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產(chǎn)品詳情

QN2054 磁珠法動物基因組DNA提取試劑盒

  • 產(chǎn)品/服務(wù):QN2054 磁珠法動物基因組DNA提取試劑盒
  • 型 號:QN2054
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-06-05
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):1085
產(chǎn)品簡介

磁珠法動物基因組DNA提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持,本品用于科研目的,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價位合理,需要磁珠法動物基因組DNA提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶,請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

產(chǎn)品詳細介紹

特別提示:包括磁珠法動物基因組DNA提取試劑盒(肺、腎、脾)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:磁珠法動物基因組DNA提取試劑盒(肺、腎、脾)
英文名稱:Magnetic Animal Tissue Genomic DNA Kit
產(chǎn)品貨號:QN2054
產(chǎn)品規(guī)格:50T

本試劑盒采用具有獨特分離作用的磁珠和緩沖液系統(tǒng),可從樣品中分離純化高質(zhì)量基因組DNA。特殊包被的磁珠在一定條件下對目的DNA具有很強的親和力,而當(dāng)條件改變時,磁珠釋放吸附的DNA,能夠達到快速分離純化DNA的目的。整個過程安全、便捷,提取的DNA純度高。使用本試劑盒純化的基因組DNA的OD260/OD280均在1.7-1.9之間,可以應(yīng)用于各類下游分子生物學(xué)實驗。

試劑盒組成
組分 DM1701-50T
裂解液S1 27ml
裂解液S2 8.3ml
漂洗液 1(空瓶)
洗脫液 5.5ml
磁珠 1.4ml×2
蛋白酶K(20 mg/mL) 1.1ml
說明書 1份

儲存條件:磁珠可以在室溫下(15~25℃)運輸,但請在4℃冰箱中保存,禁止凍存。蛋白酶K需-20℃保存,以保證其活性。其余試劑可以室溫保存,更長時間的保存可置于2~8℃。復(fù)檢期1年。

操作步驟
使用前請先在漂洗液中配置 70%乙醇。若裂解液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時間,必要時可在 37℃水浴中預(yù)熱 10min 溶解沉淀,搖勻后使用。

1.裂解
取適量的動物組織樣本(脾臟≤20mg;肺臟≤20mg;腎臟≤20mg)用液氮研磨成粉末,并迅速轉(zhuǎn)移到已加入480μl 裂解液S1、150μl裂解液S2以及20μL蛋白酶K(20mg/mL)的EP管中,吹打或震蕩混合均勻。將EP管置于65℃水浴25~30min。待冷卻到室溫,12000rpm 4℃離心5~10min。
2.結(jié)合
盡量取凈上清于新的1.5mL EP管中,加入等體積的異丙醇以及振蕩混勻的50μL磁珠,顛倒混勻1min,靜置3min。將EP管置于磁鐵上進行磁分離,吸棄廢液(吸凈管蓋及管底殘液)。
3.洗滌
加入600μL漂洗液(使用前請預(yù)先配置70%乙醇),輕柔混勻1~2min,將EP管置于磁力架上進行磁分離,吸凈管蓋及管底的殘液;重復(fù)本步驟一次。
4.洗脫
室溫晾干5~10min至乙醇揮發(fā)完全,加入50~100μL洗脫液,緩慢抽吸混勻,65℃水浴10min。(每隔1~2min輕搖EP管幾下混勻)。將EP管置于磁力架上進行磁分離,小心吸取上清液至新的EP管中,進行下游實驗。(判斷磁珠晾干的標準:側(cè)面觀察磁珠無反光,正面觀察磁珠邊緣龜裂)。

注意事項
1.動物組織(脾、肺、腎)要用液氮充分研磨。
2.整個裂解過程操作盡量溫和,并在要求時間內(nèi)完成。
3.如果組織液濃度較高,則建議磁珠量可適當(dāng)增加,以獲取高濃度 DNA。
4.客戶自備試劑:異丙醇、無水乙醇、蛋白酶 K。
5.使用前請在漂洗液瓶中預(yù)先配制 70%乙醇。
6.磁珠在使用前一定要充分混勻。

