ALH083 無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒

產(chǎn)品簡介
無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持,本品用于科研目的,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價位合理,需要無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶,請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:無內(nèi)毒素質(zhì)粒中量提取試劑盒
英文名稱:Plasmid Extraction Kit (solution type, no endotoxin, transfection grade)
產(chǎn)品貨號:ALH083
產(chǎn)品規(guī)格:20次
本試劑盒適用于中量高純或者轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒制備和BAC/PAC大型質(zhì)粒制備。用堿裂解法從培養(yǎng)菌中提取質(zhì)粒DNA,采用獨特的溶液配方和內(nèi)毒素清除試劑,只需要幾次簡單離心去除蛋白質(zhì)、多糖、內(nèi)毒素、RNA等雜質(zhì),獲得高質(zhì)量的質(zhì)粒DNA。純化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的質(zhì)粒可直接應(yīng)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染甚至動物體內(nèi)實驗等對DNA純度要求很高的工作中。純化后期過程均在Eppendorf管中操作,方法簡單,不需特殊設(shè)備,無需過柱,不用酚氯fǎng抽提;基本可完全回收細(xì)菌裂解釋放出的質(zhì)粒,不必?fù)?dān)心質(zhì)粒DNA的丟失。本方法提取純化質(zhì)粒DNA,對質(zhì)粒損傷小,即使是10kb甚至100kb以上的大型質(zhì)粒或型BAC/PAC質(zhì)粒,只要堿裂解法能夠提取,就可以有效純化??蛇x擇任意小體積溶解質(zhì)粒,濃度可高達(dá)3μg/μl。
試劑盒組份(20次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75
溶液P1—————————————65ml
溶液P2—————————————50ml
溶液PⅢ-————————————50ml
雜質(zhì)清除劑A-——————————1.5ml
雜質(zhì)清除劑B-——————————15ml
內(nèi)毒素清除劑——————————5ml
試劑盒特點:
1.不需要使用有毒的苯酚,氯fǎng等試劑,也不需要乙醇沉淀??焖佟?方便、從50-70 ml大腸桿菌LB((Luria-Bertani)培養(yǎng)液中,可快速提取100μg -250μg純凈的高拷貝質(zhì)粒DNA,提取率達(dá)80-90 %。
2.獲得的質(zhì)粒產(chǎn)量高,濃度高,超螺旋比例高,純度好,可直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、PCR、體外轉(zhuǎn)錄、測序等各種分子生物學(xué)實驗。
3.內(nèi)毒素含量低(<0.1 EU/μg DNA),可直接應(yīng)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染。
注意事項
1. 提取的質(zhì)粒量與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、質(zhì)??截悢?shù)等因素有關(guān)。如果所提質(zhì)粒為低拷貝質(zhì)粒或大于10kb 的大質(zhì)粒,應(yīng)加大菌體使用量,同時按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大質(zhì)粒時操作動作要輕柔,應(yīng)該使用剪大了開口的吸頭,防止機械剪切對DNA 的損壞。
3. DNA 沉淀液沉淀離心后,可能看不到明顯沉淀。如未見沉淀,擔(dān)心DNA 丟失,可保留上清液,待完成全部操作后電泳鑒定,以確定是否獲得終產(chǎn)物(數(shù)百微克DNA 離心沉淀在管的側(cè)壁上,可能無法看到明顯團(tuán)塊)。
4. 得到的質(zhì)粒DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1 相當(dāng)于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶,也可能為2 條或者多條DNA 條帶,這主要是不同程度的超螺旋構(gòu)象質(zhì)粒泳動位置不一造成,與提取物培養(yǎng)時間長短、提取時操作劇烈程度等有關(guān)。本公司產(chǎn)品正常操作情況下基本超螺旋可以超過95%。
5. 質(zhì)粒DNA 確切分子大小, 必須酶切線性化后,對比DNA分子量Marker才可以知道。處于環(huán)狀或者超螺旋狀態(tài)的質(zhì)粒,泳動位置不確定,無法通過電泳知道確切大小。
儲存條件:室溫,有效期12個月。
本制品別名:細(xì)胞轉(zhuǎn)染用質(zhì)粒制備試劑盒|高純度質(zhì)粒重量提取試劑盒|細(xì)胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒提取試劑盒|無內(nèi)毒素培養(yǎng)菌質(zhì)粒提取試劑盒
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