BTN100303 柱式真菌DNA提取試劑盒

產品簡介
柱式真菌DNA提取試劑盒是高品質的DNA提取純化產品,由北京百奧萊博供應,本產品用于科研試驗,我公司專注于DNA提取純化產品的研發(fā)、生產和供應,為您提供的柱式真菌DNA提取試劑盒質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括柱式真菌DNA提取試劑盒(玻璃珠法)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:柱式真菌DNA提取試劑盒(玻璃珠法)
英文名稱:Fungus DNA Column extraction kit(Glass bead method)
產品貨號:BTN100303
產品規(guī)格:50次
真菌DNA提取是一個難題,一是因為真菌有菌絲體、孢子等多種完全不同的結構形態(tài),二是因為其細胞壁一般都很厚,比較難以破碎。本產品是液氮研磨法柱式真菌DNA提取試劑盒的姊妹產品,它利用玻璃珠法破碎細胞,主要用于從真菌孢子和液體培養(yǎng)的真菌細胞中提取DNA(液氮研磨法柱式真菌DNA提取試劑盒采用液氮研磨法破碎細胞,適用于從真菌菌絲體中提取其基因組DNA)。
產品特點:
1. 即開即用,提供包括玻璃珠、離心吸附柱在內的所有試劑和耗材。
2. 采用玻璃珠法破碎細胞,屬于物理方法,遠比基于蝸牛酶或破壁酶的溫和化學破壁法重復性好,也不容易帶入外援真菌DNA。
3. 本方法提取一個樣品只需要10余分鐘,方便、快速和。
4.一次可以處理5mL的過夜真菌培養(yǎng)物,所得的基因組DNA OD260/OD280一般都在1.8左右,長度一般在20 kb左右,每mL菌液的DNA產率一般在1-3ug??梢灾苯佑糜赑CR和酶切等后續(xù)試驗。
試劑盒組成:
成成分 | 規(guī)格 |
溶液A | 25ml |
溶液B | 25ml |
溶液C | 75ml |
離心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
DNA洗脫液2.0 | 10ml |
酸洗玻璃珠,400μm | 25g |
說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運輸及保存,保存期為一年。
使用方法:
1. 對菌液:取3-5mL過夜培養(yǎng)的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干凈的塑料離心管中,12000rpm離心2分鐘棄上清留沉淀。
2. 對菌落:用接種針在在培養(yǎng)基上刮取盡可能多的真菌菌落(約50mg),轉移到裝有1mL水的干凈的塑料離心管中,洗滌下接種環(huán)上的菌體。12000rpm離心2分鐘棄上清留沉淀。
3. 對孢子材料,一般取0.1g左右,直接加入到離心管中,然后進入下一步操作。
4.在材料中加入無菌水1mL,振蕩半分鐘后12000rpm離心2分鐘棄上清留沉淀。
5.沉淀中加入500μl溶液A和0.5克的玻璃珠,渦旋震蕩10分鐘。
6. 加入500μL的溶液B,渦旋震蕩3分鐘,12000rpm離心2分鐘,將上清液全部轉移到一個5mL的干凈的塑料離心管中?;蛘呙抗?.3mL,分別轉移到2-3個1.5mL的干凈的塑料離心管中。
7.在上清中加入3倍體積的溶液C,顛倒數次混勻后,分三次上離心吸附柱,每次上柱后均先室溫放置2分鐘,然后12000rpm離心1分鐘,倒掉穿透液,再第二次上柱,重復上面的操作,直到掛柱步驟完成。
8.在離心吸附柱中加入500μl通用洗柱液,12000rpm離心1分鐘,倒掉穿透液。
9. 重復上步操作一次。
10. 12000rpm空柱離心1分鐘。
11. 加入50-100μl DNA洗脫液2.0,室溫放置1分鐘以上,12000rpm離心1分鐘,穿透液即為真菌DNA樣品。
12. 為了得到更多的DNA樣品,可以重復上步操作1-2次。
13. 所得DNA即可立即使用或放冰箱長期保存。
