柱式病毒DNA提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于科研試驗，本品質(zhì)量穩(wěn)定，價位合理，需要柱式病毒DNA提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶，請到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

特別提示：包括柱式病毒DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：柱式病毒DNA提取試劑盒
英文名稱：Virus DNA column extraction kit
產(chǎn)品貨號：BTN70701
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒是在一管式病毒DNA提取試劑盒的基礎(chǔ)上開發(fā)的、專門用于從血清(血漿)等液體樣品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、陰道拭子等)中提取微量病毒DNA的產(chǎn)品。

試劑盒特點：
1. 操作簡單，整個過程只需要20分鐘左右，不需要額外在洗柱液中補加乙醇。
2. 靈敏度高，通過PCR 檢測到的zuì終靈敏度可以達(dá)到30-50拷貝/mL。
3. 安全，不需要使用苯酚和氯fǎng等有機溶液。
4. 如果加上病毒離心富集步驟，zuì多可以處理1.5mL液體病毒樣品。
5.與PCR和熒光PCR 兼容。
6. 價廉物美，遠(yuǎn)高于國外同類產(chǎn)品。
7.適用于各種材料，包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細(xì)胞上清液等無細(xì)胞材料。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	30ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脫液3.0	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 對于液體病毒樣品：在1.5mL離心管中加入0.1-0.2mL液體病毒樣品。如果病毒需要富集，可以將1.5mL液體在4℃ 24,000 g 冷凍離心60分鐘，移棄1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步處理。對于拭子樣品：將一個拭子放入離心管中，加入1mL自備的生理鹽水，振蕩器上充分振蕩半分鐘，然后轉(zhuǎn)移0.2mL 到1.5mL塑料離心管中，用于第2 步處理。
2. 加入0.6mL溶液A到步得到的0.2mL樣品中，振蕩30秒混勻后室溫放置10分鐘。注意：溶液A在4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
3. 短暫離心后將500μl溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫放置2分鐘。
4. 12000rpm室溫離心1分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。
5. 將剩余溶液短暫離心后全部轉(zhuǎn)移到步驟3的離心吸附柱中，室溫放置2分鐘。
6. 12000rpm室溫離心1分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12000 rmp室溫離心1分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室溫離心1分鐘(干甩)，棄含穿透液的離心管。
9. 將干甩后的離心吸附柱套入到一個自備的RNase-free的1.5mL離心管中，在離心吸附柱的濾膜的中部加入30-100μl DNA 洗脫液3.0，然后室溫放置2分鐘。
10. 12000rpm室溫離心1分鐘，離心管中的溶液即為病毒DNA溶液。
11. DNA樣品可以直接用于PCR，也可放-20℃長期保存。

疑難解答：
Q：提取液體樣品/病毒核酸(RNA或DNA)為何很難？
A：原因一是量少。病毒顆粒中的RNA或DNA是作為遺傳物質(zhì)保存，每個病毒zuì多只攜帶幾個拷貝(而一個細(xì)胞中有上萬種RNA分子，每種RNA 有很多拷貝)，同時其長度也十分有限(一般不到細(xì)胞基因組的萬分之一)，樣品中病毒數(shù)往往又不是很多，使得樣品中病毒核酸的量往往比一個細(xì)胞中核酸的量還少，所以操作中十分容易丟失。另外，由于得到的核酸量很少，不能使用電泳和測OD檢測，只能通過PCR或RT-PCR 檢測，而PCR或RT-PCR的條件又需要優(yōu)化，所以要確定提取是否成功十分不容易。

根據(jù)您的關(guān)注的柱式病毒DNA提取試劑盒，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：



名稱：紅細(xì)胞裂解液A型(核酸純化)
貨號：BTN60403
規(guī)格：250mL
本品用于快速裂解哺乳動物全血中的紅細(xì)胞而基本不破壞白細(xì)胞和其他淋巴細(xì)胞的完整性。由于紅細(xì)胞是血液的主要細(xì)胞成份，不含DNA和RNA，其所含血紅素能抑制PCR反應(yīng)，所以先用本產(chǎn)品裂解紅細(xì)胞，再提取基因組DNA或RNA 有助于提高所得樣品純度。

