酵母DNA提取試劑盒由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于科研目的，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價(jià)位合理，需要酵母DNA提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括酵母DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：酵母DNA提取試劑盒
英文名稱：Yeast DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號：ALH154
產(chǎn)品規(guī)格：50次|100次

本試劑盒用于快速的從酵母中提取基因組DNA。在針對酵母細(xì)胞特點(diǎn)配制的酵母裂解液作用下， 酵母細(xì)胞被裂解釋放出基因組DNA，然后蛋白沉淀液選擇性沉淀去除蛋白，zuì后純凈的基因組DNA通過異丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

試劑盒組份(100次)：
酵母裂解液——————30ml
蛋白沉淀液——————10ml
DNA溶解液 ——————5ml

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.不需要使用有毒的苯酚、氯fǎng等試劑。
2.快速，簡捷，整個(gè)過程可在1個(gè)小時(shí)內(nèi)完成。
3.結(jié)果穩(wěn)定，產(chǎn)量高（比離心柱型的產(chǎn)量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值達(dá)1.7～1.9，長度可達(dá)50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各種酶切反應(yīng)以及文庫構(gòu)建。

操作步驟：（實(shí)驗(yàn)前請先閱讀注意事項(xiàng)）
1. 吸取1.5ml 酵母培養(yǎng)物到一個(gè)1.5ml 離心管； 12,000rpm 離心2 分鐘，盡可能棄上清，必要時(shí)候可以用槍吸去。
2. 高速渦旋振蕩，打散重懸酵母細(xì)胞團(tuán)。
3. 加入300μl 酵母裂解液，渦旋振蕩混勻，或者用1 毫升的槍頭反復(fù)吹打混勻。酵母細(xì)胞的重懸分散對下一步裂解非常重要，必須充分分散重懸。
4. 將裂解物放置在70℃水浴15-30 分鐘。如果產(chǎn)量低，可以適當(dāng)提高水浴溫度和延長水浴時(shí)間，中間可以渦旋振蕩混勻幾次幫助裂解。
5. 冰上至少5 分鐘使回復(fù)到室溫。
6. 在回復(fù)到室溫的裂解物內(nèi)加入100μl 蛋白沉淀液后，在渦旋振蕩器上高速連續(xù)振蕩混勻20 秒?；靹蚝罂赡芤姷揭恍┬〉牡鞍讏F(tuán)塊。冰浴5 分鐘。
7. 13,000rpm 離心5-10 分鐘。這時(shí)應(yīng)該可以見到管底蛋白沉淀，也可能見到一些蛋白沉淀漂浮在液體表面。
8. 小心緩慢吸取上清到一個(gè)新的1.5ml 離心管中，不要吸到沉淀。吸取上清時(shí)，注意不要吸到管底的和漂浮在液體表面的蛋白沉淀。如果不小心將蛋白沉淀轉(zhuǎn)入新的離心管中，可再次離心2 分鐘后取上清。
9. 加入等體積的室溫異丙醇（約400μl），顛倒30 次混勻或者直到出現(xiàn)絮狀DNA 沉淀（或者白色渾濁沉淀）。
10. 12,000rpm 離心1 分鐘，在管底可以見到白色的DNA 沉淀塊，倒棄上清。
11. 加入1ml 70％乙醇，顛倒幾次漂洗DNA 沉淀，12,000rpm 離心1 分鐘， 倒去上清（注意不要把DNA 沉淀倒掉了），倒置后在吸水紙上輕敲幾下以控干殘留乙醇，還可以用槍頭小心吸掉管底沉淀周圍和管壁的殘留乙醇，空氣晾干沉淀幾分鐘。注意不要干燥過頭，否則DNA其難溶；也不能殘留太多乙醇，否則乙醇可能抑制下游如酶切反應(yīng)。
12. 加入40μl DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀，輕彈管壁混勻，可以放置在65℃溫育30-60 分鐘（不要超過一小時(shí)），也可以在室溫或者4℃放置過夜來重新水化DNA。期間不時(shí)的輕彈管壁幫助重新水化DNA。
13. 加入10-15μl RNase A（10mg/ml），或者1-2μl RNase A（100mg/ml）顛倒混勻，37℃溫育30－60 分鐘去除殘留RNA。該步驟主要作用為去除殘留的RNA，如果殘留RNA多，可以適當(dāng)延長時(shí)間。如果殘留RNA不影響實(shí)驗(yàn)，可略去該步驟。如果殘留的RNA酶可能影響實(shí)驗(yàn)，也可以用等體積酚/氯fǎng抽提去除，然后用標(biāo)準(zhǔn)的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃，如果要長時(shí)間存放，可以放置在－20℃。

儲存條件：室溫，有效期12個(gè)月。

本制品別名：酵母基因組DNA提取試劑盒

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