WH0014 病毒DNA/RNA提取試劑盒(離

病毒DNA/RNA提取試劑盒(離的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品,本制品僅用于生物化學(xué)研究方面,我公司專(zhuān)注于DNA提取純化產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng),為您提供的病毒DNA/RNA提取試劑盒(離質(zhì)量可靠,批間差小,且價(jià)格公道,熱切盼望您選購(gòu)我們的產(chǎn)品。...
特別提示:包括病毒DNA/RNA提取試劑盒(離心吸附柱法)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱(chēng):病毒DNA/RNA提取試劑盒(離心吸附柱法)
英文名稱(chēng):Extraction kit for nucleic acid from virus
產(chǎn)品貨號(hào):WH0014
產(chǎn)品規(guī)格:50次
本試劑盒采用、專(zhuān)一結(jié)合核酸的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖系統(tǒng),適合從血漿、血清和其它無(wú)細(xì)胞體液等樣品中分離純化病毒的DNA或者RNA,本試劑盒特別加入了Carrier RNA,可以從體系中輕松捕獲微量核酸,具有方便快捷、產(chǎn)量高、重復(fù)性好的特點(diǎn)。所得病毒基因組DNA或RNA無(wú)蛋白、核酸酶或其它雜質(zhì)的污染,可直接用于PCR、酶切、雜交、反轉(zhuǎn)錄等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。本試劑盒操作簡(jiǎn)單、快速,1h內(nèi)即可獲得高純度DNA或RNA。用于各種病毒DNA/RNA核酸提取,如HCV、HIV、HPV、動(dòng)物致病性病毒等。
產(chǎn)品特點(diǎn):
·快速純化得到高質(zhì)量病毒DNA和RNA。
·重復(fù)性強(qiáng),產(chǎn)量高。
·無(wú)有機(jī)抽提或乙醇沉淀。
·完全去除污染物和抑制劑,方便下游應(yīng)用。
試劑盒組成:
組分 | 50T |
緩沖液GB | 15ml |
緩沖液GD | 13 ml |
漂洗液PW | 15ml |
RNase-Free ddH2O(瓶裝) | 15ml |
Proteinase K | 1 ml |
Carrier RNA | 310μg |
RNase-Free ddH2O(管裝) | 1 ml |
RNase-Free吸附柱CR2(含2 ml收集管) | 50套 |
RNase-Free離心管(1.5 ml) | 50個(gè) |
保存條件:室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月,更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10min,以溶解沉淀。Carrier RNA配置成儲(chǔ)液后置于-20℃。
注意事項(xiàng):(請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng))
1.所有的離心步驟均在室溫下進(jìn)行(15-25℃)。
2.將樣品平衡至室溫。
3.試劑盒中提供的RNase-Free離心管(1.5 ml)供第13步洗脫步驟使用,其余離心管需自備。
Carrier RNA溶液的配制如下:
·向裝有310μg Carrier RNA凍干粉的管子中加入310μl RNase-Free ddH2O,將Carrier RNA徹底溶解,得到終濃度為1 μg/μl的溶液,并按實(shí)驗(yàn)情況分裝到RNase-Free的離心管中,置于-20 ℃儲(chǔ)存。使用時(shí)按照提取的次數(shù)取出相應(yīng)的溶液,該溶液應(yīng)避免反復(fù)凍融,凍融次數(shù)不能超過(guò)3次。
·注意Carrier RNA凍干粉不能直接溶解于緩沖液GB中,必須先溶解在RNase-Free ddH2O中,再溶解至緩沖液GB中。
· Carrier RNA工作液:根據(jù)樣品的數(shù)量計(jì)算所需緩沖液GB和Carrier RNA溶液的體積(見(jiàn)表1或使用以下公式計(jì)算),將緩沖液GB與Carrier RNA溶液顛倒混勻,即得到Carrier RNA工作液;為避免溶液出現(xiàn)起泡現(xiàn)象,請(qǐng)勿使用渦旋振蕩。
如果需要提取大量的樣品,可根據(jù)以下公式計(jì)算:
n×0.22 ml =y ml
y ml×28 μl/ml=z μl
n=同時(shí)提取的樣品個(gè)數(shù),y=需要加入緩沖液GB的體積,z=需要加入Carrier RNA溶液的體積。
表1:步驟3中Carrier RNA工作液的配制:
樣品個(gè)數(shù) | GB(ml) | Carrier RNA水溶液(μl) |
1 | 0.22 | 6.2 |
2 | 0.44 | 12.3 |
