：
1、稀釋BSA標準品：用與待測蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋BSA標準品。

管號	稀釋液用量(μl)	BSA標準品用量(μl)	BSA標準品zuì終濃度(μg/ml)
A	0	100	2000
B	50	150	1500
C	200	200	1000
D	200	200(從C管中取)	500
E	200	200(從D管中取)	250
F	200	200(從E管中取)	125
G	200	0	0(空白)

2、試管檢測(檢測范圍：100-1500μg/ml)
1)按上表稀釋標準品，將30μl稀釋好的BSA標準品分別加到作好標記的試管中。
2)取干凈的試管，分別加入30μl待測蛋白樣品(原液或稀釋液)，并作好標記，推薦每個測定做2-3個平行反應(yīng)。
3)向步驟1)和步驟2)的試管中各加入1.5ml Bradford Protein Assay Reagent，充分混勻，室溫放置10分鐘。
4)用分光光度計測定595 nm處的吸光值。
5)繪制標準曲線，計算樣品中的蛋白濃度。
注意：數(shù)據(jù)處理時需要去除明顯錯誤的值。未知樣品濃度可以從標準曲線中查得, 實際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。如果是計算機繪制的曲線，可以從計算機給出的線性方程式計算出未知樣品的濃度。
6)如果所得到的蛋白濃度不在檢測范圍內(nèi)，請重新稀釋樣品后再次測定。

3、微孔檢測(檢測范圍：100-1500μg/ml)
1)將按表1稀釋好的A-G BSA標準品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各5μl分別加到作好標記的96孔板微孔中。
2)每孔加入250μl Bradford Protein Assay Reagent，充分混勻，蓋上96孔板蓋，室溫放置10分鐘。
3)用酶標儀測定595 nm處的吸光值。
4)繪制標準曲線，計算樣品中的蛋白濃度。
注意：數(shù)據(jù)處理時需要去除明顯錯誤的值。未知樣品濃度可以從標準曲線中查得, 實際濃度需要乘以樣品的稀釋倍數(shù)。如果是計算機繪制的曲線，可以從計算機給出的線性方程式計算出未知樣品的濃度。
5)如果所得到的蛋白濃度不在檢測范圍內(nèi)，請重新稀釋樣品后再次測定。

附表1. 干擾物質(zhì)表

化合物	耐受濃度
緩沖液
乙酸鹽	0.6M
甘氨酸	0.1M
HEPES	0.1M
MES	0.7M
MOPS	0.2M
Na+-檸檬酸	50mM
PIPES	500mM
磷酸鈉/磷酸鈉	1M
乙酸鈉	0.6M
Tris	2M
鹽類
硫酸銨	1M
NaCl	1M
尿素	6M
性化合物
甘油	99%
還原劑
β-巰基乙醇	1M
DTT	1M
去垢劑和變性劑
Brij35	干擾
脫氧膽酸納	0.25%
CHAPS	1%
NP-40	干擾
辛葡糖	2%
SDS	0.1%
Tween-20	干擾
Triton X-100	0.1%
糖類
蔗糖	1mM
螯合劑
EDTA	100mM
EGTA	50mM
其他
HCl	0.1M
NaOH	0.1M
NAD	1mM
苯	5%

儲存條件：2～8℃

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