常見問題及參考意見
1.得率低
(1)組織沒有完全裂解完,裂解時間不夠或沒有離心直接進行下一步操作:可適當(dāng)延長裂解時間,zuì長不超過60min。樣品裂解后,請一定要離心后再進行下一步操作。
(2)結(jié)合不充分:結(jié)合過程中要使磁珠一直處于懸浮狀態(tài),并且充分顛倒混勻。
(3)取樣量大于說明書給出量:取樣量請嚴格按照說明書操作。
2.條帶彌散
(1)樣品不新鮮或反復(fù)凍融多次:盡量用新鮮樣品進行實驗,如果樣品需要保存,可根據(jù)實驗,分裝保存樣品,盡量避免反復(fù)凍融;
(2)環(huán)境溫度太高:可以將研缽置于-20℃預(yù)冷或置于液氮保存后再進行研磨,如果所提取材料基因組DNA易降解,可用液氮研磨;
(3)裂解時間太長:裂解時間不要超過60 min;
(4)提取后模板DNA放置時間太長:提取后如有需要,請盡量及時進行凝膠電泳實驗。短期內(nèi)可置于4℃保存,長期請置于-20℃保存(盡量注意避免反復(fù)凍融)。
3.DNA液有顏色
(1)洗滌過程不充分:如果結(jié)合后磁珠呈團狀、 絲狀或顆粒狀,可增加點陣力度及次數(shù),充分吹打混勻。
(2)裂解不充分:適當(dāng)增加裂解液S1和S2用量,也可以延長裂解時間。
(3)樣品用量大于說明書給出量而其他試劑用量沒有相應(yīng)調(diào)整:嚴格按照說明書操作,如果需要增大樣本量,可以等比例增加裂解液S1、S2以及磁珠用量,其他試劑用量不變。
4.DNA樣品不純,干擾后續(xù)實驗
(1)DNA液有乙醇殘留:洗滌時,請注意吸凈管蓋及管底的殘液。此外,磁珠應(yīng)完全干燥,保證無乙醇殘留。
(2)磁珠洗滌不充分:加入70%乙醇溶液時,請吸打或點陣混勻。如有必要,可增加一次洗滌步驟。
(3)DNA液中吸入磁珠:如果不小心吸入磁珠,請將上清液返回原管,待磁珠完全吸附至管壁后重新吸取上清?;蛘邔⑽〉纳锨逡?0000rpm離心2 min,再取上清。
(4)DNA液中含有蛋白質(zhì)等雜質(zhì):建議適當(dāng)減少樣品用量。或可重復(fù)一次提取過程去除雜質(zhì)。
(5)DNA液中含有輕微鹽離子等雜質(zhì),此為洗脫液(含有抑制核酸降解的成分)正?,F(xiàn)象,不影響下游實驗。如有特殊需要,可使用等量的經(jīng)高壓滅菌的去離子水作為洗脫液。為方便實驗,可將獲得的DNA置于-20℃環(huán)境分裝保存。

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名稱:土壤腐殖酸清除劑
貨號:BTN70603
規(guī)格:250mL
土壤和湖海沉積物中都含有棕黑色或黑色的腐殖酸,它們對PCR等后續(xù)反應(yīng)有大的抑制作用,所以有效去除土壤中腐殖酸是提取土壤微生物DNA的重要環(huán)節(jié)。但是目前市場上沒有專門的產(chǎn)品,針對這一情況,百奧萊博開發(fā)了本產(chǎn)品,專門用于對提取DNA用的土壤進行預(yù)處理,以清除腐殖酸成分。

產(chǎn)品特點:
1. 清除效果好,一次能使腐殖酸的濃度降低50%左右。
2.適合于黃色、紅色、黑色和棕黑色等各種質(zhì)地的土壤和河海沉積物。
3. 操作過程簡單快速,一次處理只需要10分鐘。
4.擴容性好,可小規(guī)模操作,也可以大規(guī)模操作。

儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。

使用及效果:
按每1克土壤加10mL本產(chǎn)的比例將樣品混合,振蕩3~5分鐘,3000-5000g室溫離心5分鐘,棄上清,沉淀可直接用于DNA提取。此操作可以多次重復(fù)。
土壤腐殖酸清除劑使用效果
圖注:比較水和本產(chǎn)品處理泥碳(腐殖酸含量大于60%)樣品的效果,C為用水處理后離心得到的結(jié)果,1-5是同一土壤樣品用本產(chǎn)品洗滌1-5后所得到的上清液。
土壤腐殖酸清除劑使用效果
圖注:用我司土壤DNA提取試劑(BTN60701)提取泥碳樣品所得到的DNA溶液,1號樣品所用土壤預(yù)先用水洗滌過三次,2號樣品預(yù)先用本產(chǎn)品洗滌過三次。

名稱:一步離心式石蠟清除劑
貨號:BTN70302
規(guī)格:100次
用石蠟包埋組織作為材料進行PCR的難題之一是如何有效去除石蠟,因為殘留的石蠟不但會影響DNA提取,還會干擾PCR擴增。常規(guī)的脫蠟方法一般需要1-2小時的時間,需要多次離心,每次離心都會造成樣品的丟失。本產(chǎn)品只需要一步離心,克服了常規(guī)方法的缺點。

產(chǎn)品特點:
1.快速簡單,只需要離心一次,免去了反復(fù)換液和離心,減少了樣品的丟失。
2. 脫蠟效果好,跟經(jīng)典的二甲苯/乙醇法相當(dāng)。
3. 即開即用,客戶自己不需要準備額外的試劑。

產(chǎn)品組成:
成分 規(guī)格
溶液A 100mL
溶液B 7.5ml
說明書 1份


儲存條件:常溫運輸及保存,有效期一年。

使用方法:
1. 將1mL溶液A加入到1.5mL塑料離心管中。
2. 放入一片不超過25μm的石蠟包埋組織切片。
3.以zuì大速度振蕩10秒。
4. 加入75μL溶液B。
5. 振蕩10秒混合。
6. 7000 g離心2分鐘,小心吸棄上清。
7.真空抽干機抽干離心管中殘留的液體。此步驟約需要一小時。
8. 得到的石蠟包埋組織切片即可用于DNA提取。

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