3 | 0.66 | 18.5 |
4 | 0.88 | 24.6 |
5 | 1.1 | 30.8 |
6 | 1.32 | 37 |
7 | 1.54 | 43.1 |
8 | 1.76 | 49.3 |
9 | 1.98 | 55.4 |
10 | 2.2 | 61.6 |
11 | 2.42 | 67.8 |
12 | 2.64 | 73.9 |
13 | 2.86 | 80.1 |
14 | 3.08 | 86.3 |
15 | 3.3 | 92.4 |
16 | 3.52 | 98.6 |
17 | 3.74 | 104.7 |
18 | 3.96 | 110.9 |
19 | 4.18 | 117 |
20 | 4.4 | 123.2 |
21 | 4.62 | 129.4 |
22 | 4.84 | 135.5 |
23 | 5.06 | 141.7 |
24 | 5.28 | 147.8 |
注意:請(qǐng)將緩沖液GB與Carrier RNA溶液顛倒混勻,即得到Carrier RNA工作液;為避免溶液出現(xiàn)起泡現(xiàn)象,請(qǐng)勿使用渦旋振蕩。
使用方法:
使用前請(qǐng)先在緩沖液GD和漂洗液PW中加入無(wú)水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。
1.用移液器將20 μl Proteinase K加入一個(gè)干凈的1.5 ml離心管中。
2.向離心管中加入200 μl血漿/血清/淋巴液(樣品需平衡至室溫)。
注意:如果樣本體積小于200 μl,可加入0.9% NaCl溶液補(bǔ)充。
3.加入200 μl Carrier RNA工作液(為緩沖液GB與Carrier RNA溶液的混合液,配制方法如表1或按照公式計(jì)算)。蓋上管蓋,渦旋振蕩15 sec混勻。
注意:為了保證裂解充分,樣品和Carrier RNA工作液需要徹底混勻。
4.在56℃孵育15 min。簡(jiǎn)短離心以收集附著在管壁及管蓋的液體。
5.加入250 μl無(wú)水乙醇,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀。蓋上管蓋并渦旋振蕩15 sec,徹底混勻。在室溫(15-25℃)放置5 min。
注意:如果周?chē)h(huán)境高于25℃,乙醇需要再在冰上預(yù)冷后再加入。
6.簡(jiǎn)短離心以收集附著在管壁及管蓋的液體。
7.仔細(xì)將離心管中的溶液和絮狀沉淀全部轉(zhuǎn)移至RNase-Free吸附柱CR2(吸附柱放在收集管中),蓋上管蓋,8000rpm (~6,000×g)離心1 min,棄廢液,將吸附柱放回收集管中。
注意:如果吸附柱上的液體未能全部離心至收集管中,請(qǐng)加大轉(zhuǎn)速,延長(zhǎng)離心時(shí)間至液體完全轉(zhuǎn)移到收集管中。
8.小心打開(kāi)吸附柱蓋子,加入500 μl溶液GD(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),蓋上管蓋,8000rpm (~6,000×g)離心1 min,棄廢液,將吸附柱放回收集管。
9.小心打開(kāi)吸附柱蓋子,加入600 μl溶液PW(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),蓋上管蓋,靜置2 min,8000rpm (~6,000×g)離心1 min,棄廢液,將吸附柱放回收集管。
10.重復(fù)步驟9。
11.小心打開(kāi)吸附柱蓋子,加入500 μl無(wú)水乙醇,蓋上管蓋,8000rpm (~6,000×g)離心1 min,棄廢液。
注意:乙醇的殘留可能會(huì)對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)造成影響。
12.將吸附柱放回收集管中,12000rpm (~13400×g)離心3 min,使吸附膜完全變干,棄廢液。
13.將吸附柱放入一個(gè)RNase-Free離心管(1.5 ml)中,小心打開(kāi)吸附柱的蓋子,室溫放置3 min,使吸附膜完全變干。向吸附膜的中間部位懸空滴加20-150 μl RNase-FreeddH2O,蓋上蓋子,室溫放置5 min。12000rpm (~13400×g)離心1 min。
注意:確保洗脫液(RNase-Free ddH2O)在室溫平衡后再使用。如果加入洗脫液的體積很?。ㄐ∮?0 μl),為了將膜上的DNA/RNA充分洗脫下來(lái),應(yīng)注意將洗脫液加到膜的中央位置。洗脫體積可以根據(jù)后續(xù)的實(shí)驗(yàn)要求靈活處理。
根據(jù)您的關(guān)注的病毒DNA/RNA提取試劑盒(離心吸附柱法),病毒核酸提取試劑盒,您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:
名稱(chēng):柱式軟體動(dòng)物DNA提取試劑盒
貨號(hào):BTN101111
規(guī)格:50次
