北京百奧萊博供應(yīng)的ECL化學(xué)發(fā)光法檢測試劑盒用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，我公司的ECL化學(xué)發(fā)光法檢測試劑盒品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括ECL化學(xué)發(fā)光法檢測試劑盒(山羊IgG)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：ECL化學(xué)發(fā)光法檢測試劑盒(山羊IgG)
英文名稱：ECL Western Blotting Detection Kit(Goat IgG)
產(chǎn)品貨號(hào)：QN1156
產(chǎn)品規(guī)格：1盒

本試劑盒主要用于western blotting的化學(xué)發(fā)光顯色，含有HRP標(biāo)記抗山羊IgG二抗。

SDS-PAGE電泳后，蛋白質(zhì)按照分子量大小分離，轉(zhuǎn)移到固相載體(例如硝酸纖維素薄膜)后，固相載體以非共價(jià)鍵形式吸附蛋白質(zhì)，以固相載體上的蛋白質(zhì)或多肽作為抗原，與對(duì)應(yīng)的抗體起免疫反應(yīng)，再與酶標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng)，加入發(fā)光底物后，能讓膠片感光。經(jīng)顯影和定影后，可以在膠片上顯示出條帶(抗原所在位置)。

試劑盒組分：
封閉試劑———————————30g(可配制400ml)
10倍濃縮抗體稀釋液——————50ml
HRP標(biāo)記山羊IgG二抗——————0.3ml，效價(jià)1:500～1000
ECL顯色液-——————————25mlA+25mlB

常規(guī)電泳轉(zhuǎn)膜后:
1)清洗轉(zhuǎn)印膜：將膜剝離下后，作好標(biāo)記，一般在左上角剪一缺口。室溫用TBS-T漂洗3次每次5min,以盡量洗去轉(zhuǎn)印膜上的SDS，防止影響后面的抗體結(jié)合。
2)按5g封閉試劑加100ml雙蒸水計(jì)，配制膜封閉液，配好的膜封閉液為乳白色懸液，將漂洗過的轉(zhuǎn)印膜放入封閉液內(nèi)，置搖床孵育，室溫封閉30min。用TBS-T緩沖液(PH7.6)洗膜，室溫漂洗3次每次5min。
3)將10×抗體稀釋液用雙蒸水稀釋成1×(10ml,10×抗體稀釋液加入90ml雙蒸水，混勻，可4℃保存三個(gè)月)。此稀釋液可作為一抗和二抗的稀釋液。
4)用1×的抗體稀釋液稀釋一抗。根據(jù)用量以及一抗的推薦稀釋濃度來稀釋一抗。將雜交膜放入雜交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育過夜或37℃搖動(dòng)孵育2h。此用過的抗體一般可回收第二天再使用一次。
注：如果所加一抗不同，可在此步將膜沿電泳方向剪成條，分別作好標(biāo)記，分開孵育。
5)用TBS-T緩沖液(PH7.6)洗膜，室溫漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗體稀釋液稀釋二抗。根據(jù)用量，按10ml抗體稀釋液加入15ul的HRP標(biāo)記二抗的比例，配制二抗工作液。將雜交膜放入雜交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃搖動(dòng)孵育1h。此用過的抗體一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T緩沖液(PH7.6)洗膜，室溫漂洗3次每次10min。
8)根據(jù)用量，取ECL發(fā)光液A、B等量混勻，加在膜正面，暗室顯色1～5分種。傾去顯色液，小心用紙吸去顯色液，在上面蓋一層平整的透明紙。再取出感光膠片，做好標(biāo)記，輕輕的放在膜上，顯色30秒到1分鐘，取出膠片浸入顯影液中，觀察顯色情況，再放入定影液中1分鐘。根據(jù)條帶強(qiáng)弱，再次感光時(shí)可減短或者加長感光時(shí)間(從5秒到30分鐘)以期達(dá)到理想結(jié)果。
注意事項(xiàng)：
1.請(qǐng)根據(jù)一抗來源選擇試劑盒。
2.可以根據(jù)顯色結(jié)果來優(yōu)化實(shí)驗(yàn)反應(yīng)時(shí)間。如背景過深，可延長膜封閉時(shí)間，加長zuì終漂洗次數(shù)與時(shí)間。如果
條帶過弱，可增加抗體濃度，可延長抗體孵育時(shí)間或加長感光時(shí)間。
3.TBS-T(0.01M，PH7.6)配制方法：稱取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml的雙蒸水溶解，用鹽酸調(diào)PH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用雙蒸水加至1000ml，混勻即可。(也可按照自己的配制習(xí)慣來配制)

儲(chǔ)存條件：-20℃避光，有效期一年。

根據(jù)您的關(guān)注的ECL化學(xué)發(fā)光法檢測試劑盒(山羊IgG)，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN80808	蛋白酶抑制劑混合液	1mL
SNM381	Tween-20	100ml
ALH378	PAGE膠微量蛋白染色試劑盒(可脫色)	250ml|1000ml
KFS074	SDS-PAGE凝膠配制試劑盒	50 塊膠
KFS077	30% Acr-Bis (29:1)	100ml|500ml
KFS221	Caspase-8蛋白檢測試劑盒	50T
KFS230	TNF-α蛋白檢測試劑盒	50T

關(guān)注ECL化學(xué)發(fā)光法檢測試劑盒(山羊IgG)，的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：


BTN140651 12mL親和層析柱 12mL
BTN130540 二氯異香豆素溶液(10mg/mL) 5mL
BTN130531 組織培養(yǎng)專用蛋白酶抑制劑 1mL
WE0324 BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒(WB IHC) 40ml
SNM390 蛋白磷酸酶抑制劑混合物(100×) 1ml
SNM413 膜蛋白、核蛋白和胞質(zhì)蛋白抽提試劑盒 50T
KFS036 FITC標(biāo)記抗人免疫熒光染色試劑盒 300T
QN1159 DAB法顯色試劑盒(小鼠/兔IgG) 1盒

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