BTN90901 菌體內(nèi)毒素清除劑

產(chǎn)品簡介
菌體內(nèi)毒素清除劑由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供,用于科研目的,我公司的菌體內(nèi)毒素清除劑品質(zhì)上佳,經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn),已然非常成熟,歡迎廣大新老客戶訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括菌體內(nèi)毒素清除劑在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:菌體內(nèi)毒素清除劑
英文名稱:Bacterial Endotoxin Scavenger
產(chǎn)品貨號:BTN90901
產(chǎn)品規(guī)格:200mL
內(nèi)毒素是E.coli細(xì)胞壁的主要成分,傳統(tǒng)的去除內(nèi)毒素的方法是將內(nèi)毒素和DNA一起純化出來,然后再用各種方法去除其中的內(nèi)毒素,操作繁瑣,DNA 回收率低。本產(chǎn)品可以直接把E.coli 表面的內(nèi)毒素去除,從根本上避免了內(nèi)毒素對后續(xù)操作(如質(zhì)粒DNA提取,重組蛋白質(zhì)提取)的污染。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 個(gè)在菌體收集階段去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品,從源頭上避免了內(nèi)毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸,從根本上防止了可能產(chǎn)生的污染。
2. 操作簡單快速,用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細(xì)菌表面的內(nèi)毒素,只需要10分鐘左右時(shí)間,不需要復(fù)雜儀器設(shè)備。
3.,能去除99%以上的內(nèi)毒素。
4.跟各種質(zhì)粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質(zhì)提取等操作兼容,DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA 丟失率可以高達(dá)50%)。
5. 不影響DNA和大部分蛋白質(zhì)的活性,處理過的質(zhì)粒DNA可用于轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
6. 既可小規(guī)模使用(在1.5mL離心管內(nèi)),也可放量用于大規(guī)模無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取和無內(nèi)毒素蛋白質(zhì)純化。
儲存條件:常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。
使用方法:
一:用于菌液小于3mL的樣品
1. 收集1.5-3mL E.coli 飽和菌液,12000rpm離心1分鐘,棄上清,得到細(xì)菌沉淀。
2. 加入1mL 本產(chǎn)品溫和混勻后10,000-12000rpm離心1分鐘,棄上清(含內(nèi)毒素)。
3. 再重復(fù)上述操作3-4次,得到的菌體可以直接進(jìn)入后續(xù)的無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取或無內(nèi)毒素蛋白質(zhì)提取程序。
二:用于菌液多于3mL的樣品
整個(gè)操作同上,只是在15或50mL塑料離心管中進(jìn)行,離心速度不能超過離心管的承受力,本產(chǎn)品的用量按比例增加。
疑難解答:
Q:為何用常規(guī)的方法很難去除生物樣品中的內(nèi)毒素?
A:因?yàn)閮?nèi)毒素帶電性跟DNA和部分蛋白質(zhì)相同,所以基于帶電性的分離方法(如硅膠膜吸附,離子交換吸附)不能將它們分開;同時(shí)內(nèi)毒素又是雙性分子(類似于細(xì)胞膜的磷脂分子),能夠形成大小不等的聚合物,跟質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)大小接近,所以基于分子量大小的分離方法(如凝膠排阻過濾和氯化銫超速離心)也不能將其有效分離。
根據(jù)您的關(guān)注的菌體內(nèi)毒素清除劑,您可能還對以下產(chǎn)品有需求:
名稱:海洋動物DNA提取試劑盒(柱式提取)
貨號:BTN130401
規(guī)格:50次
本試劑盒是在柱式動物DNA提取試劑盒(BTN71206)試劑盒基礎(chǔ)上優(yōu)化改良而得,專門針對海洋動物的基因組DNA提取的試劑盒,可用于魚類、蝦類、貝類、蟹類等海洋動物和水產(chǎn)動物的荃因組DNA提取,可以有效去除海洋動物組織中的蛋白、脂肪及其他有機(jī)化合物等雜質(zhì)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用本試劑盒提取的基因組DNA可適用于各種常規(guī)分子生物學(xué)操作,如:酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等試驗(yàn)。
2. 操作簡單安全,1小時(shí)內(nèi)即可獲得超純的基因組DNA,純化過程中不需要使用苯酚氯fǎng等有機(jī)試劑。
3. 應(yīng)用廣泛,適用于多種動物細(xì)胞和動物組織等。
4. 高,質(zhì)量和國外同類試劑盒相當(dāng),價(jià)格更低。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
溶液A | 50ml |
蛋白酶K溶液(20mg/mL) | 1ml |
溶液B | 15ml |
溶液C | 13ml |
離心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 15ml |
通用洗脫液 | 15ml |
說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運(yùn)輸及保存(蛋白酶K溶液需要低溫運(yùn)輸,-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
使用前請先在溶液C和通用洗柱液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。
1. 切取不多于30mg的組織材料,放入裝有200μL溶液A的離心管中,渦旋振蕩15秒。注意:根據(jù)提取的組織不同,起始量也稍有不同,腮的細(xì)胞量較大,一般建議提取量不超過20mg。如果需要去除RNA,可加入40μL RNase A(10mg/mL)溶液(客戶自備,BTN3160),振蕩15秒,室溫放置5分鐘。
2. 加入20μL蛋白酶 K溶液(20mg/mL),渦旋混勻,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。在56℃下放置,直至組織完全溶解,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠,再進(jìn)行下一步驟。注意:不同組織裂解時(shí)間不同,通常需0.5-2小時(shí)即可完成。扇貝組織0.5小時(shí)基本可裂解完全,蝦和魚類組織1小時(shí)。每小時(shí)振蕩混合樣品2-3次,每次振蕩混勻15秒。
3. 加入200μl溶液B,充分顛倒混勻,70℃放置10分鐘,溶液應(yīng)變清亮,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。注意:加入溶液B時(shí)可能會產(chǎn)生白色沉淀,一般70℃放置時(shí)會消失,不會影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變清亮,說明細(xì)胞裂解不徹底,可能導(dǎo)致提取DNA 量少和提取出的DNA 不純。
4. 加入200μl 無水乙醇,充分顛倒混勻,此時(shí)可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,簡短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。
5. 將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)離心吸附柱中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13,400×g)離心30秒,倒掉廢液,將吸附柱放回收集管中。
6. 向離心吸附柱中加入500μl溶液C(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm(~13,400×g)離心30秒,倒掉廢液,將吸附柱放入收集管中。
7. 向吸附柱中加入600μl 通用洗柱液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm(~13,400×g)離心30秒,倒掉廢液,將吸附柱放入收集管中。
8. 重復(fù)操作步驟7。
9. 將吸附柱放回收集管中,12000rpm(~13,400×g)離心2分鐘,倒掉廢液。將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。
10. 將吸附柱轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200μl 通用洗脫液,室溫放置2-5分鐘,12000rpm(~13,400×g)離心2分鐘,將溶液收集到離心管中。注意:通用洗脫液的體積不應(yīng)少于50μl,體積過小影響回收效率。為增加基因組DNA的得率,可將離心得到的溶液再加入吸附柱中,室溫放置2分鐘,12000rpm(~13,400×g)離心2分鐘。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用超純水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5 范圍內(nèi),pH值低于7.0會降低洗脫效率;且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA 降解。
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