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名稱:柱式昆蟲DNA提取試劑盒
貨號:BTN81101
規(guī)格:50次
本試劑盒是專門用于從昆蟲、節(jié)肢動物、蛔蟲、扁形蟲和一些富含多糖的動物組織中提取基因組DNA的試劑盒。其原理是基于去垢劑在適當的離子強度條件下,特異地跟基因組DNA結合形成沉淀,然后在用硅膠膜離心吸附法進行進一步純化得到DNA。
產品特點:
1.適用于用常規(guī)方法難以提取的、各種富含多糖的動物,包括昆蟲、節(jié)肢動物、蛔蟲、扁形蟲等。
2. 除新鮮樣品外,還適合于各種保存狀態(tài)的樣品,包括冷凍的樣品、用乙醇保存的樣品和福爾馬林保存的樣品。
3. 提取到的基因組DNA完整性,長度一般在20-50 Kb。
4. DNA純凈,OD260/280一般都在1.8左右,可直接用于PCR、酶切、雜交等。
5. 操作簡單,整個過程約30分鐘。
6. 安全,本試劑盒對人體,無腐蝕性和刺激性氣味。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
溶液A | 50ml |
溶液B | 50ml |
溶液C | 50ml |
離心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
DNA洗脫液2.0 | 10ml |
說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運輸及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 稱取0.1-0.3 g昆蟲樣品轉移到塑料研缽中,液氮研磨成粉后轉移到一個干凈的1.5mL塑料離心管中。
注意:zuì好避免使用含二氧化硅的玻璃研缽,因為DNA會吸附在表面,影響得率。
2.在離心管中加入1mL 65℃預熱的溶液A并用移液槍頭充分吹打混勻(如果溶液A有沉淀,需先在65℃加熱溶解后搖勻再使用)。
3. 65℃保溫5-30分鐘,其間zuì好吹打混勻2-3次。
4. 12000~15000g室溫離心3分鐘。
5. 將不超過0.75mL的上清轉移到新離心管中。有時候上清液中還會有少量細小懸浮物,但對后續(xù)操作沒有影響,不必進行特殊處理。
6.在上清液中加入等體積的溶液B,上下顛倒30秒充分混勻,溶液將呈白色混濁狀。
7. 將其置于冰浴中放置5-10分鐘。
8. 12000~15000g室溫離心3分鐘,轉移上清到新的1.5mL塑料離心管中。
9. 加入0.2mL的lǜ仿(自備),震蕩器上充分振蕩30秒混勻。
10. 12000~15000g室溫離心3分鐘,兩相交界面將有白色膜狀物,小心轉移上清到新1.5-5mL塑料離心管中。注意:由于下一步要加1.5倍體積的溶液C,所以新的離心管的體積要足夠大。
11. 加入1.5倍體積的溶液C,上下顛倒30秒混勻,然后分多次的將混合液轉移到離心吸附柱中。
12. 每次轉移0.7-0.8mL混合液后,室溫放置5-10分鐘。
13. 12000~15000g室溫1分鐘,棄穿透液。
14. 對需要多次上柱的樣品,可以在此將剩余的樣品加到離心吸附柱式中,重復第12-14步的操作。
15. 將0.7mL通用洗柱液加入離心柱,室溫離心1分鐘,棄穿透液。
16.在離心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,12000~15000g離心半分鐘(此步為第二次洗滌)。
17. 空甩1分鐘去除殘留液體。
18. 將離心柱放置在一新的1.5mL塑料離心管中,加入30-100μl DNA洗脫液2.0。
19.室溫放置5分鐘后離心1分鐘,管底即為昆蟲DNA溶液,可立即使用,也可長期保存在-20℃。
20.可以重復上步一次,以洗脫更多的DNA。

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