本試劑盒是專(zhuān)門(mén)用于從各種軟體動(dòng)物組織中提取基因組DNA的試劑盒。其原理是基于陽(yáng)離子去垢劑CTAB在適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度條件下,特異地跟基因組DNA 結(jié)合形成沉淀,然后在用硅膠膜技術(shù)進(jìn)行進(jìn)一步純化。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.適用于用常規(guī)方法難以提取的、各種富含多糖的軟體動(dòng)物動(dòng)物,包括螺類(lèi)、貝類(lèi)、烏賊、章魚(yú)和蝸牛等。
2. 提取到的基因組DNA 完整性,其中zuì長(zhǎng)可以到達(dá)長(zhǎng)度一般在20-50kb。
3. DNA 純凈,OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右,可直接用于PCR、酶切、雜交等。
4. 操作簡(jiǎn)單,整個(gè)過(guò)程約30分鐘。
5. 安全,本試劑盒對(duì)人體,無(wú)腐蝕性和刺激性氣味。
6. 價(jià)廉物美,與國(guó)外同類(lèi)產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價(jià)格。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
溶液A | 50ml |
溶液B | 50ml |
溶液C | 100ml |
RNase A(10mg/mL) | 150μl |
離心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
DNA洗脫液2.0 | 10ml |
說(shuō)明書(shū) | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。
使用方法:
1. 勻漿方法一:稱(chēng)取0.1-0.3g軟體動(dòng)物組織,轉(zhuǎn)移到塑料研缽中,液氮研磨成粉后轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的1.5mL塑料離心管中。注意:zuì好避免使用含二氧化硅的玻璃研缽,因?yàn)镈NA 會(huì)吸附在表面,影響得率。在離心管中加入1mL 65℃預(yù)熱的溶液A并用移液槍頭充分吹打混勻(如果溶液A有沉淀,需先在65℃加熱溶解后搖勻再使用)。進(jìn)入第三步。
2. 勻漿方法二:將0.1-0.3g軟體動(dòng)物組織剪成小塊,轉(zhuǎn)移到10-15mL塑料管中(培養(yǎng)細(xì)菌那種離心管即可),加入1mL 65℃預(yù)熱的溶液A,用Polytron 式勻漿機(jī)(剪切式勻漿機(jī))勻漿1分鐘左右。
3. 65℃保溫5-30分鐘,其間zuì好吹打混勻2-3次。
4.轉(zhuǎn)移到新的1.5mL離心管中,12000~15000g室溫離心3分鐘。
5. 將不超過(guò)0.75mL的上清轉(zhuǎn)移到新離心管中。有時(shí)候上清液中還會(huì)有少量細(xì)小懸浮物,但對(duì)后續(xù)操作沒(méi)有影響,不必進(jìn)行特殊處理。
6.在上清液中加入等體積的溶液B,上下顛倒30秒充分混勻,溶液將呈白色混濁狀。
7. 將其置于冰浴中放置5-10分鐘。
8. 12000~15000g室溫離心3分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的1.5mL塑料離心管中。
9. 加入0.2mL的lǜ仿(自備),震蕩器上充分振蕩30秒混勻。
10. 12000~15000g室溫離心3分鐘,兩相交界面將有白色膜狀物,小心轉(zhuǎn)移上清到新1.5-5mL塑料離心管中。注意:由于下一步要加1.5倍體積的溶液C,所以新的離心管的體積要足夠大。
11. 加入1.5倍體積的溶液C,上下顛倒30秒混勻,然后分多次的將混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。
12. 每次轉(zhuǎn)移0.7-0.8mL 混合液后,室溫放置5-10分鐘。
13. 12000~15000g室溫1分鐘,棄穿透液。
14. 對(duì)需要多次上柱的樣品,可以在此將剩余的樣品加到離心吸附柱式中,重復(fù)第12-14 步的操作。
15. 將0.7mL 通用洗柱液加入離心柱,室溫離心1分鐘,棄穿透液。
16.在離心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,12000~15000g離心半分鐘(此步為第二次洗滌)。
17. 空甩1分鐘去除殘留液體。
18. 將離心柱放置在一新的1.5mL塑料離心管中,加入30-100μL DNA 洗脫液2.0。
19.室溫放置5分鐘后離心1分鐘,管底即為軟體動(dòng)物DNA溶液,可立即使用,也可長(zhǎng)期保存在-20℃。
20.可以重復(fù)上步一次,以洗脫更多的DNA(第二次洗脫的DNA一般有次的30%左右)。

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