產(chǎn)品特點：
1.快速，一次處理只需要2-3分鐘。處理后提取血液DNA可以不需要酚/氯fǎng去蛋白質(zhì)。
2.，一次處理能裂解80%以上的哺乳動物紅細(xì)胞，一般樣品zuì多只需要處理兩次。
3.擴容性好，可以一次處理多達(dá)幾十毫升的樣品，也可以處理100μL的血液。
4. 兼容性好，可以與市場上大多數(shù)血液DNA提取試劑盒結(jié)合使用。

儲存條件：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在裝有抗凝血液的離心管中，按1:1的比例加入紅細(xì)胞裂解液A型并輕柔顛倒混勻。
2. 5000-10000 g室溫離心2分鐘，小心吸棄棄上清。
3. 將細(xì)胞沉淀重懸于1/2 體積的紅細(xì)胞裂解液A型中，輕柔吹打混勻后5000-10000g室溫離心2分鐘。
4.沉淀即為去除了紅細(xì)胞的血液細(xì)胞，可以直接用于后續(xù)的實驗。

名稱：菌體內(nèi)毒素清除劑
貨號：BTN90901
規(guī)格：200mL
內(nèi)毒素是E.coli細(xì)胞壁的主要成分，傳統(tǒng)的去除內(nèi)毒素的方法是將內(nèi)毒素和DNA一起純化出來，然后再用各種方法去除其中的內(nèi)毒素，操作繁瑣，DNA 回收率低。本產(chǎn)品可以直接把E.coli 表面的內(nèi)毒素去除，從根本上避免了內(nèi)毒素對后續(xù)操作(如質(zhì)粒DNA提取，重組蛋白質(zhì)提取)的污染。

產(chǎn)品特點：
1. 個在菌體收集階段去除內(nèi)毒素的產(chǎn)品，從源頭上避免了內(nèi)毒素跟DNA和胞漿蛋白的接觸，從根本上防止了可能產(chǎn)生的污染。
2. 操作簡單快速，用酶溶液溫和清洗菌體3-4次即可去掉細(xì)菌表面的內(nèi)毒素，只需要10分鐘左右時間，不需要復(fù)雜儀器設(shè)備。
3.，能去除99%以上的內(nèi)毒素。
4.跟各種質(zhì)粒DNA提取、基因組DNA提取和蛋白質(zhì)提取等操作兼容，DNA丟失率只有10%左右(其他方法DNA 丟失率可以高達(dá)50%)。
5. 不影響DNA和大部分蛋白質(zhì)的活性，處理過的質(zhì)粒DNA可用于轉(zhuǎn)染實驗。
6. 既可小規(guī)模使用(在1.5mL離心管內(nèi))，也可放量用于大規(guī)模無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取和無內(nèi)毒素蛋白質(zhì)純化。

儲存條件：常溫運輸和保存，有效期一年。

使用方法：

一：用于菌液小于3mL的樣品
1. 收集1.5-3mL E.coli 飽和菌液，12000rpm離心1分鐘，棄上清，得到細(xì)菌沉淀。
2. 加入1mL 本產(chǎn)品溫和混勻后10,000-12000rpm離心1分鐘，棄上清(含內(nèi)毒素)。
3. 再重復(fù)上述操作3-4次，得到的菌體可以直接進入后續(xù)的無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取或無內(nèi)毒素蛋白質(zhì)提取程序。

二：用于菌液多于3mL的樣品
整個操作同上，只是在15或50mL塑料離心管中進行，離心速度不能超過離心管的承受力，本產(chǎn)品的用量按比例增加。

疑難解答：
Q:為何用常規(guī)的方法很難去除生物樣品中的內(nèi)毒素?
A:因為內(nèi)毒素帶電性跟DNA和部分蛋白質(zhì)相同，所以基于帶電性的分離方法(如硅膠膜吸附，離子交換吸附)不能將它們分開;同時內(nèi)毒素又是雙性分子(類似于細(xì)胞膜的磷脂分子)，能夠形成大小不等的聚合物，跟質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)大小接近，所以基于分子量大小的分離方法(如凝膠排阻過濾和氯化銫超速離心)也不能將其有效分離。

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